GB 1886.172-2016 食品安全国家标准 食品添加剂 迷迭香提取物

中华人民共和国国家标准GB1886.172—2016食品安全国家标准食品添加剂迷迭香提取物2016-08-31发布2017-01-01实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会发布GB1886.172—20161食品安全国家标准食品添加剂迷迭香提取物1范围本标准适用于以迷迭香(RosmarinusofficinalisL.)的茎、叶为原料,经溶剂提取或超临界二氧化碳萃取、精制等工艺生产的食品添加剂迷迭香提取物。提取溶剂为水、甲醇、乙醇、丙酮和(或)正己烷。2技术要求2.1感官要求感官要求应符合表1的规定。表1感官要求项目要求检验方法状态粉末或液体取适量试样置于清洁、干燥的白瓷盘或烧杯中,在自然光线下观察其状态2.2理化指标理化指标应符合表2的规定。表2理化指标项目指标脂溶性水溶性检验方法总抗氧化成分(以鼠尾草酸和鼠尾草酚计),w/%≥10.0—附录A中A.2迷迭香酸,w/%≥—5.0附录A中A.3水分a,w/%≤—5.0GB5009.3蒸馏法或卡尔·费休法铅(Pb)/(mg/kg)≤2.0GB5009.75或GB5009.12砷(As)/(mg/kg)≤3.0GB5009.76残留溶剂b正己烷/(mg/kg)≤甲醇/(mg/kg)≤2550附录A中A.4a仅针对水溶性粉末产品。b仅针对提取溶剂为正己烷或甲醇的产品。注:商品化的迷迭香提取物产品应以符合本标准的迷迭香提取物为原料,可添加用于加工、贮存、标准化、溶解等工艺目的的食用植物油、麦芽糊精、氯化钠等食品原料和(或)符合食品添加剂质量规格要求的乳化剂、抗结剂等。GB1886.172—20162附录A检验方法A.1一般规定本标准所用试剂和水在未注明其他要求时,均指分析纯试剂和GB/T6682规定的三级水。试验中所用标准溶液、杂质测定用标准溶液、制剂和制品在未注明其他要求时,均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的规定制备。试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时,均指水溶液。A.2总抗氧化成分(以鼠尾草酸和鼠尾草酚计)的测定A.2.1方法提要脂溶性迷迭香提取物中的主要抗氧化成分(鼠尾草酸和鼠尾草酚)在280nm检测波长下有最大吸收峰,根据鼠尾草酸标准品浓度和相应的峰面积,可得出鼠尾草酸的标准曲线公式,并根据标准曲线由试样峰面积得到对应的试样溶液浓度。同时,由于在280nm下,同浓度的鼠尾草酚的峰面积是鼠尾草酸的1.36倍。因此可以根据鼠尾草酸的标准曲线计算得到鼠尾草酚的浓度。A.2.2试剂和材料A.2.2.1水:符合GB/T6682规定的一级水。A.2.2.2丙酮:色谱纯。A.2.2.3乙腈:色谱纯。A.2.2.4鼠尾草酸标准品:纯度≥98%。A.2.2.5磷酸溶液:1→1000。A.2.3仪器和设备高效液相色谱仪:配有紫外检测器。A.2.4参考色谱条件A.2.4.1色谱柱:C18反相色谱柱(ϕ4.6mm×250mm,5μm);或其他等效的色谱柱。A.2.4.2流动相A:水+磷酸溶液。A.2.4.3流动相B:乙腈+磷酸溶液。A.2.4.4柱温:30℃。A.2.4.5检测波长:280nm。A.2.4.6流动相流速:1.0mL/min。A.2.4.7进样量:10μL。A.2.4.8梯度洗脱条件:见表A.1。GB1886.172—20163表A.1梯度洗脱条件时间/min流动相A/%流动相B/%流速/(mL/min)0.077231.01.077231.025.001001.030.001001.030.577231.035.077231.0A.2.5分析步骤A.2.5.1绘制标准曲线以丙酮溶解鼠尾草酸标准品,配制混合梯度标准溶液,使鼠尾草酸浓度梯度在0.010mg/mL~1.000mg/mL。在A.2.4参考色谱条件下,对标准溶液进行测定,重复进样一次。根据标准溶液浓度和峰面积,绘制标准曲线。线性关系应达到R2≥0.99。记录标准曲线的线性公式Y=a×c+b。其中,c是鼠尾草酸的浓度,Y是这个浓度对应的峰面积,a和b分别为标准曲线的斜率和截距。A.2.5.2试样溶液的制备称取试样140mg~180mg(精确至0.0001g),溶于20mL丙酮,定容至25mL容量瓶中,充分混匀后经0.22μm微孔滤膜过滤。A.2.5.3测定在A.2.4参考色谱条件下,对试样液进行测定,重复进样一次。参考图B.1迷迭香提取物色谱图中鼠尾草酸和鼠尾草酚的相对位置确定出两者的响应峰,并且记录两者的峰面积Y1和Y2。A.2.6结果计算A.2.6.1鼠尾草酸的浓度c1鼠尾草酸的浓度c1,单位为毫克每毫升(mg/mL),按式(A.1)计算:c1=Y1-ba…………………………(A.1)式中:Y1———试样溶液中的鼠尾草酸的峰面积;b———鼠尾草酸标准曲线公式中的截距;a———鼠尾草酸标准曲线公式中的斜率。A.2.6.2鼠尾草酚的浓度c2鼠尾草酚的浓度c2,单位为毫克每毫升(mg/mL),按式(A.2)计算:c2=Y2-b1.36a…………………………(A.2)GB1886.172—20164式中:Y2———试样溶液中的鼠尾草酚的峰面积;b———鼠尾草酸标准曲线公式中的截距;1.36———在280nm下,同浓度的鼠尾草酚的峰面积是鼠尾草酸的1.36倍;a———鼠尾草酸标准曲线公式中的斜率。A.2.6.3总抗氧化成分的质量分数w1总抗氧化成分(以鼠尾草酸和鼠尾草酚计)的质量分数w1,按式(A.3)计算:w1=c1+c2()×Vm×100%…………………………(A.3)式中:c1———试样溶液中鼠尾草酸的浓度,单位为毫克每毫升(mg/mL);c2———试样溶液中鼠尾草酚的浓度,单位为毫克每毫升(mg/mL);V———试样定容体积,单位为毫升(mL);m———试样的质量,单位为毫克(mg)。试验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的5%。A.3迷迭香酸的测定A.3.1方法提要水溶性迷迭香提取物用甲醇溶解,以甲醇-磷酸溶液为流动相,用以十八烷基硅烷为填料的液相色谱柱和紫外检测器或二极管阵列检测器,对试样中的迷迭香酸进行反相高效液相色谱分离和测定,与标准品保留时间比较定性,峰面积外标法定量。A.3.2试剂和材料A.3.2.1甲醇:色谱纯。A.3.2.2迷迭香酸标准品:纯度≥98%。A.3.2.3磷酸溶液:0.5mL磷酸加入100mL水。A.3.2.4标准储备液:准确称取迷迭香酸标准品10mg(精确至0.0001g),用流动相溶解并定容至10mL,混匀,置冰箱中保存。此溶液1mL含迷迭香酸1.0mg。A.3.3仪器和设备高效液相色谱仪:配有紫外检测器或二极管阵列检测器。A.3.4参考色谱条件A.3.4.1色谱柱:以十八烷基硅烷为填充物的色谱柱(φ4.6mm×250mm,5μm);或其他等效的色谱柱。A.3.4.2流动相:甲醇:磷酸溶液=45:55。A.3.4.3流速:0.6mL/min。A.3.4.4柱温:40°C。A.3.4.5进样量:10μL。A.3.4.6检测波长:283nm。A.3.4.7保留时间:18min。GB1886.172—20165A.3.5分析步骤A.3.5.1试样溶液的制备准确称取试样200mg(精确至0.0001g),用流动相溶解并定容至100mL,经0.45μm微孔滤膜过滤,即得试样溶液。A.3.5.2标准曲线的绘制准确吸取标准储备液,配制成0mg/mL、0.25mg/mL、0.5mg/mL、1.0mg/mL的标准溶液系列,在A.3.4参考色谱条件下,进行色谱分析,根据迷迭香酸标准溶液的含量及相应色谱峰面积,以色谱峰面积为纵坐标,迷迭香酸含量为横坐标,绘制标准曲线。A.3.5.3测定准确吸取试样溶液10μL,在规定色谱条件下,进行色谱分析,以保留时间定性,峰面积外标法定量。A.3.6结果计算迷迭香酸的质量分数w2,按式(A.4)计算:w2=c×V1000×m×100%…………………………(A.4)式中:c———由标准曲线得出的试样溶液中迷迭香酸的浓度,单位为微克每毫升(μg/mL);V———试样溶液定容体积,单位为毫升(mL);1000———质量换算系数;m———试样的质量,单位为毫克(mg)。试验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的2.5%。A.4残留溶剂(正己烷、甲醇)的测定A.4.1试剂和材料A.4.1.1水:GB/T6682规定的一级水。A.4.1.2氯化钠溶液:10g氯化钠溶解于100mL水中。A.4.1.3待测组分标准品:正己烷、甲醇,色谱纯。A.4.1.4内标液:160μg/g正丙醇溶液。A.4.2仪器和设备气相色谱仪:配备氢火焰离子检测器(FID)和顶空进样器。A.4.3参考色谱条件A.4.3.1色谱柱:石英毛细管柱(φ0.15μm×15m),涂层为6%氰丙基苯基和94%二甲基聚硅氧烷,涂层厚度为0.84μm。或同等性能的色谱柱。A.4.3.2载气:氦气。GB1886.172—20166A.4.3.3载气流速:0.8mL/min。A.4.3.4柱温:40℃保持5min,以25℃/min升温至250℃,总运行时间为13.4min。A.4.3.5进样口温度:250℃。A.4.3.6检测器温度:300℃。A.4.3.7进样量:1.0mL。A.4.4参考顶空进样条件A.4.4.1试样加热温度:90℃。A.4.4.2试样加热时间:10min。A.4.4.3试样搅拌转速:400r/min。A.4.4.4分流比:1∶50A.4.4.5注射器温度:120℃。A.4.4.6压射速度:1mL/sA.4.5分析步骤A.4.5.1标准储备液的制备用待测组分标准品(正己烷、甲醇),分别制备260μg/g的标准储备液。A.4.5.2标准溶液系列的制备按表A.2称取葵花籽油,加入标准储备液(对每个溶剂分别分析)、氯化钠溶液和内标溶液,制备标准溶液系列,分别注入20mL进样瓶中。表A.2标准溶液系列的制备方法葵花籽油/mg标准储备液/mg氯化钠溶液/mg内标液/mg2505027001000250100265010002502002550100025050022501000250100017501000A.4.5.3试样溶液的制备称取0.25g试样(精确至0.0001g),加入氯化钠溶液2750mg和内标液1000mg,注入20mL进样瓶中。A.4.5.4测定在A.4.3和A.4.4参考操作条件下,分别对标准溶液系列和试样溶液进行色谱分析。A.4.6结果计算A.4.6.1平均响应因子f标准溶液的平均响应因子f,按式(A.5)计算:GB1886.172—20167f=∑csci×RiRsæèçöø÷5…………………………(A.5)式中:cs———每一标准溶液中待测组分的浓度,单位为微克每克(μg/g);ci———每一标准溶液中正丙醇(内标物)的浓度,单位为微克每克(μg/g);Ri———每一标准溶液色谱图中正丙醇(内标物)的峰面积值;Rs———每一标准溶液色谱图中待测组分的峰面积值;5———标准溶液系列数。A.4.6.2待测组分含量wi待测组分含量wi,单位为毫克每千克(mg/kg),按式(A.6)计算:wi=Ru×c0×fR0×cu…………………………(A.6)式中:Ru———试样溶液色谱图中待测组分的峰面积值;c0———试样溶液中正丙醇(内标物)的浓度,单位为微克每克(μg/g);f———平均响应因子;R0———试样溶液色谱图中正丙醇(内标物)的峰面积值;cu———试样溶液中迷迭香提取物的浓度,单位为微克每克(μg/g)。由式(A.6)计算得到待测组分(正己烷和甲醇)含量w3和w4,两者之和即为试样中残留溶剂含量。试验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的5%。GB1886.172—20168附录B迷迭香提取物的参考色谱图迷迭香提取物的参考色谱图见图B.1。说明:1———溶剂;2———鼠尾草酚;3——