第九章微生物学实验试题答案1、选择题90001.C90002.D90003.C90004.C90005.D90006.C90007.A90008.B90009.A90010.C90011.C90012.B99013.A90014.C90015.A90016.A90017.A90018.A90019.A90020.D90021.A90022.D90023.A90024.D90025.E90026.A90027.B90028.C90029.C90030.A90031.A90032.C90033.A90034.A90035.C90036.A90037.C90038.A90039.B90040.B2、判断题90041.对。90042.错。90043.对。90044.对。90045.错。90046.对。90047.错。90048.对。90049.对。90050.对。90051.错。90052.对。90053.对。90054.错。90055.错。90056.错。90057.错。90058.对。90059.对。90060.对。90061.对。90062.错。90063.错。90064.对。90065.错。90066.错。90067.对。90068.错。90069.错。90070.错。90071.错。90072.错。90073.错。90074.错。90075.错。90076.对。90077.错。90078.错。90079.对。90080.对。90081.错。90082.错。90083.对。90084.对。90085.错。90086.对。90087.对。90088.错。90089.对。90090.对。90091.错。90092.对。90093.错。90094.对。90095.对。90096.对。90097.错。90098.对。3、填空题90099.加一滴水于载玻片中央,用解剖针挑取菌丝少许,将菌丝用50%的酒精浸润,将菌丝用蒸馏水水洗,将菌丝放入载玻片水滴中并小心分散,盖上盖玻片90100.印片,干燥,固定,复红染色2-3分钟,水洗,晾干90101.洋菜(琼脂),1.5-2.0%,0.5%90102.涂片,干燥,固定,复红染色1-2分钟,水洗,晾干90103.锅内加水,灭菌物体装锅,对称上紧密封螺帽将锅密封,加热升温,排尽锅内冷空气,升温至灭菌工艺条件{一般为98kpa},在工艺条件下保压计时{一般为30分钟},到时间后切断热源,降温,出锅90104.照配方称取药品,将药品溶解在一定量的水中后加热煮沸,将琼脂按量称取后用水浸湿,将浸湿的琼脂加入煮沸的营养液中,待琼脂全部融化后调节pH值,补充损失的水分,分装培养基入不同的容器中90105.无色,红色90106.紫色,红色90107.所染染料的颜色90108.反光镜,聚光镜,物镜,目镜90109.镜座,镜臂,载物台,转换器,镜筒,推动器,粗动螺旋,微动螺旋,聚光镜升降螺旋90110.放线菌,7.5-8.090111.真菌,5-690112.细菌、6.8-7.290113.自生固氮菌,空气中的N2。90114.160-170℃/2h90115.降低,适当升高90116.酒精脱色90117.越小,越小心90118.液体,固体,半固体90119.自来90120.玻璃器材,高压蒸汽灭菌90121.10倍,990122.1molNaOH、1molHCL90123.选择培养基,加富培养基,鉴别培养基90124.纤维素,纤维分解菌,酪蛋白,蛋白分解菌90125.涂片,干燥,固定,结晶紫染色1分钟,水洗,碘液媒染1分钟,水洗,95%的乙醇脱色25秒,水洗,蕃红复染3-5分钟,水洗,晾干90126.积累代谢产物,天然培养基,合成培养基,,半合成培养基90127.0.65,40x90128.1.25,100x或90x90129.0.25,10x或8x90130.接种针,接种环90131.酒精灯,1ml无菌吸管,9ml试管装无菌水,9cm的无菌平皿90132.红色,绿色90133.平面,凹面90134.紫外灯照射,喷洒化学药剂(如酚)90135.细菌的运动性90136.过滤法,蔡氏细菌过滤器,滤膜90137.无氮90138.酸性90139.孟加拉红,链霉素90140.显微镜,镜台测微尺,目镜测微尺90141.显微镜血球计数板。90142.将镜台测微尺置载物台上,调焦找到台尺,在低倍镜下校正目镜测微尺每格的长,在高倍镜下校正目镜测微尺每格的长,去掉台尺换上待测样本片,在高倍镜下测出十个酵母菌宽和长的格数,将校正值乘入,算出十个酵母菌的平均宽和平均长,以平均宽Xμm×平均长Yμm表示酵母菌的大小。90143.将待测菌进行适当的稀释,将计数板置于载物台上,在低倍镜下找到计数区,将菌液加到计数区上,调焦看到菌体,按五点取样法计数五个大方格的菌数,计算每小格的含菌数,计算出单位体积(如每ml)中的含菌数。90144.涂片,风干,加复红染色3-5分钟,水洗,晾干,加墨素涂抹,风干。90145.涂片,干燥,固定,孔雀绿加热染色15分钟,水洗,复红染色2-3分钟,水洗,晾干。90146.孔雀绿加热染色适当90147.印片时不能移动90148.涂抹墨素要薄90149.好气,专性厌氧90150.结构,组成,紫,无90151.前者计数区的深度是后者的五倍90152.浅兰90153.间生,透明,极节,氧气,低氧分压,固定分子氮90154.C:N比(碳氮比),菌体生长,积累代谢产物90155.青霉素(链霉素),细菌和放线菌,真菌,结晶紫90156.G-细菌经结晶紫染色、碘液媒染、酒精脱色后,菌体紫色脱去,故需用蕃红复染,这样在光镜下才能见到红色的菌体。90157.玻片置反,菌体着色太浅90158.新陈代谢,pH值,碳酸盐(CaCO3),磷酸盐90159.酸,pH下降,碱,pH上升90160.Petri,Petri,Hesse,琼脂。90161.0.1毫米90162.酒精脱色时间过长,菌体培养时间太长90163.大肠杆菌(E.Coli),伊红--美兰,大肠杆菌(E.Coli),金属90164.褐90165.红90166.金属器皿,铝4、名词解释190167.电子显微镜是利用电子波波长短,分辨力高的特点以电子流代替光学显微镜的光束使物体放大成象的超显微镜检装置。90168.用自然光或者灯光作光源镜检物体的显微镜。90169.由化学成分已知的营养物质配制而成的培养基。90170.人工配制的供微生物生长繁殖并积累代谢产物的一种营养基质。90171.由化学成分不完全清楚的天然物质如马铃薯,麸皮等配制而成的培养基。90172.由化学成分已知的化学物质和化学成分不完全清楚的天然物质配制而成的培养基。90173.革兰氏染色是细菌的一种鉴别染色法,细菌首先用结晶紫染色,再用碘液固定,然后用95%的酒精脱色,最后用蕃红复染。凡是菌体初染的结晶紫被酒精脱去了紫色后,又被蕃红复染成红色的细菌称为革兰氏负反应细菌;凡是菌体初染的紫色不能被酒精脱色,也不能被蕃红复染成红色的细菌称为革兰氏正反应细菌。90174.用单一染料使微生物细胞染上所用染料颜色的染色方法。90175.将一定量的样品经十倍稀释后,用平板培养最后三个稀释度的样品稀释液。待菌落长出后,计数出某一稀释度的菌落数后再乘以稀释倍数,即为样品中的含菌数。90176.利用血球计数板或细菌计数板在显微镜下测计出每小格的微生物细胞数量后,再换算出单位体积中微生物细胞总数的测数方法。90177.巴氏消毒是法国微生物学家巴斯德发明的一种消毒方法。是在62-63℃的条件下,保温半小时杀死微生物的营养体(主要是病原菌)的方法。90178.利用100℃的温度杀死微生物的营养体.每次1小时连续三天,中间的空隙时间让未杀死的芽胞萌发成营养体,在下一次100℃的温度下被杀死。如此反复两次可将培养基的微生物(包括芽胞)全部杀死。该方法适用于没有高压灭菌器的地方进行灭菌处理。90179.只杀死微生物的营养体(主要是病原菌),而不能杀死微生物的芽胞的除菌方法。90180.利用物理或化学方法杀死所有微生物包括细菌的芽胞的除菌方法称为灭菌。90181.利用一定孔径的滤膜阻止微生物的通过而除去溶液中或者空气中微生物的除菌方法。90182.利用热的蒸汽杀死微生物的灭菌方法。湿热灭菌又分常压蒸汽灭菌和加压蒸汽灭菌。90183.利用干热空气杀死微生物的方法。其灭菌工艺条件通常为160-170℃/2h。90184.根据使用的目的,控制培养基的组成成分,使之有利于某种微生物的生长而限制其它微生物的生长,从而能从自然界混杂的群体中分离出某一种单一的微生物。如无氮培养基用来分离土壤中的自生固氮菌。90185.在基本培养基中加入血清,动植物组织液或者其它生长因子而配制出来的营养特别丰富的培养基。90186.根据微生物的代谢特点,通过指示剂的显色反应,用以鉴别不同微生物的培养基。90187.数值孔径是判断物镜和聚光镜性能的重要指标,通常用N.A表示。N.A=n.sinα/2(n为介质折光率,α为镜口角)。90188.分辨力是指显微镜能够分辨出的物体两点间最小距离的能力。它与波长及物镜的数值孔径有关。90189.利用过滤除菌的原理而设计出来的一种无菌操作工作台,鼓风机鼓出的空气通过孔径很小的薄膜将空气中的微生物过滤后变成无菌空气吹向操作台,可防止周围有菌空气流入,能保证操作台始终保持无菌状态,便于无菌操作。90190.纯培养技术是培养某个单一微生物的方法。包括培养基的制作与灭菌。单一微生物的分离与纯化,和无菌操作接种技术。5、问答题90191.测定微生物细胞的大小主要使用目镜测微尺。其方法如下:1.先用长度已知的镜台测微尺校正目镜测微尺。校正的方法是让台尺与目尺重叠,看台尺的X格正好与目尺的Y格重叠,然后用计算目尺每格的长.分别校正目镜测微尺在低倍镜,高倍镜及油镜下每格所代表的实际长度。2.将待测微生物制成水浸片或染色涂片置载物台上,调焦找到微生物后用目镜测微尺测量其宽几格,长几格,然后乘上相应放大倍数下的校正值。3.一般测10个微生物,然后以平均值表示。4.若是酵母、细菌等单细胞微生物,通常测其宽和长,然后以平均宽平均长表示,单位为μm。90192.1.测数前先准备好测数用的1ml无菌吸管,9cm无菌平皿,9ml试管无菌水和牛肉膏蛋白胨琼脂培养基。2.称取10克工业菌粉加入90ml无菌水中置摇床上或用手振荡20-30分钟,让菌体分散。3.将上述振荡过的菌液按无菌操作法进行十倍稀释直到10-8。4.取9cm无菌平板皿9套用记号笔在平皿底编号,10-8编3套,10-7编3套,10-6编3套。5.用1支1ml的无菌吸管,取1ml10-8的稀释菌液放入编号10-8的平皿中,如此将三个重复做完。同法取10-7稀释菌液放入三个编号为10-7平皿中。同法取10-6稀释菌液放入三个编号为10-6平皿中.(均要按无菌操作法做)。6.将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基熔化冷至45-50℃后,在酒精灯火焰边按无菌操作法倒入上述9套平皿中,每个加入量大约15-20ml,边加边摇动平皿,,使培养基与菌液充分混匀。7.待培养基凝固后,将平板倒过来,置28-30℃下培养48小时后计数。90193.1.取9ml无菌平皿一套在火焰旁按无菌操作法倒人15-20ml营养琼脂,让其冷凝成平板。2.左手拿上述平板,右手拿接种环在火焰上灭菌后沾取原始分离物在平板上平行划线三条。3.将接种环在火焰上灭菌,左手平板转动大约70度,用灭菌接种环通过第一次划线的地方作二次划线,亦划三条。4.同上法再作第三次,,第四次划线。5.盖上平板盖,将平板倒过来置28-30℃下培养2-4天后观察结果。划的好应在第四次划线处出现单个菌落。注:本答案也可画图说明。90194.检查细菌的运动性有两种方法:1.镜检法将待检样品制成菌悬液,滴一点菌液于一盖玻片上,取一凹窝载玻片,将凹窝对准菌悬液盖在盖玻片上,然后将盖玻片和载玻片一起翻转,让菌悬液在凹窝上的盖玻片下。然后在显微镜下观察,观察应找悬液的边缘,因细菌为了更多地接触空气,