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1EvaluationWarning:ThedocumentwascreatedwithSpire.Docfor.NET.课后定时检测案38微生物的培养和利用基础对点练——考纲对点·夯基础考点一微生物的分离和培养1．不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述，不正确的是()A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素B．碳源物质也是该微生物的能源物质C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质D．水是该微生物的营养要素之一解析：碳源分为有机碳源和无机碳源。当有机物作为碳源时，既是碳源，又可作为能源；当无机物作为碳源时，只能作为碳源，不能作为能源。该碳源是二氧化碳，属于无机物，不能作为微生物的能源物质。答案：B2．下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是()A．操作顺序为计算→称量→溶化→倒平板→灭菌B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯C．待培养基冷却至50℃左右时倒平板D．待平板冷却凝固后将平板倒过来放置解析：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算→称量→溶化→灭菌→倒平板，其顺序不能颠倒。牛肉膏容易吸潮，所以称好后需将称量纸一同放入烧杯，当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸。待培养基冷却到50℃左右，用手触摸锥形瓶刚刚不烫手，并且培养基处于溶化状态时开始倒平板，平板冷却凝固后才能倒置。答案：A3．细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌()A．接种环、手、培养基B．高压锅、手、接种环C．培养基、手、接种环D．接种环、手、高压锅解析：一般说来灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力，对于培养基、操作器皿和接种环等都需要灭菌。消毒仅指杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害，如操作者的手和衣着需要消毒处理。高压蒸汽通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。火焰灼烧，可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环。答案：C考点二某种微生物数量的测定4．能够测定样品活菌数的方法是()A．稀释涂布平板法B．直接计数法C．质量法D．比浊法解析：直接计数法是利用特定的计数板，在显微镜下计算一定容积量样品中微生物的数量，不能区分死菌与活菌；质量法是用于微生物生长测定的一种方法，有湿重法和干重法，也可以通过对蛋白质和DNA含量反映细胞的物质质量；比浊法是在一定范围内，悬液中细胞浓度与混浊度成正比，即与光密度成正比，菌越多，光密度越大；活菌在适宜培养基和良好生长条件下通过生长形成菌落，此法又称活菌计数法，可采用稀释涂布平板法接种。答案：A考点三培养基对微生物的选择作用5．通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培2养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出()①大肠杆菌②霉菌③放线菌④固氮细菌A．④②③B．①②③C．①③④D．只有③④解析：缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长，而固氮细菌能生长；在培养基中加青霉素可以抑制细菌和放线菌等原核生物细胞壁的合成，而霉菌属于真核生物，故能生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长，对放线菌的生长无影响。答案：A大题冲关练——综合创新·求突破6．[2019·安徽合肥高三质量检测]依据所学生物技术知识，分析回答下列问题：(1)日常生活中烹饪产生的油烟冷却后形成液态的油脂，工业生产中提取玫瑰精油的原理与之相同，该提取方法的名称是__________________。(2)为解决生活污水中油脂对环境造成的污染。科研人员要从污水中筛选出分解油脂能力最强的微生物。请分析回答：①图甲和图乙所代表的方法中能对微生物进行分离和计数的是______________法。用该方法统计样本菌落数时______________(“需要”或“不需要”)设置空白对照组，原因是__________________________。②图乙中涂布前需对涂布器进行的操作是________________________。③对分离油脂分解菌的选择培养基成分的特别要求是__________________。④接种后，需要将培养细菌的固体培养基倒置培养的原因是________________________________________________________________________。解析：(1)玫瑰精油的性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏，因此提取玫瑰精油的方法是水蒸气蒸馏法，其原理是利用水蒸气将挥发性强的植物油携带出来。(2)①根据以上分析可知，可以对微生物进行分离和计数的接种方法是稀释涂布平板法，即图乙所示方法；稀释涂布平板法中，为了判断培养基是否被污染，需要设置空白对照组。②在稀释涂布平板法中，对于涂布器需要用酒精浸泡，然后在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8～10秒。③油脂分解菌具有分解油脂的能力，而其他微生物没有，因此在培养基中加入油脂作为唯一碳源可以将油脂分解菌分离出来。④接种后将培养细菌的固体培养基倒置培养，可以避免培养皿盖上的水珠滴入培养基，造成污染。答案：(1)水蒸气蒸馏法(2)①稀释涂布平板需要因为需要判断培养基是否被污染②用酒精浸泡，在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却8～10秒③以油脂为唯一碳源④避免培养皿盖上的水珠滴入培养基，造成污染7．[2019·重庆高三诊断]北方每年在小麦丰收的季节，焚烧秸秆火焰四起，烟雾弥漫，不但导致严重的雾霾而且造成资源的浪费。科学家为了解决这个问题，努力寻找分解秸秆中纤维素的微生物，他们做了如下实验，据图回答：3(1)根据甲图，选择培养纤维素分解菌要用____________。为了鉴别纤维素分解菌，常在培养基中加入________。为了统计样品中活菌的数目，常用方法除稀释涂布平板法外，还有________的方法。(2)乙图是培养出的单菌落示意图，最适合分解秸秆的两个菌落是________(填数字)，纤维素分解菌将纤维素最终分解为________________。从图中可以看出培养基上菌落数较少，推测可能的原因是______________________________。(3)为了长期保存该微生物，可以采用______________的方法。解析：(1)从土壤样液中筛选能分解纤维素的细菌所用的培养基是选择培养基。在培养基中加入刚果红，刚果红会与纤维素形成红色复合物，而呈现红色，如果纤维素被降解，则培养基表面会形成以纤维素分解菌为中心的透明圈，可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。统计样品中活菌的数目，常用稀释涂布平板法或显微镜直接计数。(2)透明圈的大小反映了细菌分解纤维素能力大小，培养基中大的透明圈就是分解纤维素多的地方，所以乙图中最适合分解秸秆的两个菌落是1和4；纤维素是多糖，最终被分解菌分解成葡萄糖；从图中可以看出培养基上菌落数较少，推测可能是土壤中纤维素分解菌较少，稀释的倍数太大所致。(3)长期保留菌种可用甘油管藏的方法。答案：(1)选择培养基刚果红(CR)显微镜直接计数(2)1和4葡萄糖土壤中纤维素分解菌较少，稀释的倍数太大(3)甘油管藏8．日前微博传言手机细菌比马桶按钮多。如图，央视和北京卫视通过实验展示调查结果。回答下列相关问题：(1)该实验需制备培养基，培养基一般都含有水、碳源、________。(2)据图，两电视台均采用________法接种，该方法需要________(多选)。A．接种环B．酒精灯C．移液管D．涂布器E．无菌水(3)通过观察菌落的________________，可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种微生物。两电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，你认为原因是：____________________。(4)按图操作取样面积，实验员测定某手机屏幕的细菌数量，将10mL菌悬液进行梯度稀释，分别取0.1mL稀释倍数为102的样品液接种到三个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为48、50、52，则该手机屏幕的细菌数为________个/cm2。该实验对照组该如何设置________________________________________________________________________。4解析：(1)微生物培养基的成分一般包括水、碳源、氮源和无机盐。(2)据图分析可知，该实验的接种方法为稀释涂布平板法，用到的工具有酒精灯、移液管、涂布器、无菌水等。(3)不同的菌落形态、大小不同，图示两个电视台调查的手机屏幕和马桶按钮都有多种形态的菌落，即存在多种微生物。两电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，原因可能是手机的取样和马桶按钮的取样都不相同。(4)根据提供的数据进行计算，某手机屏幕的细菌数＝(48＋50＋52)÷3×102÷0.1×10÷(5×5)＝2×104(个/cm2)。答案：(1)氮源和无机盐(2)稀释涂布平板BCDE(3)形态、大小、隆起程度、颜色等手机的取样和马桶按钮的取样都不相同(4)2×104取培养基涂布0.1mL无菌水进行培养9．为证明青霉素在某种细菌产生抗药性过程中所起的作用是选择而非诱变，有如下实验方案。其中，平板影印指用无菌绒布轻盖在已长好菌落的原培养基上，然后不转动任何角度，“复印”至新的培养基上进行接种。请回答：(1)图中扩大培养的过程中应选用________培养基。利用________分离法可获得A1培养皿上菌落。(2)图中②过程培养基的配方如下：成分无机盐蔗糖葡萄糖尿素牛肉膏水琼脂酚红培养基＋－＋＋－＋＋－结合图形分析________(“能”或“不能”)得出结论：该细菌可利用尿素作为氮源。理由是：____________________。(3)B组培养基中还添加了适宜浓度的青霉素，结果如图所示。欲证明青霉素所起的作用是选择，则应选取________(A.a1B．a2C．b1或b2或b3D．任意一个菌落)菌落继续培养在空白的A2培养皿中，待长出菌落后影印到含相同浓度青霉素的C培养皿中。(4)预测上述A2和C培养皿中菌落的生长情况________(“相同”或“不同”)，由此证明青霉素所起的作用是选择。(5)下列关于微生物培养的叙述，正确的是()A．实验过程中所有器皿和培养基都必须用高压蒸汽灭菌法进行灭菌B．实验操作过程中必须打开超净台上的紫外灯和过滤风C．涂布分离法，单菌落更易分开，但操作更复杂D．采用划线分离时，在每次划线前都需蘸取菌液一次解析：(1)液体培养基具有进行通气培养、振荡培养的优点，在通气或在振荡的条件下，有利于营养物质的摄入以及增加供氧量，所以有利于细胞生长，提高微生物数量。故图中扩大培养的过程中应选用液体培养基；菌种的分离常用涂布平板法。(2)由表格内容可知，葡萄糖是碳源，尿素是氮源，但微生物也可能利用空气中的氮气作为氮源，故不能得出该细菌可利用尿素作为氮源的结论；并且培养基中未加入酚红指示剂，不能对菌种作进一步的鉴定。(3)欲证明青霉素所起的作用是选择，菌种应在未添加青霉素的培养基中选择，即选择a1菌落继续培养在空白的A2培养皿中扩大培养，待长出菌落后影印到含相同浓度青霉素的C培养皿中。(4)如果A2和C培养皿中菌落的生长情况相同，则证明变异是在接触青霉素之前就已经产生了，青霉素所起的作用是选择。(5)培养基用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，接种环等用具可用灼烧灭菌，A项错误；紫外线对人有伤害，如果超净台的玻璃关死，也没必要开吹风，B项错误；常用接种方法中的稀释涂布平板法一般多用于筛选菌株，可以计数，可以观察菌落特征，但由于需要多次稀释，操作较复杂，C项正确；采用划线分离时，在每次划线前都要对接种环灼烧处理，目的是清除残留的菌种，如果再蘸取菌液，将达不到稀释的目的，D项错误。答案：(1)液体涂布5(2)不能该细菌可能利用氮气作为氮源或培养基中无酚红，无法证明该细菌分解了尿素(3)A(4)相同(