滇南开唇兰挥发油化学成分比较分析

滇南开唇兰挥发油化学成分比较分析滇南唇形科植物挥发油化学成分的比较分析。关键词：南开，挥发油，化学成分，分析滇南开唇兰挥发油化学成分比较分析本文简介：摘要:目的分析比较1个月及6个月采收期滇南开唇兰挥发油的化学成分。方法用水蒸气蒸馏法提取挥发油，GC－MS分离检测滇南开唇兰两个采收期挥发油化学成分，经NITS08．L标准质谱检索库检索定性，并采用峰面积归一化法进行定量分析，计算出各成分的相对百分含量。结果从1个月和6个月采收期滇南开唇兰的挥发油中滇南开唇兰挥发油化学成分比较分析本文内容：摘要:目的分析比较1个月及6个月采收期滇南开唇兰挥发油的化学成分。方法用水蒸气蒸馏法提取挥发油，GC－MS分离检测滇南开唇兰两个采收期挥发油化学成分，经NITS08．L标准质谱检索库检索定性，并采用峰面积归一化法进行定量分析，计算出各成分的相对百分含量。结果从1个月和6个月采收期滇南开唇兰的挥发油中分别分离鉴定了20个、58个化合物，占挥发油总量的95．52%、82．91%。结论首次报道滇南开唇兰挥发油化学成分，其中(Z)－7－十六碳烯醛、10－顺－十七碳烯酸、2，3，3，4－四甲基戊烷等53个化合物在开唇兰属植物挥发油中首次报道。两个采收期的滇南开唇兰挥发油中除共有9个化合物外，其余化合物种类和相对含量均有差异。关键词:滇南开唇兰;挥发油;气相色谱－质谱法;化学成分;不同采收期;不同栽培方式开唇兰属Anoectochilus包括台湾银线兰Anoectochilusformo-sanus，金线兰Anoectochilusroxburghii滇南开唇兰(Anoectochilusburmannicus)等40种植物，在我国分布有22种，包括2个变种［1］。该属部分种植物具有较好的药理活性，如金线兰［2，3］，近年来被广泛研究。但对滇南开唇兰的研究报道甚少。滇南开唇兰主要生长在云南南部至西南部，生长于海拔1050～2150米的山坡或沟谷常绿阔叶林下阴湿处［1］。有研究［4］发现，滇南开唇兰水提物具有抗炎和胰岛素抵抗作用，但目前对滇南开唇兰相关化学成分未见报道。本实验对两个不同采收期的滇南开唇兰挥发油成分通过GC－MS进行了定性、定量研究，为完善滇南开唇兰的药效物质基础及其进一步开发利用奠定基础.1仪器及材料1．1药材药材分别于1个月(组培瓶苗)及六个月(地上种植)进行采收，由福建省华之韵生物科技有限公司提供，经福建中医药大学(药用植物学/中药鉴定)杨成梓副教授及褚克丹教授鉴定为滇南开唇兰A．burmannicus。1．2仪器串联四级杆气相色谱质谱联用仪(Angilent7890AGC/7000QQQB，美国安捷伦科技公司);DL－I－15台式封闭电炉，天津市泰斯特仪器有限公司;KQ2200E型超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司;SHZ－III型循环水真空泵、ＲE－2000B型旋转蒸发器，上海亚荣生化仪器厂;AL204型电子分析天平，梅特勒－托利多仪器(上海)有限公司;ABZ1－0501－P型艾科浦超纯水系统，颐洋企业发展有限公司;挥发油提取器;Centrifuge5810Ｒ高速冷冻离心机，德国Eppendorf公司。1．3试剂乙醚，批号1330513，南京利盛化学试剂有限公司;乙腈(默克公司)色谱纯、甲醇(批号1309111)，西陇化工股份有限公司;自制超纯水。2方法2．1挥发油的提取分别称取不同采收期的新鲜滇南开唇兰各50g，剪成0．5cm小段，置于1L容量瓶中，分别加入500ml水，浸泡24h，自动搅拌机搅拌1h，用挥发油提取器连续提取15h，15h内保持溶液处于微沸状态，收集表面带微黄色、有特殊香气的挥发油，于4℃温度下保存。2．2气相色谱条件色谱柱:DB－1MS(30m×0．25mm，0．25μm)石英毛细管柱，进样口温度:250℃，不分流;程序升温:起始温度，40℃，以4℃/min升温到250℃保持5min。载气为氦气，流速:1ml/min，进样量:0．5μl。2．3质谱条件EI离子源，电子能源70eV，离子源温度230℃，接口温度:280℃，四级杆温度:150℃，质量扫描范围为30～500amu，电子倍增器电压:1381eV;NITS08．L标准质谱检索库。3结果本实验根据“2．3”项下色谱条件对滇南开唇兰不同采收期挥发油成分进行分析鉴定，得到总离子流图，见图1。用GC－MS法分析滇南开唇兰1个月和6个月采收期的挥发油，从中分别分离鉴定了20个和58个化合物，占挥发油总量的95．52%、82．91%。结果见表1～2。4讨论结果表明，滇南开唇兰1个月和6个月采收期的挥发油化学成分中除了共有9个化合物(2，4，6－三甲基辛烷，4，6－二甲基十二烷，7，9－ditert－butyl－1－oxaspiro［4，5］deca－6，9－dien－8－one，2，7，10－三甲基十二烷，十六烷，2，6，10－三甲基十二烷，2，6，10，15－四甲基十七烷，十六酸甲酯，亚油酸)外，化学成分种类和含量存在差异。两个不同采收期的滇南开唇兰挥发油中，1个月采收期挥发油以酸类化合物为主，鉴定出8个化合物，其中亚油酸(60．09%)含量最高;烃类化合物相对含量较少，鉴定出6个化合物;酮类、酯类、酚类化合物相对含量较低，共鉴定出6个化合物。6个月采收期挥发油中酸类化合物相对含量降低，鉴定出2个化合物，亚油酸(46．21%)含量最高;烃类化合物相对含量增加，鉴定出47个化合物，酮类，酯类、醚类，醛类、醇类化合物相对含量较低，共鉴定出9个化合物。除化合物4，6二甲基十二烷、6，10，14－三甲基－2－十五烷酮、十五烷酸、十六烷酸、十八烷酸、亚油酸、亚油酸甲酯、亚麻酸甲酯、十六酸甲酯、正十五烷、正十六烷、正十七烷、正十九烷、正二十一烷、正二十五烷、棕榈酸外，其余53个化合物均为开唇兰属植物挥发油中首次报道。1个月和6个月采收期滇南开唇兰挥发油中含有较大量的亚油酸，棕榈酸和十六烷酸，其具有较强的生物活性，亚油酸具有抗炎作用［5，6］，棕榈酸具有抑制肿瘤细胞生长作用［7，8］，十六烷酸具有对谷氨酸致PC12细胞凋亡的保护作用［9］。滇南开唇兰不同采收期的成分和含量差异可能直接导致其不同的药理活性，滇南开唇兰具有很高的药用价值，选择合适的采收期在医药、食品及保健品等领域的应用尤为重要。本实验研究为滇南开唇兰的进一步开发利用奠定基础。致谢:各个金线莲品种均由福建华之韵生物科技有限公司提供，由福建中医药大学(药用植物学/中药鉴定)杨成梓副教授及褚克丹教授鉴定，GC－MS由福建省检验检疫局检验检疫技术中心的曹洁及彭华毅检测。参考文献:［1］中国科学院中国植物志编委．中国植物志，第17卷［M］．北京:科学出版社，1999:129．［2］周云．金线莲的化学成分、药理活性及临床应用研究进展［J］．作者：陈阿虹钱丽萍陈婉清李唯彭华毅阙慧卿郭舜民林绥单位：福建省医学科学研究院福建省医学测试重点实验室福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心