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-1-EvaluationWarning:ThedocumentwascreatedwithSpire.Docfor.NET.课时分层作业(六)分解纤维素的微生物的分离(建议用时：35分钟)[基础达标练]1．纤维素酶可以将下列哪种物质分解()A．牛肉片B．鱼片C．滤纸条D．塑料条C[纤维素酶只能使纤维素分解，本题中只有C项滤纸条的主要成分是纤维素，所以可以将滤纸条分解。]2．刚果红是一种酸性染料，能将下列哪些物质染色()①纤维二糖②葡萄糖③纤维素④苏木精⑤弹性纤维A．①③④B．①②③C．②③④D．③④⑤D[刚果红是一种酸性染料，可与纤维素反应形成红色复合物，在动物组织制片中用来染神经轴、弹性纤维、胚胎材料等，在植物制片中可以跟苏木精作二重染色。]3．下列关于纤维素酶的说法，错误的是()A．纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种B．纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C．纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D．葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖D[纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种组分：C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。纤维素在C1酶和CX酶的作用下分解为纤维二糖，再在葡萄糖苷酶的作用下分解为葡萄糖，但葡萄糖苷酶不能直接分解纤维素。]4．纤维素分解菌的选择培养基中酵母膏能提供的主要营养物质是()①碳源②氮源③生长因子④无机盐A．③B．①②C．①②③D．①②③④C[酵母细胞的水溶液提取物浓缩而成的膏状物质为酵母膏，富含B类维生素，也含有机氮化物和糖类。]5．要将能分解纤维素的细菌从土壤中分离出来，应将它们接种在()A．加入伊红美蓝的鉴别培养基上B．含有蛋白胨的固体培养基上C．只含纤维素粉而无其他碳源的选择培养基上D．含四大营养要素的培养基上-2-C[要把纤维素分解菌从土壤中分离出来，就要选择使纤维素分解菌能生存，但其他微生物不能生存的选择培养基进行培养，其选择条件是以纤维素粉作为唯一碳源。在该培养基上，只有能分解纤维素的细菌能够生存，其他微生物因不能利用纤维素而不能生存。]6．在加入刚果红的培养基中会出现透明圈，产生的透明圈是()A．刚果红与纤维素形成的复合物B．刚果红与纤维二糖形成的复合物C．纤维素分解后形成的葡萄糖导致的D．以纤维素分解菌为中心形成的D[刚果红可以与纤维素结合形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。]7．纤维素酶的测定方法一般是()A．对纤维素进行定量测定B．对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定C．对纤维素酶分解纤维素后所产生的纤维二糖进行定量测定D．对纤维素分解菌进行定量测定B[鉴别培养基上形成的透明圈中的菌落只是对分解纤维素的微生物进行的初步筛选，为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，并且进行纤维素酶的测定，测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定。故正确答案为B。]8．使用刚果红染色时，加入刚果红应在()①制备培养基时②梯度稀释时③倒平板时④涂布时⑤长出菌落时A．①③B．②⑤C．③⑤D．④⑤C[常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，长出菌落后再加入刚果红进行颜色反应；另一种是倒平板时就加入刚果红。最终，两种染色法都可以在培养基上观察到以纤维素分解菌为中心的透明圈。]9．当今世界，能源和资源危机日趋严重，人们希望能借助纤维素酶将地球上最丰富(占全球总生物量80%)、最廉价的可再生资源纤维素转化为能直接利用的能源和资源。纤维素酶可以从能分解纤维素的细菌培养液中提取。某同学设计了如下分离土壤中纤维素分解菌的实验流程：土壤取样→选择培养→()→鉴别培养(1)请补充实验流程：_____________________________________________________；-3-找不到合适的取样环境，可采取的办法是_____________________。(2)选择培养的目的是___________________；研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基进行选择培养，该培养基为________(填“液体”或“固体”)培养基，其中加入的化合物A是________，为微生物的生长提供________。(3)为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种，可以在鉴别培养基上加入____________染液，将筛选获得的菌液稀释后用______________法接种到鉴别培养基上，然后挑选产生____________的菌落作为菌种进行扩大培养。[解析](1)经选择培养后，需经稀释后才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上。(2)可用含纤维素的液体培养基进行选择培养来增加纤维素分解菌的浓度。(3)刚果红是一种染料，可与纤维素反应形成红色复合物；培养基中有分解纤维素微生物存在的区域，纤维素会被分解，将出现透明圈。[答案](1)梯度稀释将富含纤维素的物质埋在土壤中(2)增加纤维素分解菌的浓度液体纤维素碳源(3)刚果红涂布平板透明圈10．某污水池中含有一种有害的、难于降解的有机化合物A。现有研究人员欲探究污水净化处理的方案，进行了如图所示的实验，请据图回答下列问题：(1)在进行初选时，将污泥样品接种于以____________为唯一碳源的固体培养基上；在利用锥形瓶进行培养时，需要振荡培养，因此可推测“目的菌”的细胞呼吸方式为____________。(2)在接种前需要对培养基进行灭菌处理，常用的灭菌方法是____________________；而在接种时利用的无菌技术要求实验操作应在__________________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。(3)纯化菌种时，为了获得单菌落，常采用的接种方法有________________和________________；接种后应将培养基进行________(填“正放”或“倒置”)培养。(4)培养若干天后，应将有机化合物A含量较________的培养液转移至新的培养液中进行连续培养；转移至新培养液中培养的目的是使“目的菌”的数量________；在实验结束时，将使用过的培养基进行________处理后才能倒掉。[解析]在初选时，选择培养基中的唯一碳源应该是有机化合物A；在培养时需进行振荡处理，说明“目的菌”应该是需氧型，其细胞呼吸方式为有氧呼吸。本实验应选择有机化合物A含量少的锥形瓶，该锥形瓶中分解有机化合物A的微生物应多于其他瓶中的；转移至新-4-的培养液中，是为了给“目的菌”提供更多的营养、更好的生存环境，从而增加“目的菌”的数量；在实验结束后，使用过的培养基中仍有少量的微生物残留，因此需要进行灭菌处理。[答案](1)有机化合物A有氧呼吸(2)高压蒸汽灭菌法酒精灯火焰(3)平板划线法稀释涂布平板法倒置(4)少增加灭菌[能力提升练]11．在将样品稀释涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上之前一般先进行选择培养，其主要目的是()A．完全除去其他微生物B．没有意义，去掉这一步更好C．增加纤维素分解菌的浓度D．使纤维素分解菌充分长大C[纤维素分解菌如果在所采集的土样中含量少，稀释涂布到鉴别培养基上后形成的菌落数少，不利于挑选所需菌落，通过选择培养可以增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。]12．选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。为选择酵母菌和硝化细菌，应选用的培养基分别为()A．伊红美蓝培养基、含有霉素培养基B．含青霉素培养基、含氨的无机培养基C．含氨的无机培养基、含青霉素培养基D．含青霉素培养基、伊红美蓝培养基B[酵母菌是真菌，通常可以用含青霉素的培养基进行选择培养，因为青霉素抑制细菌生长，但不抑制真菌生长。硝化细菌为自养型生物，能够利用氨转变为亚硝酸和硝酸所释放的能量，把无机物转变为有机物以维持自身生命活动，利用含氨的无机培养基可进行选择培养。]13．使用液体选择培养基培养纤维素分解菌的目的是()①用液体选择培养基可获得大量纤维素分解菌②用液体培养基便于稀释涂布平板③纤维素分解菌只能在液体培养基中生长④用液体培养基可鉴别纤维素分解菌A．①②B．①③C．②④D．③④A[使用液体选择培养基培养纤维素分解菌，一方面可以获得大量纤维素分解菌，另一方面便于稀释涂布平板。纤维素分解菌也可以在固体培养基上生长；鉴别纤维素分解菌使用-5-的是固体培养基。]14．下列有关培养基和菌种鉴定的叙述，不正确的是()A．在培养基中加入较高浓度的氯化钠，可筛选出抗盐突变体植物B．可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型C．利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌D．在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌D[在只含有尿素作为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌。]15．下图为分离并统计分解纤维素的微生物的实验流程，据此回答有关问题：(1)要从富含纤维素的环境中分离纤维素分解菌，从高温热泉中寻找耐热菌，这说明__________________________________________________________________________________________________________。(2)在将样品接种到鉴别纤维素分解菌的培养基之前，可通过选择培养增加纤维素分解菌的浓度，某同学根据需要配制了纤维素分解菌的培养基如下表。整个实验过程严格无菌操作，如果将其中的纤维素粉换成________，菌落数_____________________________________________________，即可说明选择培养基的作用。成分含量纤维素粉5.0gNaNO31.0gNa2HPO4·7H2O1.2gKH2PO40.9gMgSO4·7H2O0.5gKCl0.5g酵母膏0.5g水解酪素0.5g蒸馏水定容至1000mL(3)接种微生物最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，本实验宜采用____________-6-法，原因是_______________________________________________________________________________________________。[解析]在寻找目的微生物时要根据目的菌株对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找；微生物的选择培养就是根据微生物的不同特点，在培养基中加入某些物质，允许一部分微生物的生存，而抑制另一部分微生物的生长。在本实验中，由于只有纤维素分解菌才能利用培养基中的纤维素，因此只含有纤维素粉的培养基为选择培养基，而葡萄糖是许多微生物都能利用的碳源，因此通常用葡萄糖来配制完全培养基，在选择培养基上生长的微生物种类少，菌落数就少；微生物的分离的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，因为这两种方法都能使菌体分散到培养基的表面，但是平板划线法不能确定接种量，而稀释涂布平板法可以确定接种量，因此平板划线法不能根据稀释液体积计算每克样品中的菌株数。[答案](1)根据目的菌株对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找(2)葡萄糖明显多于选择培养基(3)稀释涂布平板平板划线法难以根据稀释液体积计算每克样品中的菌株数