24 食品添加剂 番茄红素（合成）

1食品添加剂番茄红素（合成）1生产工艺由用于食品的其他类胡萝卜素生产中常用的合成中间体，经过维蒂希聚合反应制备而成的合成番茄红素。商业上用于食品的配方型番茄红素制剂，是将其配制成悬浮于食用油中的乳液或水溶型的粉末。2性状番茄红素晶体为红色，几乎不溶于水，溶于氯仿等有机溶剂，对热、光、空气和湿度均敏感，容易氧化。3技术要求项目指标检验方法番茄红素含量，%总番茄红素≥96附录A中A.1全－反式－番茄红素≥70干燥失重，%≤0.5GB5009.3减压干燥法铅（Pb），mg/kg≤1GB5009.12阿朴-12’-番茄红素醛，%≤0.15附录A中A.2三苯基氧膦(TPPO)，%≤0.01附录A中A.31附录A检验方法A.1总番茄红素含量和全－反式－番茄红素的含量的测定A.1.1方法原理用高效液相色谱法在下列条件下测定总番茄红素含量和全－反式－番茄红素的含量A.1.2试剂和材料(注意：所有溶剂均应为色谱级)A.1.2.1正己烷。A.1.2.2用0.025%特丁基对苯二酚（BHT）稳定的四氢呋喃。A.1.2.3n-乙基－二异丙胺。A.1.2.4番茄红素标准品纯度≥95％。A.1.3仪器和设备A.1.3.1紫外/可见分光光度计，配备1cm吸收池。A.1.3.2高效液相色谱系统，配备合适的泵、进样器、色谱柱恒温箱和积分仪。A.1.3.3色谱柱：2根相连的不锈钢柱（250x4.0mm）。A.1.3.4固定相：Nucleosil300-5，5mA.1.3.5HPLC条件流速：0.8mL/min进样量：20µL柱温：20℃检测波长：470nm流动相：0.15%n-乙基－二异丙胺的正己烷溶液（V/V）A.1.3.6HPLC测定用标准溶液：精密称取番茄红素标准品5.5-6.5mg，置100mL量瓶中，加入特丁基对苯二酚（BHT）稳定的四氢呋喃5ml使溶解，用正己烷稀释至刻度。作为HPLC测定用标准品溶液。A.1.3.7分光光度测定用标准溶液：精密量取上述HPLC测定用标准溶液5.0mL，置100mL量瓶中，用正己烷稀释至刻度。作为分光光度测定用标准溶液。A.1.3.8样品溶液精密称取本品4.5-5.5mg，置100mL量瓶中，加入特丁基对苯二酚（BHT）稳定的四氢呋喃5mL使溶解，用正己烷稀释至刻度。2A.1.4分析步骤与结果计算A.1.4.1分光光度法测定番茄红素：A.1.4.1.1分析步骤用1cm吸收池，以正己烷为空白，在最大吸收波长处（大约470nm）测定上述分光光度测定用标准溶液的吸收值。A.1.4.1.2结果计算：…………………………………………(A.1)式中：Cst—分光光度测定用标准溶液中番茄红素的浓度（mg/L）；A—最大吸收波长处的吸收度；3450—全－反式－番茄红素在正己烷中的吸收系数A%1cm1；10000—稀释系数。A.1.4.2HPLC分析测定：A.1.4.2.1分析步骤重复进样20LHPLC测定用标准溶液，记录测定出的番茄红素异构体的总峰面积（除去溶剂峰），从重复进样中计算峰面积平均值，并按下式计算番茄红素响应因子(RF):……………………………………………………(A.2)式中：RF—番茄红素的响应因子（AUxL/mg）；Ast—番茄红素总峰面积的平均值（AU）；Cst—分光光度测定用标准溶液中番茄红素的浓度（mg/L）；20—由分光光度测定用标准溶液制备HPLC测定用标准溶液的稀释系数；取样品溶液进样，并记录所有番茄红素异构体的峰面积。A.1.4.2.2结果计算保留时间：番茄红素异构体相对保留时间*绝对保留时间（约）13-顺式-番茄红素9-顺式-番茄红素全-反式-番茄红素5-顺式-番茄红素0.60.81.01.114min19min22min24min3*相对于全-反式-番茄红素按下式计算总番茄红素的含量：总番茄红素(%)=(Atrans+A5cis+A9cis+A13cis+Axcis)×0.1×100…………(A.3)RF×Ws式中：Atrans—全-反式-番茄红素峰面积(AU)；A5cis,A9cis,和A13cis—5顺式－，9顺式－和13顺式－番茄红素的峰面积(AU)；Axcis—如检测到其它顺式异构体的峰面积(AU)；0.1—样品溶解的体积(L)；RF—番茄红素的响应因子(AUxl/mg)；Ws—样品取样量(mg)。按下式计算全-反式-番茄红素的含量：全-反式-番茄红素（％）＝Atrans×0.1×100RF×WsA.2阿朴-12’-番茄红素醛的测定A.2.1方法原理高效液相色谱法A.2.2试剂(注意：所有溶剂均应为色谱级)A.2.2.1正己烷。A.2.2.2三乙胺（TEA）。A.2.2.3四氢呋喃（THF）。A.2.2.4用特丁基对苯二酚（BHT）稳定的甲苯（0.5g特丁基对苯二酚（BHT）溶于1000mL甲苯中）。A.2.2.5阿朴-12’-番茄红素醛（也叫番茄红素C25-醛）标准品。A.2.3仪器和设备A.2.3.1高效液相色谱系统，配备合适的泵、进样器和积分仪A.2.3.2色谱柱：不锈钢柱（200x4.0mm）A.2.3.3固定相：硅胶NucleosilSi1003mA.2.3.4检测器：紫外/可见分光光度计，或可见分光光度计A.2.3.5HPLC条件：流速：2.0mL/min进样量：5.0L检测波长：435nm4流动相：A－正己烷B－正己烷：三乙胺（99.9:0.1）(V/V)C－正己烷：四氢呋喃（80:20）(V/V)梯度：时间，分钟A%B%C%080200166020202240204024.580200A.2.3.6标准品溶液精密称取阿朴-12’-番茄红素醛对照品14.5-15.5mg，置50mL量瓶中，用特丁基对苯二酚（BHT）稳定的甲苯溶解并稀释至刻度。精密量取2mL，置100mL量瓶中，用特丁基对苯二酚（BHT）稳定的甲苯稀释至刻度。A.2.3.7样品溶液精密称取本品29.0-31.0mg，置10mL量瓶中，用特丁基对苯二酚（BHT）稳定的甲苯溶解并稀释至刻度，将该溶液超声处理10min。A.2.4结果阿朴-12’-番茄红素醛的保留时间约为14min，其相对于全－反式－番茄红素的相对保留时间为1.6。A.2.5计算：阿朴-12’-番茄红素醛（％）＝As×Wst×10×100………………………(A.4)Ast×Ws×2500式中：As—样品峰面积；Ast—标准品峰面积；Wst—标准品取样量(mg)；Ws—样品取样量(mg)；10—样品溶解的体积(ml)；2500—对照品溶解体积(50mL)乘以稀释倍数(50)。A.3三苯基氧膦（TPPO）的测定A.3.1方法原理5在下列条件下用HPLC方法检测。A.3.2试剂A.3.2.1正己烷。A.3.2.2异丙醇。A.3.2.3四氢呋喃（THF）。A.3.2.4三苯基氧膦（TPPO）(纯度≥99%)注意：所有试剂均应是色谱级。A.3.3仪器和设备A.3.3.1高效液相色谱系统，配备合适的泵、进样器和积分仪。A.3.3.2色谱柱：不锈钢柱（150×4.6mm）。A.3.3.3固定相：硅胶基柱SupelcosilLc-Si,5μm或类似的柱。A.3.3.4检测器：紫外检测器。A.3.3.5HPLC条件：柱温：20℃。流动相：异丙醇:正己烷（1:24V/V）。流速：1.5mL/min。进样量：50μL。检测波长：210nm。TPPO的保留时间大约为8.1min。A.3.4分析步骤标准溶液：精密称取10mg的TPPO标准品，用THF（四氢呋喃）溶解，定量移入1000mL容量瓶中，用四氢呋喃稀释至刻度。样品溶液：精密称取1000mg的样品，用四氢呋喃溶解，定量移入100mL容量瓶中，用四氢呋喃稀释至刻度。A.3.5结果计算…………………….(A.5)式中：As—样品峰面积；6Ast—标准峰面积；Pst—TPPO标准品的纯度的比例(例如：如果标准物质的纯度为99%，该数值应为0.99）；Wst—标准品的重量（mg）；Ws—样品重量（mg）。_________________