实验三酶的基本性质

实验三酶的基本性质（P85）酶的定义：是生物细胞产生的、以蛋白质为主要成分的生物催化剂。生物体内的化学反应基本上都是在酶催化下进行的。酶的特点：酶具有高效性、专一性、活性可调节控制等特性。温度、pH值、激活剂、抑制剂可影响酶的活性。一、目的通过检验不同温度下唾液淀粉酶的活性，了解温度对酶活性的影响，明确最适温度的概念；了解pH值对酶活力的影响，学习测定最适pH值的方法；了解激活剂、抑制剂对酶活性的影响，学习检定激活剂和抑制剂影响酶反应的方法和原理。二、原理酶的催化作用受温度的影响很大提高温度可以增加酶促反应的速度。通常温度每升高10摄氏度，反应速度加快一倍左右，最后反应速度达到最大值。酶是一种蛋白质，温度过高可引起蛋白质变性，导致酶的失活。因此，反应速度达到最大值以后，随着温度升高，反应速度反而逐渐下降，以至完全停止反应。反应速度达到最大值时的温度称为某种酶作用的最适温度。高于或低于最适温度时，反应速度逐渐降低。102030405060708090020406080100TemperatureOCRelativeActivity(%)最适温度（一）温度对酶活性的影响二、原理酶的活性受环境pH的影响极为显著。通常各种酶只有在一定的pH范围内才表现它的活性。一种酶表现其活性最高时的pH值，称为该酶的最适pH。低于或高于最适pH时，酶的活性逐渐降低。不同酶的最适pH值不同，例如，胃蛋白酶的最适pH为1.5-2.5，胰蛋白酶的最适pH为8等。（二）pH对酶活性的影响酶的活性常受某些物质的影响。有些物质能使酶的活性增加，称为酶的激活剂；有些物质能使酶的活性降低，称为酶的抑制剂。例如，氯化钠为唾液淀粉酶的激活剂，硫酸铜为其抑制剂。很少量的激活剂或抑制剂就会影响酶的活性，而且常具有特异性。激活剂和抑制剂不是绝对的，有些物质在低浓度时为某种酶的激活剂，而在高浓度时则为该酶的抑制剂。例如，氯化钠达到1/3饱和度时就可抑制唾液淀粉酶的活性。二、原理（三）酶的激活和抑制二、原理本实验分别在不同温度、不同pH值及不同物质作用的条件下使淀粉酶作用于其底物——淀粉，并用碘液检查酶促淀粉水解程度来说明各条件与酶活力之间的关系。淀粉糊精麦芽糖淀粉酶淀粉酶大小中碘液碘液碘液碘液碘液蓝色蓝紫色暗褐色红色碘色三、仪器和试剂仪器移液管、吸耳球、试管、试管架、恒温水浴锅、胶头滴管、白瓷反应盘试剂1%淀粉溶液（含0.3%NaCl），0.1%淀粉溶液，唾液淀粉酶液，pH7.0、8.0、5.0的磷酸缓冲液（PB），碘液，1%NaCl，1%CuSO4，蒸馏水（dH2O）四、实验方法（一）温度对酶活性的影响操作项目管号123唾液淀粉酶液（mL）111酶液处理5min0℃37℃100℃pH7.0缓冲液（mL）2221%淀粉液（含0.3%NaCl）（mL）111反应10min0℃37℃100℃冷却3min流动水冷却碘液（滴）111四、实验方法（二）pH值对酶活性的影响操作项目管号123pH5.0缓冲液（mL）3//pH7.0缓冲液（mL）/3/pH8.0缓冲液（mL）//31%淀粉液（含0.3%NaCl）（mL）111淀粉酶液（mL）111保温将各管混匀37℃水浴中保温检查淀粉水解程度保温2min后，从2号试管中取出1滴溶液置于白磁盘上，用碘液检查淀粉的水解程度碘液（滴）111四、实验方法（三）酶的激活和抑制操作项目管号1231%NaCl（mL）1//1%CuSO4（mL）/1/蒸馏水（mL）//1淀粉酶液（mL）1110.1%淀粉液（mL）333保温将各管混匀37℃水浴中保温检查淀粉水解程度保温1min后，从1号试管中取出1滴溶液置于白磁盘上，用碘液检查淀粉的水解程度碘液（滴）222五、结果与分析（三）酶的激活和抑制各试管中现象，解释原因（一）温度对酶活性的影响各试管中现象，解释原因（二）pH值对酶活性的影响各试管中现象，解释原因六、讨论与心得