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中华人民共和国国家标准中华人民共和国国家标准食品工具、设备用洗涤消毒剂卫生标准GB14930.2-94Hygienicstandardsfordetergentanddisinfectionforfoodtoolsandinstallations━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━1主题内容与适用范围本标准规定了食品工具、设备洗涤消毒剂的卫生要求和杀灭细菌、肝炎病毒的指标。本标准适用于蔬菜、水果、食品用工具、设备的消毒剂、洗涤消毒剂。2引用标准GB2760食品添加剂使用卫生标准GB4789.2食品卫生微生物学检验菌落总数测定GB5009.11食品中总砷的测定方法GB5009.60食品包装用聚乙烯、聚苯乙烯、聚丙烯成型品卫生标准的分析方法GB9986餐具洗涤剂试验方法GB14930.1食品工具、设备用洗涤剂卫生标准3术语3.1洗涤消毒剂：指兼有洗涤和消毒作用的制剂。3.2食品用工具、设备：指食品生产经营过程中接触的机械、管道、传送带、容器、用具、餐具等。4感官指标产品无杂质、无异味。液体产品不分层,无悬浮或沉淀。颗粒及粉状产品不结块。5理化指标理化指标见表1。表1━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━┳━━━━━━━━━━━━━━━项目┃指标━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━╋━━━━━━━━━━━━━━━含磷酸盐≤┃5砷(以As计),mg/kg不含磷酸盐≤┃3━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━╋━━━━━━━━━━━━━━━重金属(以Pb计),mg/kg≤┃30━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━╋━━━━━━━━━━━━━━━色素┃按GB2760规定荧光增白剂┃不得检出━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━┻━━━━━━━━━━━━━━━6微生物灭活指标微生物灭活指标见表2。表2━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━┳━━━━━━━━━━━项目┃指标━━━━━━━━━┳━━━━━━━━━━━━━━━╋━━━━━━━━━━━灭活细菌的指标┃大肠杆菌┃99.9%┃金黄色葡萄球菌┃99.9%━━━━━━━━━╋━━━━━━━━━━━━━━━╋━━━━━━━━━━━破坏病毒的指标┃纯化HBsAg┃P/N2.1┃含10%正常血清HBsAg┃P/N2.1━━━━━━━━━┻━━━━━━━━━━━━━━━┻━━━━━━━━━━━7检验方法7.1感官检验：按GB9986餐具洗涤剂试验方法执行。7.2理化检验7.2.1总砷的测定：按GB5009.11执行。7.2.2重金属测定：按GB5009.60执行。7.2.3荧光增白剂的测定：按GB9986.6执行。7.3灭活细菌试验7.3.1检验用细菌大肠杆菌：8009,ATCC25922金黄色葡萄球菌：ATCC259237.3.2大肠杆菌及金黄色葡萄球菌悬液制备取传代的标准菌种接种于肉汤中,于37℃培养18～24h,分离到营养琼脂平板,挑出典型菌落,接种到营养琼脂斜面,培养18～24h。刮取菌苔混悬于灭菌生理盐水中,振摇2min,配成10**7～lO**8/mL的菌悬液,用活菌计数法(按GB4789.2执行)放4℃冰箱保存,可用4～5d。7.3.3中和剂为了去除残留的消毒剂一般采用化学中和法,稀释法等,食品工具设备用消毒剂一般为含氯(碘)消毒剂,可用0.1～1.0g硫代硫酸钠。根据消毒剂种类不同而选择中和剂,并在试验中要设中和剂对照以观察中和剂对试验有无抑制作用和是否有中和消毒剂的作用。必须用实验证明该中和剂可中止消毒剂的作用,有无其他不良影响,可通过以下实验确定。a.(消毒剂+菌液)+中和剂有少量菌生长或不长菌;b．中和剂+菌液有菌生长；c.(消毒剂+中和剂)+菌液有菌生长；d.菌液+营养肉汤有菌生长；e.消毒剂+菌不长菌或菌量少于a组；f.营养肉汤培养基对照无菌生长。7.3.4消毒药物试验浓度的配制(用碘量法)消毒药物的杀菌试验在20～25℃进行。消毒药物试验浓度的配制见附录A;7.3.5定性杀菌试验测定方法7.3.5.1将中试管10支排列于试管架上稀释药液每管加生理盐水2.5mL于第一管加一定浓度的消毒药2.5mL混匀后,取出2.5mL移至第二管混匀取2.5mL移至第三管倍数稀释直至第九管,第十管不加药做对照。7.3.5.2将以上稀释的不同浓度消毒药中加菌液2.5mL(或加入一片可溶性菌片),对照管亦加同量细菌。7.3.5.3加菌后5、10、15、30min,每管依次取出0.5mL,加入含有中和剂的4.5mL营养肉汤中。将上述营养肉汤管放30℃培养24h,观察结果若发生混浊,即表示有菌生长,若肉汤不变混,应继续培养至72h。7.3.5.4结果判定：以最低浓度无菌生长的管为最低杀菌有效浓度,以无菌生长的最短消毒时间为该消毒液最低有效时间。7.3.6定量杀菌检验定量杀菌检验,消毒剂与菌液作用方法同7.3.5定性杀菌检验,作用不同时间(5、10、15min)将上述原液分别取出0.5mL,加4.5mL中和剂,10min后进行活菌计数(按GB4789.2执行),计算杀菌率,同时以生理盐水代替消毒液作对照,实验需重复3次。杀菌率(Pt)的计算No-Nt杀菌率(Pt)(%)=━━━━━×100No式中：No──为消毒前对照组菌数；Nt─—为消毒后或实验组活菌数。7.4乙型肝炎表面抗原破坏试验7.4.1试验方法采用固相放射免疫法(SPRIA)或酶联免疫试验法(ELISA)两种方法敏感度应测到：SPRIA法为1～10ng/mL；ELlSA法为15～20ng/mL。7.4.2消毒方法取含≥1mg/mL的纯化HBsAg200μL(或含10％小牛血清的HBsAg)加入800μL不同浓度的消毒液,简称“混合液”,分别作用不同时间,然后加入20％硫代硫酸钠0.1mL中和残留消毒剂,静止10min后,再用SPRIA法或ELIS法测定。7.4.3SPRIA法测定方法用20孔塑料盘,每孔加入用抗-HBs包被的聚苯乙烯珠一粒,加入消毒剂后的“混合液”0.2mL,置43℃孵育1.5h。每个样品两孔,然后用去离子水洗涤4～5次,加入125I标记的抗-HBsO.2mL,置43℃孵育1h,用去离子水洗4～5次,然后用r计数器测定cpm值,每次试验需做药盒的阳性、阴性对照,中和剂对照,药物对照及HBsAg对照,药盒的P/N值5,药盒质量合格,试验成立。若实验样品与阴性对照比值≥2.1时则消毒药物无效,若比值2.1时则为合格。．7.4.4ELISA法测定方法7.4.4.1用聚苯乙烯板作固相载体,将抗-HBs用pH9.6碳酸盐缓冲液稀释,使蛋白含量为10～20μg/mL,取0.1mL稀释后的抗体,加入聚苯乙烯孔内,置4℃冰箱中过夜,用洗涤液洗涤3次。7.4.4.2封闭空位：每孔加5％小牛血清磷酸盐缓冲液0.1mL37℃温育2h,用洗涤液洗3次。7.4.4.3加入消毒剂后的“混合液”0.1mL,每个样品做2孔,同时作药盒的阳性和阴性对照,中和剂,消毒药物及HBsAg对照,37℃温育2h,用洗涤液洗3次。7.4.4.4加入用辣根过氧化物酶标记的抗-HBs0.lmL,37℃温育1.5h,用洗涤剂洗涤4次。7.4.4.5加入底物-邻苯二胺(OPD)溶液0.1mL,15～30min后加入1mol/L硫酸0.5mL,用分光光度计测定吸光度值。7.4.4.6若药盒P/N值≥5,则药盒合格,若试验样品P/N值≥2.1时则消毒药不合格,P/N值2.1时则为合格。7.4.5计算破坏试验也可用定量试验结果来表示,即用HBsAg破坏率(％)来表示。A-BHBsAg破坏率(％)=━━━━━━×100A式中：A──消毒前样品中HBsAg含量；B──消毒后样品中HBsAg含量。样品中HBsAg含量可用mg/mL或直接用cpm或吸光度值,消毒后标本如果HBsAg转阴一般灭活率已达99％或以上。附录A有效氯的测定方法(补充件)A1碘量法原理洗涤剂中有效氯在酸性溶液中与碘化钾起氧化作用,释放出一定量的碘,再以硫代硫酸钠标准溶液滴定碘,根据硫代硫酸钠标准溶液的消耗量计算出有效氯含量。A2试剂A2.10.025mol/L硫代硫酸钠标准溶液。A2.22mol/L硫酸溶液。A2.310％碘化钾溶液。A2.40.5％淀粉溶液。A3操作方法称取含氯消毒剂1.00g,用蒸馏水溶解后,转入250mL容量瓶中,向容量瓶加蒸馏水至刻度、混匀,向碘量瓶中加2mol／L硫酸10mL,10％碘化钾溶液10mL,混匀的消毒液5mL溶液即出现棕色,盖上盖并混匀后加蒸馏水于碘量瓶缘,用0.05mol／L硫代硫酸钠标准溶液滴定游离碘,边滴边摇匀,待溶液呈淡黄色时加入0.5%淀粉溶液10滴(溶液立即变蓝色),继续滴定至蓝色消失,记录所用硫代硫酸钠的总量,重复3次取平均值计算。A4计算：根据硫代硫酸钠的用量,计算有效氯含量,亦即1mol/L硫代硫酸钠1mL相当于0.0355g有效氯,因此可按下式计算有效氯含量：c×v×0.0355有效氯含量(％)=━━━━━━━X100％W式中：c──为硫代硫酸钠的摩尔浓度；v──消耗硫代硫酸钠的体积,mL;W──碘量瓶中含消毒剂的量,g。━━━━━━━━━━━附加说明：本标准由卫生部卫生监督司提出。本标准由天津市食品卫生监督检验所、卫生部食品卫生监督检验所起草。本标准主要起草人郑鹏然、白竟玉、杨淑德、李悠慧。本标准由卫生部委托技术归口单位卫生部食品卫生监督检验所负责解释。━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━中华人民共和国卫生部1994-01-24批准1994-08-01实施