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1EvaluationWarning:ThedocumentwascreatedwithSpire.Docfor.NET.热点16生物技术实践1．(2018·河北衡水中学十五模)请回答下列有关生物技术实践方面的问题：(1)培养基配制的步骤为：计算→称量→________→________→倒平板；为统计样品中活菌的数目，在37℃培养箱中培养适当时间后形成菌落，一般选择菌落数在________的平板进行计数。(2)泡菜虽然好吃，但其中的亚硝酸盐会危害人体健康。亚硝酸盐在特定条件下会转变成________，这是一种致癌物，测定亚硝酸盐含量的原理是在__________条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应后，与N－1－萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色物质。(3)腐乳制作的流程：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。配制卤汤时，要使卤汤中酒的含量控制在________左右。(4)某同学采用血细胞计数板计数(规格为16×25，0.1mm3)，统计4个中格中的细菌数，计算出每个小格所含细菌的平均数为2个，则每毫升样品中的细菌数是(稀释倍数为103)________个。(5)对于频繁使用的菌种可将试管放入________保藏。答案(1)溶化灭菌30～300(2)亚硝胺盐酸酸化(3)12%(4)8×109(5)4℃冰箱解析(1)培养基配制的步骤：按配方计算培养基中各种成分的用量→称量(一般动作要迅速一些，因为其中可能有些成分容易吸潮)→溶化(将称好的各种成分溶解在水中，如果是固体培养基，需要使用凝固剂，如琼脂等；溶化时，注意搅拌，防止糊底)→灭菌(高压蒸汽灭菌)→倒平板；选择菌落数在30～300的平板进行计数，是因为在这个范围内，各个菌落之间的营养竞争不是特别剧烈而不会对菌落的形成造成比较大的干扰，同时也能在数菌落过程中让人眼有效分辨出各个菌落。(2)亚硝酸盐在特定条件下(适宜的pH、温度和一定的微生物作用)转变为亚硝胺。亚硝胺具有很强的致癌、致畸、致突变作用，对人体有害；在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，再与N－1－萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色物质。(3)在卤汤中加酒，作用有二：其一是抑制微生物生长；其二是调味。但要求控制好量，一般要控制在12%左右。(4)血细胞计数板计数(规格为16×25,0.1mm3)，每个小格所含细菌的平均数为2个，稀释倍数为103，则每毫升样品中的细菌数＝2÷0.1×1000×16×25×103＝8×109个。(5)为了保持菌种的纯净，需要进行菌种的保藏。对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法，将已长成菌落的试管放入4℃冰箱中保藏。2．(2018·唐山三模)为了研究新型抗生素X对细菌E·coli和S·albus的杀菌效果，做了如下实验：2①配制培养基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂、H2O等)；②制作无菌平板；③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落情况。回答下列问题：(1)该培养基中微生物所需的氮来源于________________________。(2)灭菌是指使用强烈的理化因素________________________________。(3)步骤③中，实验组的操作是利用______________法将两种细菌分别接种在培养皿中，然后将分别沾有不同浓度抗生素X的直径3mm的圆纸片，放在布满细菌的培养基表面上。一段时间后，测得圆纸片周围清晰区的直径数据如下：细菌不同浓度抗生素下清晰区直径(mm)0.5万单位1万单位5万单位10万单位E·coli,7,15,16,16S·albus,－,8,13,17比较1万和10万单位抗生素X在控制E·coli和S·albus方面的效果：________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)请从进化的角度分析滥用抗生素的危害。________________________________________________________________________________________________________________________________________________答案(1)牛肉膏、蛋白胨(2)杀死物体内外所有微生物，包括芽孢和孢子(3)稀释涂布平板在控制S·albus方面，10万单位抗生素X的效果明显优于1万单位抗生素X；在控制E·coli方面，两种浓度的抗生素X无明显差异(4)滥用抗生素可能会加速筛选出大量抗生素抗性细菌，使抗性基因的基因频率不断变大，细菌种群朝着抗抗生素的方向进化。解析(1)牛肉膏和蛋白胨都含有有机氮，都可以作为氮源。(2)灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。(3)实验室常用稀释涂布平板法与平板划线法将细菌接种于培养基上，本实验需将菌种均匀分布到培养基表面，因此采用稀释涂布平板法接种。圆纸片周围清晰区的直径越大，说明抗生素X对细菌的杀灭效果越好。分析表格数据可知，在控制S·albus方面，10万单位3抗生素X的效果明显优于1万单位抗生素X，在控制E·coli方面，两种浓度的抗生素X无明显差异。(4)滥用抗生素不断淘汰不耐药的细菌，导致耐药菌的比例增大，因此会加速筛选出大量抗生素抗性细菌，使细菌种群朝着抗抗生素的方向进化。3．(2018·江西南昌二模)纤维素分解菌是人们生活中应用广泛的一种微生物，其中含有纤维素酶(蛋白类物质)能够分解纤维素。回答下列有关问题：(1)组成纤维素的单体是________。在某真菌细胞中与纤维素酶合成分泌直接有关的具膜细胞器是________________________________。(2)在筛选纤维素分解菌的过程中，人们发明了__________染色法，这种方法能够通过________直接对微生物进行筛选。(3)利用人工诱变的方法处理某纤维素分解菌后，如何从其中筛选出分解纤维素能力强的生产用菌种？请简要写出：①实验思路；②从突变的不定向性角度，预测观察到的实验结果。(提示：培养基中纤维素被降解后，产生纤维素酶的菌落周围将会出现明显的透明圈)①________________________________________________________________________________________________________________________________________________②________________________________________________________________________________________________________________________________________________答案(1)葡萄糖内质网、高尔基体(2)刚果红颜色反应(3)①将诱变得到的纤维素分解菌培养在含有纤维素和刚果红的培养基中，选出透明圈大的菌株为生产用菌株。②在培养基中可能有透明圈较大的菌株，也可能有透明圈较小的菌株。解析(1)纤维素为多糖，其单体为葡萄糖。(2)筛选纤维素分解菌使用刚果红染色法，通过颜色反应直接对微生物筛选。(3)①将诱变得到的纤维素分解菌培养在含有纤维素和刚果红的培养基中，选出透明圈大的菌株为生产用菌株。②因为变异是不定向的，培养基中可能有透明圈较大的菌株也可能有透明圈较小的菌株。4．近年来，《舌尖上的中国》引发全民关注美食的热潮，其中不乏利用微生物发酵制作的美食，如素有“东方奶酪”之称的“石宝寨牌”忠州豆腐乳、中国泡菜领导品牌“吉香居”等。请回答下列有关问题：(1)“石宝寨牌”忠州豆腐乳前期发酵是在严格的无菌条件下，接入优良毛霉菌种，这样可以________________________________，温度应控制在________，并保持一定的__________。然后向长满毛霉的豆腐块加盐，其作用是__________________________________，同时，盐还能__________________________，避免4豆腐块腐败变质。后期加入食盐、香料粉、乌杨白酒密闭发酵6个月，乌杨白酒含量一般控制在12%左右的原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)制作吉香居泡菜时，起主要作用的微生物是________。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是______________。在发酵初期，很多杂菌会大量繁殖，其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物是________________。从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是__________________________________________。答案(1)避免其他菌种的污染，保证产品的质量'15～18℃'湿度'析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬'抑制微生物的生长'酒精含量过高会延长腐乳成熟的时间，含量过低，则不能抑制杂菌生长(2)乳酸菌'增加乳酸菌含量'酵母菌(或产膜酵母)'乳酸菌数量增加，杂菌数量减少解析(1)传统腐乳制作中所需的毛霉来自空气中的毛霉孢子，而现代的腐乳生产是将优良的毛霉菌种接种在豆腐上，这样可以避免其他菌种的污染，保证产品的质量。制作腐乳时温度应控制在15～18℃，并保持一定的湿度。腐乳制作过程中，加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，同时，盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。酒含量要控制在12%左右，因为酒精含量过高，使腐乳成熟的时间延长，酒精含量过低，不能抑制微生物的生长，造成杂菌污染。(2)制作泡菜时，起主要作用的微生物是乳酸菌。在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液的目的是增加乳酸菌含量。在发酵初期，酵母菌(或产膜酵母)可使泡菜水的表面形成白膜，开始制作后，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌数量增加，杂菌数量减少。5．(2018·绵阳南山中学月考)你对泡萝卜、酸黄瓜和酸豆角一定不陌生吧？一碟酸甜香脆的泡菜，能令人胃口大开。请根据所学知识回答下列问题。(1)制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜，原因是新鲜蔬菜中________________。(2)制作泡菜所利用的菌种是________，与酿造果酒所需菌种相比较，该菌种细胞结构上的主要特点是________________________。(3)配制的盐水需煮沸，其作用是________________和________________。(4)测定亚硝酸盐含量的原理是亚硝酸盐与__________发生重氮化反应后，与N－1－萘基乙二胺盐酸盐结合形成________色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准显色液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。(5)提取亚硝酸盐的过程中使用的氢氧化铝乳液的作用是________。答案(1)亚硝酸盐的含量低(2)乳酸菌没有以核膜为界限的细胞核(或没有成形的细胞核)5(3)杀死盐水中的微生物去除盐水中的氧气(4)对氨基苯磺酸玫瑰红(5)除去杂质解析(1)制作泡菜应选用新鲜的蔬菜，因为新鲜蔬菜中亚硝酸盐含量低。(2)制作泡菜利用的是乳酸菌而酿果酒利用的是酵母菌，乳酸菌是原核生物，酵母菌是真核生物，所以最大区别是乳酸菌没有以核膜为界限的细胞核。(3)盐水需要煮沸是为了杀死盐水中的微生物，并且去除盐水中的氧气，因为乳