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-1-EvaluationWarning:ThedocumentwascreatedwithSpire.Docfor.NET.考点42微生物的培养与应用一、基础题组1．利用选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物，通过缺氮培养基、含青霉素的培养基、含氨的无机培养基，可从土壤中分离出的微生物依次是()A．硝化细菌、放线菌、根瘤菌B．根瘤菌、青霉菌、圆褐固氮菌C．圆褐固氮菌、放线菌、硝化细菌D．圆褐固氮菌、酵母菌、硝化细菌答案D解析缺氮培养基、含青霉素的培养基、含氨的无机培养基上能生长的生物依次是自生固氮微生物、真菌、硝化细菌。根瘤菌属于共生固氮微生物，放线菌不属于真菌，因此只有D项符合题意。2．下列关于制备固体培养基时倒平板的叙述，正确的是()A．倒好的培养基和培养皿要进行高压蒸汽灭菌处理B．应将打开的培养皿的皿盖放到一边，以免培养基溅到培养皿的皿盖上C．为了防止微生物落入培养基，要在火焰旁进行操作D．倒好培养基的培养皿，要立即将平板倒过来放置答案C解析培养基和培养皿都应该在倒平板之前进行高压蒸汽灭菌，A错误；倒平板时，用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基(约10～20mL)倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，B错误；倒好培养基的培养皿，等培养基冷却凝固后，再将平板倒过来放置，D错误。3.在分离、纯化大肠杆菌实验中，划线接种如图甲、培养结果如图乙。有关叙述错误的是()A．接种前应对培养基进行高压蒸汽灭菌B．连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落C．接种过程中至少需要对接种环灼烧5次D．图甲中a区域为划线的起始位置答案D-2-解析用于微生物培养的培养基在接种前应进行高压蒸汽灭菌，A正确；微生物接种采用连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落，B正确；由图甲可知，平板共划线4次，每次划线前和划线结束后均需灼烧接种环，所以至少需要对接种环灼烧5次，C正确；由图乙可知，图甲中d区域为划线的起始位置，D错误。4．下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是()A．利用稀释涂布平板法只能分离微生物不能对微生物进行计数B．接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单菌落C．以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌D．用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先增加后减少答案A解析用稀释涂布平板法可以分离微生物也可以对微生物进行计数，A错误；接种划线可以将菌体分散，经过培养可以得到单菌落，B正确；以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌，C正确；在泡菜腌制过程中，开始亚硝酸盐含量增加，一般腌制10天后含量开始下降，D正确。5．高温淀粉酶在大规模工业生产中是极为重要的酶制剂。研究者从热泉中筛选出了能高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，筛选过程如下图所示。(1)进行②过程所用的接种方法是______________。微生物筛选培养过程，为了防止杂菌污染，需要对培养基和培养皿进行____________处理，整个过程中需要进行____________操作。(2)培养基一般要含有细菌生存所需的水、无机盐、碳源和________________。(3)部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放____________分解培养基中的淀粉，在不同菌落周围形成大小不同的透明圈，应挑出______________的菌落，接种到Ⅱ号培养基上。(4)分离细胞时通常用固体培养基，原因是________________________________________________________。(5)培养微生物实验中使用过的培养基及其培养物必须经过__________处理后才能丢掉，以防止培养物的扩散。答案(1)稀释涂布平板法灭菌无菌(2)氮源(3)淀粉酶透明圈大(4)固体培养基容易形成固定的菌落，便于进行筛选-3-(5)灭菌解析微生物培养前需对培养皿和培养基等进行灭菌处理，整个接种过程中需要进行无菌操作；培养基的成分一般包括水、无机盐、碳源、氮源；本题是要选择能产生耐高温淀粉酶的嗜热菌，所以能产生淀粉酶的细菌会分解培养基中的淀粉，培养基中出现以淀粉分解菌为中心的透明圈，依此可挑选出相应的菌落。6．某实验小组为了研究不同的碳源对纤维素分解菌分解纤维素能力的影响，以稻草粉、纤维素粉和滤纸浆为纤维素来源，研究了A、B、C、D四种纤维素分解菌，实验结果如表所示。请分析回答下列问题：菌株CMC酶活性[(mg·mL)/30min]稻草粉纤维素粉滤纸浆A0.270.240.56B0.680.340.63C0.830.330.78D0.180.300.53(1)实验室培养基的营养成分除了碳源还有________________，培养基灭菌的常用方法为________________。接种微生物的常用方法有________________________。(2)实验室分离纤维素分解菌的培养基一般要加入__________，该物质能和纤维素形成红色复合物，当纤维素分解菌将纤维素分解后，红色复合物消失，形成的________的大小可作为判断纤维素酶活性大小的依据。(3)分析表格可知，该实验的自变量是______________，若要分解稻草粉中的纤维素，则最好选择________(填表格中的字母)菌株。(4)通过实验数据可以得出的实验结论是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。答案(1)氮源、水和无机盐高压蒸汽灭菌法平板划线法和稀释涂布平板法(2)刚果红透明圈(3)纤维素的来源、菌种C(4)不同菌株对同一碳源作用产生的酶活性不一样，同一菌株对不同纤维素碳源的分解能力也不一样解析(1)培养基的营养成分包括碳源、氮源、水和无机盐等，培养基灭菌常用的方法为高压蒸汽灭菌法。平板划线法和稀释涂布平板法是接种微生物常用的方法。(2)在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合-4-物。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，这样，我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。透明圈越大，说明纤维素酶活性越大。(3)该实验研究不同的碳源对纤维素分解菌分解纤维素能力的影响，并研究了A、B、C、D四种纤维素分解菌，因此自变量为纤维素的来源、菌种。由表格可知，以稻草粉为纤维素来源时，纤维素分解菌C的CMC酶活性最高，因此要分解稻草粉中的纤维素，最好选择C菌株。7．在调查和分离湖水中耐盐细菌的实验中，先将10升湖水水样浓缩至10毫升，然后各取浓缩水样1毫升，涂布到多个培养皿中培养。请分析回答下列问题：(1)可以通过提高培养基中________的浓度，筛选被调查细菌，这种培养基被称为________培养基。(2)要提高实验结果的可靠性，排除培养基未彻底灭菌的可能性，应该设置的对照组是________________。为检验(1)中筛选方法的效果，可以设置的对照组是________________。(3)在微生物的培养过程中，实验室对培养基灭菌常用的方法是____________。为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿________培养。在培养基上产生的单个菌落在生态学中可以被称为________。(4)根据培养皿上菌落的平均数可以计算湖水中该种细菌的密度，但计算的数据要比实际活菌的数目少，原因是________________________________________________________________________。(5)在3个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的样品液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别是156、178和191。该过程采取的接种方法是________，每克土壤样品中的细菌数量为________个。答案(1)盐(NaCl)选择(2)未接种(或接种等量无菌水)的培养基未加高浓度盐的培养基培养(3)高压蒸汽灭菌倒置种群(4)当两个或多个细胞连在一起时，在平板上观察到的是一个菌落(5)稀释涂布平板法1.75×108解析(5)每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M＝(156＋178＋191)÷3÷0.1×105＝1.75×108个。8．某兴趣小组欲调查学校某区域土壤中微生物的种类，并进行了微生物的分离等工作。回答下列问题：(1)该小组采用稀释涂布平板法从土壤中分离分解纤维素的微生物，在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是________________________；分离得到的纯化单菌落属于________(填“种群”或“群落”)；筛选纤维素分解菌常用-5-________法，根据菌落周围是否出现________来判定。(2)该小组采用平板划线法分离土壤中的微生物，操作时，接种环通过________灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是________________________________________________________________________。(3)鉴定土壤中微生物的种类，可以通过菌落的________________________(至少两点)等特征。在实验中小组每隔24小时统计一次菌落数目，并选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止________________________________。答案(1)检测培养基灭菌是否合格种群刚果红染色透明圈(2)灼烧将聚集的菌体逐渐稀释以便获得单个菌落(3)形状、大小、隆起程度及颜色因培养时间不足导致遗漏菌落数目解析(1)在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是检测培养基灭菌是否合格；分离得到的纯化单菌落是同种生物，属于种群；筛选纤维素分解菌常用刚果红染色法，根据菌落周围是否出现透明圈来判定。(2)接种环常采用灼烧灭菌法灭菌；在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是将聚集的菌体逐渐稀释以便获得单个菌落。(3)鉴定土壤中微生物的种类，可以通过菌落的形状、大小、隆起程度及颜色等特征。在实验中小组每隔24小时统计一次菌落数目，并选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因培养时间不足导致遗漏菌落数目。9．下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题：成分含量成分含量蛋白胨10.0g乳糖5.0g蔗糖5.0gK2HPO22.0g显色剂(伊红美蓝)0.2g琼脂12.0g将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL(1)大肠杆菌的同化类型为________，从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于________。(2)在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是________________，因此需对培养基和培养皿进行________(填“消毒”或“灭菌”)，操作者的双手需要进行清洗和________。空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使________，还能破坏DNA的结构。(3)根据用途划分，该培养基属于________(填“选择”或“鉴别”)培养基，若要分离能分解尿素的细菌，需将培养基中________换成________，若要鉴定分解尿素的细菌，还需将-6-伊红美蓝换成________。(4)培养大肠杆菌时，常用的接种方法是________________和________________。通过上述方法可以分离得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，称为________。(5)(多选)使用以下微生物发酵生产特定产物时，所利用的主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是()A．制作果酒B．由果酒制作果醋C．制作泡菜D．制作腐乳答案(1)异养型'分解者(2)防止外来杂菌的污染