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判断1.将目的基因整合到受体细胞染色体DNA上的过程属于基因重组√×2.若能在植物细胞中检测到抗性基因，则说明该基因工程成功了3.体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体×4.动物可通过细胞融合技术培养出新品种×5.一种基因探针能检测水体中的各种病毒×6.人工种子相比天然种子可随意改变植物的遗传性状×10.一种限制酶只能识别一种特定核苷酸序列11.生产单克隆抗体时，在培养液中加入某种试剂能够筛选出杂交瘤细胞，因为该试剂能选择性地抑制骨髓瘤细胞的DNA复制。√√7.同一株绿色开花植物不同部位的细胞经组织培养获得的愈伤组织基因相同。×8.将人的胰岛素基因导入大肠杆菌细胞内，使大肠杆菌生产人的胰岛素技术属于蛋白质工程。×9.利用PCR技术扩增目的基因，在PCR合成仪中应加入的物质不应该有解旋酶。√12.小鼠骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体。×13.人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性√×14.在植物细胞组织培养中胚不能作为组织培养的材料16.植物体细胞杂交过程就是原生质体融合的过程×17.将目的基因直接导入大肠杆菌，然后让其感染并转入某植物细胞中×15.对胚胎进行性别鉴定时可取囊胚的滋养层细胞做DNA分析。√18.外源DNA必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制×19.重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧核糖和磷酸交替连接×20.无论动物细胞的原代培养，还是传代培养过程中都会发生细胞贴壁和接触抑制的现象。21.目的基因是否被整合到受体细胞DNA上，检测方法是用同位素标记的目的基因做探针，进行DNA分子杂交实验。√√22.排卵是指卵子从卵泡中排出√1.DNA重组技术的工具酶：限制酶、DNA连接酶2.DNA重组技术的工具：限制酶、DNA连接酶、运载体(载体）3.在基因工程中使用的载体：质粒、λ噬菌体衍生物、动植物病毒4.天然质粒是否能直接用做载体？不能5.不同生物的DNA分子（或基因）能重组的原因是：结构和基本单位相同基因工程6.基因工程的基本操作程序第一步、获取目的基因第二步、构建表达载体第三步、将目的基因导入受体细胞第四步、目的基因的检测与鉴定（核心）7.目的基因的获取途径基因文库、PCR技术扩增、人工合成8.PCR技术扩增目的基因DNA双链复制(1)原理：(2)前提：要有一段已知目的基因的核苷酸序列(3)互补链延伸时所用酶：Taq酶（热稳定性DNA聚合酶）9.基因表达载体的组成(1)目的基因(2)启动子(3)终止子(4)标记基因(抗性基因或荧光蛋白基因）10.将目的基因导入植物细胞（1）采用最多的方法：农杆菌转化法（2）农杆菌Ti质粒上有可转移的T-DNA11.将目的基因导入动物细胞（2）常用的受体细胞受精卵（1）采用最多、最有效方法显微注射技术12.将目的基因导入微生物细胞常用处理方法Ca2+处理使细胞呈感受态13.目的基因的检测与鉴定（1）检测:分子水平是否插入目的基因（关键）：是否转录：是否翻译：（2）鉴定:个体水平做接种实验ＤＮＡ分子杂交分子杂交抗原—抗体杂交探针：用同位素标记的目的基因的片段14.将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等重组在一起得到的转基因动物，称为乳腺（乳房）生物反应器15.治疗遗传病的最有效手段是：基因治疗16.蛋白质工程直接操作对象是：基因是否遵循中心法则？遵循是否需要基因工程中的工具酶？需要被喻为：第二代基因工程1.植物组织培养技术脱分化营养、激素再分化光照胚状体或丛芽离体植物组织、器官、细胞(外植体）试管苗(1)当生长素含量高于细胞分裂素时，主要诱导植物组织脱分化和根原基形成(2)反之则诱导再分化和芽原基形成愈伤组织细胞工程2.植物体细胞杂交技术(1)去壁的常用方法：酶解法（纤维素酶和果胶酶）(2)原生质体融合方法：物理法：离心、振动、电激等化学法：聚乙二醇（PEG）(3)细胞融合的原理：细胞膜的流动性(4)意义:克服了远缘杂交不亲和的障碍3.动物细胞培养的条件(1)无菌、无毒的环境(2)营养(3)温度和pH(4)气体环境①对和培养用具进行无菌处理；②在培养液中添加一定量的;③定期更换；合成培养基：葡萄糖、氨基酸、无机盐、、微量元素等还需要加等天然成分。温度±0.5度，pH7.2～7.495%空气加的混合气体。O2是所必需的;CO2是培养液抗生素培养液促生长因子动物血清、血浆36.55%CO2细胞代谢维持培养液PHMⅡ中期卵母细胞4.体细胞核移植的受体细胞通常为5.杂交瘤细胞的特点：即能迅速大量繁殖、又能产生专一抗体特异性强、灵敏度高、可大量制备6.单克隆抗体的主要优点7.利用单克隆抗体可制作“生物导弹”，其作用为：导向作用(特异性）8.制备单克隆抗体是，选择B淋巴细胞的原因是每个B淋巴细胞只产生一种特异性抗体9.诱导动物细胞间融合的方法与植物细胞不同的是：用灭活的病毒10.目前使用的或冷冻保存的正常细胞为：10代以内，以保持正常二倍体核型11.当培养时，少部分细胞克服自然寿命极限，已经发生了，并朝向方向发展。传代突变癌细胞接触抑制12.无论原代还是传代培养，细胞都会出现的现象：贴壁生长13.精子细胞变形中的主要变化：1)细胞核——2)高尔基体——3)中心体——4)线粒体——5)细胞内其他物质——精子头的主要部分头部的顶体精子的尾线粒体鞘原生质滴14.卵子受精的重要标志：在卵细胞膜和透明带间隙观察到两个极体15.获能的精子和卵子相遇时，依次会发生什么现象？（防止多精入卵的两个屏障是什么？）透明带反应卵细胞膜反应16.哺乳动物的受精过程主要包括：顶体反应卵细胞膜反应）（透明带反应精子穿越放射冠和透明带，进入卵细胞膜，原核的形成和融合。17.卵子的发生(1)发生部位：(2)时间：减数第一次分裂是在雌性动物完成；减数第二次分裂是在的过程完成的。卵巢始于胚胎时期性别分化后排卵前后精卵结合18.胚胎发育卵裂期：在透明带内进行，细胞数量不断增加，但胚胎并不增加，或略有减少。有丝分裂总体积桑椹胚：由具有构成，细胞数在32个左右。全能性细胞囊胚：细胞开始出现了。分化内细胞团：滋养层：发育成胎儿各组织发育成胎膜和胎盘19.试管动物技术是指通过使卵子和精子在下成熟和受精，并通过培养发育为后，再经移植产生后代的技术。人工操作体外条件早期胚胎20.对实验小鼠用处理，使其排出更多的卵子，然后，从中冲取卵子，与获能的精子在体外受精。促性腺激素输卵管直接21.通常采用的对精子获能处理的方法有：培养法和化学诱导法（肝素或钙离子载体A23187溶液）22.胚胎移植的实质是：早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移23.精子和卵子在体外受精后，应将受精卵移入中继续培养，其成分有发育培养液无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等。24.冲卵是指:从子宫内冲洗出胚胎25.将均等分割，否则影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。内细胞团26.胚胎分割的份数越多，操作的难度会越大，移植的成功率也。越低27.胚胎分割可以看做动物的方法之一无性繁殖或克隆①来源：28.胚胎干细胞早期胚胎或原始性腺②形态特点：体积小,细胞核大,核仁明显③功能特点：发育的全能性29.胚胎移植的生理学基础生理学基础意义同种动物的供体和受体发情排卵后生殖器官的是相同的生理变化为供体的胚胎移入受体提供相同的。生理环境早期胚胎形成后，在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系，而是处于状态。为胚胎的收集提供了可能游离受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生。免疫排斥反应供体胚胎可与受体子宫建立正常的和联系，但其不受影响。生理组织遗传特性为胚胎在受体内的存活提供了可能为移植后的胚胎继续发育提供了营养等方面的保障选择供体母牛受体母牛供体公牛配种质量检查、培养分娩（胚胎移植的犊牛）30.胚胎移植的基本程序同期发情处理超数排卵冲卵胚胎移植妊娠检查