DB15T 1171-2017 奶牛日粮样本营养品质和平衡度评定

ICS65.120B25备案号：53568-2017DB15内蒙古自治区地方标准DB15/T1171—2017奶牛日粮样本营养品质和平衡度评定EvaluationofNutritionalQualityandBalanceinDietarySamplesforDairyCows2017-02-25发布2017-05-25实施内蒙古自治区质量技术监督局发布DB15/T1171—2017I目次前言................................................................................II1范围..............................................................................12规范性引用文件....................................................................13术语与定义........................................................................14主要试剂与材料....................................................................25主要仪器设备......................................................................36日粮样本营养品质评定方法..........................................................37奶牛日粮样本营养平衡度评定方法....................................................6DB15/T1171—2017II前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由内蒙古自治区农牧业科学院提出。本标准由内蒙古自治区农牧业厅归口。本标准起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院、黑龙江赛诺绿能种羊科技有限公司、乌兰察布市农牧业科学研究院、蒙羊牧业股份有限公司。本标准主要起草人员：卢德勋、胡红莲、王丽芳、马燕芬、高民、姚飞、云伏雨、冀芳。DB15/T1171—20171奶牛日粮样本营养品质和平衡度评定1范围本标准规定了奶牛日粮样本营养品质和平衡度的定义、评定方法及评定标准。本标准适用于对奶牛日粮样本营养品质和平衡度的评定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6432饲料中粗蛋白测定方法GB/T6433饲料中粗脂肪的测定GB/T6435饲料中总水分和其他挥发性物质含量的测定GB/T6436饲料中钙的测定GB/T6437饲料中总磷量的测定分光光度法GB/T6438饲料中粗灰分的测定GB/T14699.1饲料采样GB/T20195动物饲料试样的制备GB/T20806饲料中中性洗涤纤维（NDF）的测定NY/T1459饲料中酸性洗涤纤维的测定3术语与定义下列术语和定义适用于本文件。3.1日粮diet根据日粮配方中各种饲料原料的百分比配制并加工，提供给动物饲喂的饲料混合料。3.2代谢能metabolizableenergy(ME)从日粮总能中减去粪能、尿能和甲烷能后的能值，单位为兆焦每千克（MJ/kg）。3.3净能netenergy（NE）从动物食入饲料消化能中扣除尿能和被进食饲料在体内消化代谢过程中的体增热（HI）即为饲料净能值，也是单位进食饲料能量在体内的沉积量。单位为兆焦每千克（MJ/kg）。DB15/T1171—201723.4泌乳净能netenergyforlactation(NEL)采食每千克日粮在乳中的沉积能量，单位为兆焦每千克（MJ/kg）。3.5产乳潜在效率指数milkingpotentialefficiencyindex（MPEI）每千克日粮的产乳潜在能力，单位为千克每千克（kg/kg）。3.6日粮营养品质dietnutritionalquality由日粮营养组成和营养特性以及日粮和动物相互作用而形成的日粮综合饲用价值。3.7日粮营养平衡指数dietnutrientbalanceindex(DNBI)日粮内各种营养素相对比值的一个整体计算值，其对评定日粮营养品质具有重要的实用价值，是保证动物获得较好的日粮利用效率和理想的生产性能的重要技术指标。4主要试剂与材料如无特别说明，所有试剂均为分析纯。K2HPO4；KH2PO4；(NH4)2SO4；NaCl；MgSO4·7H2O；Na2CO3；EDTA；FeSO4·7H2O；MnCl2·4H2O；ZnSO4·7H2O；H3BO3；COCl2·6H2O；CuCl2·2H2O；NiCl2·6H2O；NaMoO4；Na2S·9H2O；1%刃天青。DB15/T1171—201735主要仪器设备实验室用样品粉碎机；分析天平（感量0.0001）；烘箱（室温至300℃）；进口玻璃注射器：100mL（最小分度1mL）；培养瓶（100mL）；电热恒温水浴培养箱（37℃～39℃）；样品筛（孔径40目）；CO2气瓶。6日粮样本营养品质评定方法6.1采样按照GB/T14699.1的规定执行，采样量为500g/个样。6.2样品制备日粮样品根据GB/T20195制备，置于烘箱内于65℃干燥至恒重，过40目筛。6.3检测方法日粮中粗蛋白含量测定按照GB/T6432执行；日粮中粗脂肪含量测定按照GB/T6433执行；日粮中水分含量测定按照GB/T6435执行，再用100减去日粮中水分计算日粮干物质含量；日粮中钙含量测定按照GB/T6436执行；日粮中磷含量测定按照GB/T6437执行；日粮中粗灰分含量测定按照GB/T6438执行；日粮中中性洗涤纤维含量测定按照GB/T20806执行；日粮中酸性洗涤纤维含量测定按照NY/T1459执行；6.4参数测定与计算方法6.4.1NEL6.4.1.1缓冲液制备正式实验前一天，配制好缓冲液中的缓冲试剂和常量元素溶液（A液）、微量元素溶液（B液）、还原剂溶液（C液）和1%刃天青溶液（D液）。6.4.1.1.1缓冲试剂和常量元素溶液（A液）称取K2HPO4382.51mg，KH2PO4292mg，(NH4)2SO4480mg，NaCl200mg，MgSO4·7H2O100mg和Na2CO34000mg。将上述试剂混合后加入蒸馏水定容至1000mL。该溶液在使用前一天配制待用。DB15/T1171—201746.4.1.1.2微量元素溶液（B液）称取EDTA500mg，FeSO4·7H2O200mg，MnCl2·4H2O200mg，ZnSO4·7H2O10mg，H3BO330mg，CoCl2·6H2O20mg，CuCl2·2H2O1mg，NiCl2·6H2O2mg和NaMoO43mg。将上述试剂混合后加蒸馏水定容至1000mL。持续通入CO218个小时后，盖严瓶口，置于冰箱备用。6.4.1.1.3还原剂溶液（C液）称取25gNa2S·9H2O置于100mL容量瓶中加80mL蒸馏水溶解后定容至100mL，持续充入CO220分钟后，盖严瓶口，置于冰箱备用。还原剂溶液在每次试验前临时配置。6.4.1.1.41%刃天青溶液（D液）称取100mg刃天青置于100mL容量瓶中加蒸馏水定容至100mL，盖严瓶口，置于冰箱备用。6.4.1.1.5缓冲液配制准确量取988mLA液，10mLB液，经充分混和后持续通入CO218小时，并于培养前1小时加入2mLC液，数滴D液，充分混合均匀，置于39℃水浴中。6.4.1.2日粮样本称量和设置准确称取2.0g待测日粮样本，置于100mL培养瓶底部，放入39℃恒温水浴培养箱中预热，每个样本设3个平行样。同时每批样本设三个空白对照，即不加待测日粮，仅有瘤胃液和缓冲液，作为产气量的校正。6.4.1.3瘤胃液收集及处理晨饲前采集至少3头牛的瘤胃液，置于经预热达39℃并通有CO2的保温瓶中，盖严瓶口，迅速返回实验室。用4层纱布过滤瘤胃液，合并滤液，在39℃恒温，混匀，迅速分装至上述已预热好并通有CO2的培养瓶中（每个培养瓶加20mL瘤胃液），置于39℃水浴中。6.4.1.4体外培养向保存于39℃水浴中的100mL培养瓶中加入40mL缓冲液，混合均匀后，将培养瓶与进口注射器连接，将注射器中的气体全部排出，密封，记录初始刻度后，置于39℃恒温水浴培养箱中培养，并在开始培养后分别记录每个注射器中2h、4h、6h、8h、12h、18h、24h的气体产生量。DB15/T1171—201756.4.1.5NEL计算净产气量按⑴式计算，ME按⑵式计算，NEL按⑶式计算：产气量（GP）计算公式：GPt=itVVVW00.2………………………………………………………⑴式中：GPt－—待测日粮在t时刻的净产气量，单位为mL；Vt－—待测日粮发酵t小时后的产气量，单位为mL；V0－—待测日粮在培养开始时的产气量，单位为mL；Vi－—空白样品发酵t小时后的产气量，单位为mL；W－—样品干物质重，单位为g。ME计算公式：ME（MJ/kgDM）＝1.06+0.157GP+0.0084CP+0.0022CF-0.0081Ash……………⑵式中：ME－—待测日粮代谢能值，单位为MJ/kg；GP－—待测日粮24h净产气量，单位为mL；CP－—待测日粮粗蛋白含量，单位为%DM；CF－—待测日粮粗脂肪含量，单位为%DM；Ash－—待测日粮粗灰分含量，单位为%DM。NEL计算公式：NEL（MJ/kg）=0.703×ME-0.19…………………………………………………⑶式中：NEL－—待测日粮泌乳净能值，单位为Mcal/kg；ME－—待测日粮代谢能值，单位为Mcal/kg；6.4.2奶牛日粮产乳潜在效率指数（MPEI）计算公式MPEI按⑷式计算：MPEI=1000750LNE…………………………………………………………⑷式中：MPEI——日粮产乳潜在效率指数，单位为kg/kgDM；NEL——日粮产乳净能，单位为Mcal/kg；750——相当于1kg含脂4%的标准乳能量，单位为kcal。DB15/T1171—201766.5奶牛日粮样本营养品质评定MPEI指数不仅适于奶牛全日粮品质评定，也适于奶牛精补料品质评定，不论是日粮还是精补料，其MPEI指数越大，营养品质越高。不同泌乳阶段奶牛日粮产乳潜在效率指数的适宜范围详见表1。表1不同泌乳阶段奶牛日粮产乳潜在效率指数的适宜范围泌乳阶段产奶量（kg/d）MPEI（kg/kgDM）泌乳盛期201.320～251.3～1.525～301.5～1.6301.6泌乳中期201.320～251.3～1.425～301.4～1.5301.57奶牛日粮样本营养平衡度评定方法7.1DNBIDNBI按⑸式计算：DNBI={∑[1-(N1-X1)/N1]+∑n2+∑[1-(X3-N3)/N3]}/(n1+n2+n3)……………………⑸式中：DNBI——奶牛日粮营养平衡指数N1——奶牛日粮营养平衡技术指标下限；N3——奶牛日粮营养平衡技术指标上限；n1——与N1相对应的日粮实测的营养平衡技术指标的个数；n2——与＞N1和＜N3的相对应的日粮实测的营养平衡技术指标的个数（每个n2的DNBI值均是1，因此，∑n2=∑n2×1）；n3——与N3相对应的日粮实测的营养平衡技术指标的个数；X1…n——测定获得的单项日粮营养平衡指标。7.2DNBI测定指标ADF/NDF、NFC/NDF、NFC/RDP、CP/NEL、Ca/P其中：ADF——日粮酸性洗涤纤维含量，单位为%DM；NDF——日粮中性洗涤纤维含量，单位为%DM；NFC——日粮非纤维性碳水化合物含量，单位为%DM；RDP——日粮瘤胃降解