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1EvaluationWarning:ThedocumentwascreatedwithSpire.Docfor.NET.微生物的培养与应用1．(2018·江西上饶一模)生物兴趣小组欲寻找土壤中可以降解塑料袋的微生物。(已知塑料袋的主要成分为聚乙烯：2—CH2(1)要寻找土壤中能降解塑料袋的微生物，需要在______________的环境中采集土样。(2)选择培养过程应制备____________________的培养基，从物理性质划分，其为________培养基。(3)若需要对所得菌种进行分离计数，应采用______________进行接种。(4)为避免污染，需将培养皿呈________状态放置。(5)在对所得菌种进行大规模工业化培养之前，需要先____________________。(6)该实验如需对照，对照组应___________________________________________________________________________________________________。解析：(1)要寻找土壤中能降解塑料袋的微生物，需要在富含聚乙烯的环境中采集土样。(2)选择培养过程应制备以聚乙烯为唯一碳源的培养基，从物理性质分，其为固体培养基。(3)若需要对所得菌种进行分离计数，应采用稀释涂布平板法进行接种。(4)为避免污染，需将培养皿呈倒置状态放置。(5)在对所得菌种进行大规模工业化培养之前，需要先测定菌种分解聚乙烯的能力。(6)该实验如需对照，对照组应配置以聚乙烯为唯一碳源的固体培养基，不接种任何菌种或接种等量的无菌水。答案：(1)富含聚乙烯(2)以聚乙烯为唯一碳源固体(3)稀释涂布平板法(4)倒置(5)测定菌种分解聚乙烯的能力(6)配置以聚乙烯为唯一碳源的固体培养基，不接种任何菌种或接种等量的无菌水2．(2018·江西新余期末)日前网络传言手机细菌比马桶多。如图为两电视台通过实验展示的调查结果。回答下列相关问题：(1)该实验需制备________(填“固体”或“液体”)培养基。在液体培养基中加入________可配置成固体培养基。(2)据图，两电视台均采用____________________法接种，接种前需要采用____________________法对培养基进行灭菌。(3)通过观察菌落的________________________________(答出两点即可)可以初步鉴定手机屏幕和马桶按钮上的生物类群。两电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，2你认为原因是_______________________。(4)按图操作取样面积，实验员测定某手机屏幕的细菌数量，将10mL菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为100的样品液接种到三个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为98、100、102，则该手机屏幕的细菌数为________个/平方厘米。该实验对照组要取培养基涂布______________进行培养。解析：(1)从图示内容看，菌液在培养基上形成菌落，故为固体培养基，通常固体培养基配制是在液体培养液中加入一定量琼脂。(2)从图示内容看，微生物均匀分布而不呈线状，说明采用的接种方法是稀释涂布平板法，接种前需要采用高压蒸汽法对培养基进行灭菌。(3)通过观察菌落的形态、颜色、形状、大小、隆起程度等可以初步鉴定手机屏幕和马桶按钮上的生物类群，实验结果不同的原因可能是手机的取样和马桶的取样都不相同，也可能是对手机或马桶的处理手段不同。(4)对于微生物计数，通常在不同样方求平均值，该手机屏幕的细菌数为(98＋100＋102)/3÷(5×5)×(10÷0.1)×100＝4×104个/平方厘米。对照组通常在培养基中接种等量无菌水。答案：(1)固体琼脂(2)稀释涂布平板高压蒸汽灭菌(3)形状、大小、隆起程度和颜色等手机的取样和马桶的取样都不相同(4)4×1040.1mL无菌水3．利用微生物转化胆固醇在医药生产上有重要作用。实验人员从土壤中筛选胆固醇转化菌株的过程如图所示。请分析回答下列问题：(1)实验人员将土壤样品接种到富集培养液①中培养时，需要将其置于摇床上不断振荡，其主要的作用是________________。(2)培养一段时间后，从①中取适量培养液转移接种到选择培养液②中培养36h后，再转移到相同的选择培养液③中培养。与培养液①不同，培养液②③成分的主要特点是__________________。在相同的培养液②③中转移培养主要是为了避免原培养液中________的干扰，同时，又可以_________________________________________________________________________________。(3)从③中取适量的培养液涂布到④之前，需要________________，涂布前需将涂布器________。(4)根据⑤中菌落的形态特征，选取所需的菌种接种到________培养基⑥中临时保存。解析：(1)分解胆固醇的微生物属于需氧型微生物，所以将土壤样品接种到富集培养液①中培养时，需要将其置于摇床上不断振荡以增加溶解氧。(2)据图分析，培养液②③的作用是选择培养，筛选胆固醇转化菌株需要使用以胆固醇为唯一碳源的选择培养基。在相同的培养3液②③中转移培养主要是为了避免原培养液中碳源的干扰，又可以筛选纯化获得可转化胆固醇的菌种。(3)选择培养后的培养液需要进行梯度稀释才能进行涂布培养，涂布前需将涂布器在酒精灯火焰上进行引燃灭菌并冷却。(4)筛选出目的菌种后，将菌种接种到斜面培养基⑥中临时保存。答案：(1)增加溶解氧(2)以胆固醇作为唯一碳源碳源筛选纯化获得可转化胆固醇的菌种(3)梯度稀释引燃并冷却(4)斜面4．(2018·湖南雅礼中学月考)某中学高二生物兴趣小组为了调查细菌在自然环境中的分布情况，分别从学校附近的河流和草地采集到水样和土样进行实验检测。如表是他们实验报告里诸多数据表格中的两份，据此回答有关问题：表一成分蛋白胨乳糖磷酸二氢钾琼脂蒸馏水2%伊红水溶液0.5%美蓝水溶液含量10g10g2g20～30g1000mL20mL13mL表二菌株编号12345透明圈直径R0.41.12.02.10.55菌株直径r0.30.60.80.90.3R/r1.31.82.52.31.8(1)总大肠菌群是一个粪便污染的指标菌，从水中检出的情况可以表示水中是否有粪便污染及其污染程度。题中是其培养基的配方，从物理性质来看，该培养基属于__________培养基，对该培养基进行灭菌时，可采用______________(器具)进行灭菌。(2)为检测水体中大肠杆菌数量，将水样适当稀释后，取样涂布在据表一配方配制的平板培养基中，应选择颜色为黑色的菌株进行计数。该方法是通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，其原理是________________________。(3)为了进一步筛选出抗青霉素的大肠杆菌，同学们又进行了一系列对照实验操作，其中，实验组是在原培养基配方中加入了一定量的________，发现该培养基中的菌落数比对照组少很多，这说明了________具有低频性的特点。(4)表二是检测土壤中含纤维素分解菌的观察结果，培养基成分中的纤维素能与________形成红色复合物。据表二分析，________号菌株最可能具有较高产纤维素酶的能力且酶的活性也较高，理由是_______________________________。解析：(1)培养基配方中含有凝固剂琼脂，可知是固体培养基；培养基灭菌一般采用高压蒸汽锅进行高压蒸汽灭菌。(2)大肠杆菌代谢产物能与染料伊红美蓝反应，使菌落呈黑色，实验中选择颜色为黑色的菌落进行计数。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌，所以统计平板上的菌落数可推测样品中的活菌数。(3)4含有青霉素的培养基只有抗青霉素的微生物才能存活。所以为了筛选出抗青霉素的大肠杆菌，必须配制加入青霉素的选择培养基；抗青霉素型大肠杆菌主要是由敏感型大肠杆菌基因突变而来，所以加入了青霉素的选择培养基实验组中的大肠杆菌菌落数比没有加入青霉素的对照组培养基中的菌落数少很多。(4)刚果红是鉴定纤维素分解菌是否存在及量的多少的指示剂；据表分析，3号菌株R/r的值较大。因此可以确定3号菌株最可能具有较高产纤维素酶的能力且酶的活性也较高。答案：(1)固体高压蒸汽锅(2)当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌(3)青霉素基因突变(4)刚果红33号菌株R/r的值较大