TCCCMHPIE 1.42-2018 植物提取物 岩藻多糖

T中国医药保健品进出口商会团体标准T/CCCMHPIE1.42—2018ICS11.120C25植物提取物岩藻多糖Plantextract——Fucoidan中国医药保健品进出口商会发布2018-07-01发布2018-07-15实施T/CCCMHPIE1.42—2018I前言本标准按照GB/T1.1—2009和GB/T20004.1—2017给出的规则起草。本标准由中国医药保健品进出口商会提出。本标准由中华人民共和国商务部归口。本标准由中国医药保健品进出口商会国际商务标准化技术委员会负责解释。本标准负责起草单位：北京雷力联合海洋生物科技有限公司、北京绿色金可生物技术股份有限公司、青岛明月海藻集团有限公司。本标准主要起草人：严国富、汤洁、牛红艳、姚军芳、王晓梅。T/CCCMHPIE1.42—20181岩藻多糖1范围本标准规定了岩藻多糖的技术要求、检验方法、检验规则、包装、运输和贮存要求。本标准适用于以山东海域海带或裙带菜的藻体为原料，经水提，无水乙醇沉降、脱水，干燥等工序制得的多糖类产品。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB4789.2食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定GB4789.4食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验GB4789.15食品安全国家标准食品微生物学检验霉菌和酵母计数GB4789.38食品安全国家标准食品微生物学检验大肠埃希氏菌计数GB4806.1食品安全国家标准食品接触材料及制品通用安全要求GB5009.3食品安全国家标准食品中水分的测定GB5009.4食品安全国家标准食品中灰分的测定《中华人民共和国药典（2015版）》第四部通则0861残留溶剂测定法《中华人民共和国药典（2015版）》第四部通则0982粒度和粒度分布测定法《中华人民共和国药典（2015版）》第四部通则2321铅、镉、砷、汞、铜测定法3技术要求3.1工艺要求3.1.1植物原料山东海域褐藻门布科海带LaminariajaponicaAresch.或褐藻门、褐子纲海带目、翅藻科裙带菜UndariaPinnatifidaSuringar.的藻体。3.1.2工艺过程原料→粉碎→提取→过滤→分离→沉降、脱水→干燥→产品3.2产品要求3.2.1感官要求应符合表1的规定。T/CCCMHPIE1.42—20182表1感官要求3.2.2理化要求应符合表2的规定。表2理化要求3.2.3微生物要求项目要求色泽近白色或淡黄色、色泽均匀滋味与气味略带海藻腥味、无异味外观均匀粉末或颗粒，无肉眼可见异物项目指标鉴别经水解供试品液相色谱图中应出现与对照品液相色谱图相应峰；未经水解供试品液相色谱图中不得出现特征峰。凝胶色谱鉴定供试品分子量在2万~30万道尔顿之间，平均分子量应大于1万道尔顿，岩藻多糖应不含小分子单糖。L-岩藻糖（按干燥品计）/%≥15.0硫酸基（以SO42--计）/%≥15.0水分/%≤16.0灰分/%≤30.0重金属及有害元素砷（As）/（mg/kg）铅（Pb）/（mg/kg）镉（Cd）/（mg/kg）汞（Hg）/（mg/kg）≤2.0≤3.0≤1.0≤0.1T/CCCMHPIE1.42—20183应符合表3的规定。表3微生物要求3.2.4其他污染物其他污染物限量要求，依据不同要求，应符合我国相关法规的规定。对于出口产品，应符合出口目的国相关法规的规定。4检验方法4.1感官检验在光线充足、无异味、清洁卫生的环境中，将试样置于白色搪瓷盘或不锈钢工作台上，观察其色泽、外观，并检查有无异物。4.2理化指标4.2.1鉴别按第A.2章中规定的方法进行测定。经水解供试品液相色谱图中应出现与对照品液相色谱图相应峰，未经水解供试品液相色谱图中不得出现特征峰，特征图谱及参考保留时间见附录B。凝胶色谱鉴定供试品分子量在2万~30万道尔顿之间，平均分子量应大于1万道尔顿，岩藻多糖应不含小分子单糖。岩藻多糖供试品凝胶柱标准曲线和凝胶色谱图见附录B。4.2.2L-岩藻糖按第A.3章中规定的方法进行测定。4.2.3硫酸基（SO42-）按第A.4章中规定的方法进行测定。项目指标菌落总数/（CFU/g）≤1000霉菌及酵母菌数/（CFU/g）≤100大肠埃希氏菌不得检出沙门氏菌不得检出T/CCCMHPIE1.42—201844.2.4水分按GB5009.3中的第一法进行测定。4.2.5灰分测定按GB5009.4中的第一法进行测定。4.2.6重金属及有害元素按《中华人民共和国药典（2015版）》第四部通则2321铅、镉、砷、汞、铜测定法进行测定。4.3微生物指标4.3.1菌落总数按GB4789.2中规定的方法进行检验。4.3.2霉菌及酵母菌数按GB4789.15中规定的方法进行检验。4.3.3大肠埃希氏菌按GB4789.38中规定的方法进行检验。4.3.4沙门氏菌按GB4789.4中规定的方法进行检验。5检验规则5.1组批在原料及生产条件基本相同的情况下同一天或同一班组生产的产品为一批，按批号抽取。5.2出厂检验5.2.1产品须逐批检验，检验合格并签发检验合格证，产品凭检验合格证出厂。5.2.2出厂检验项目：外观、水分、灰分、L-岩藻糖、硫酸基（SO42-）、重金属及有害元素、菌落总数、霉菌及酵母菌数、大肠埃希氏菌、沙门氏菌。5.3型式检验53.1型式检验项目包括本标准中规定的全部项目。5.3.2有下列情况之一时须进行型式检验。T/CCCMHPIE1.42—20185a）长期停产后重新恢复生产；b)原料变化或改变主要生产工艺，可能影响产品质量时；c)国家质量监督机构提出进行型式检验要求时；d)出厂检验与上次型式检验有很大差异时；e)正常生产时，每6个月至少一次型式检验。5.4判定规则5.4.1检验结果全部项目符合本标准规定时，判该批产品为合格品。5.4.2检验结果不符合本标准要求时，可以在原批次产品中双倍抽样复检一次，判定以复检结果为准。复检后仍有一项或一项以上不符合标准时，判该批产品为不合格品。6包装、标签、运输、贮存6.1包装内包装为食品包装复合袋或者PE袋，应符合GB9683或GB/T4456的规定。外包装纸箱材料应符合GB/T6543的规定。6.2标签包装标签上应标明：产品名称、生产厂名、厂址、生产日期、批号、保质期、净含量、体积、标准号、批文号及储运要求的图形类标志符号。6.3运输运输时运输工具应清洁、卫生、无异味、无污染。运输过程中应防止挤压、防雨、防潮、防晒，装卸时应轻搬、轻放。运输时严禁与有毒、有害、有异味、有腐蚀性、易污染的货物混装混运。6.4贮存产品应贮存于阴凉、干燥的仓库中。避免与有毒、有害、易腐、易污染等物品一起堆放。6.5保质期在符合规定的贮运条件、包装完整、未经开启封口的情况下，保质期为36个月。T/CCCMHPIE1.42—20186附录A（资料性附录）鉴别方法A.1一般规定本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和符合GB/T6682规定的实验用水。实验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。A.2鉴别A.2.1HPLC鉴别A.2.1.1仪器和材料A.2.1.1.1高效液相色谱仪（附紫外检测器）。A.2.1.1.2电子天平，感量为0.01mg。A.2.1.1.3乙腈。A.2.1.1.4L-岩藻糖对照品、半乳糖对照品。A.2.1.2鉴别方法A.2.1.2.1对照品溶液的配制准确称取L-岩藻糖对照品、半乳糖对照品各10mg置烧杯中，加蒸馏水溶解，移入10mL容量瓶中，用水定容至刻度，待衍生化。A.2.1.2.2对照品溶液的衍生化取待衍生溶液1mL置5mL具塞玻璃试管中，加入0.3mol/L氢氧化钠溶液1mL，混合均匀后加入0.5mol/LPMP甲醇溶液1mL混匀，置于70℃恒温水浴锅中反应70min。取出后冷却至室温，加入0.3mol/L醋酸溶液1mL中和。将衍生化溶液转移至10mL容量瓶中，用0.1mol/L磷酸二氢钾缓冲溶液定容至刻度。取上述溶液1mL于5mL具塞玻璃试管中，加入三氯甲烷2mL，涡旋混合后弃去三氯甲烷层，重复2次，将剩余水相过0.45μm水系膜，进行色谱分析。A.2.1.2.3未经水解的供试品溶液的配制T/CCCMHPIE1.42—20187准确称取岩藻多糖样品100mg置50mL烧杯中，加10mL蒸馏水溶解，转入25mL容量瓶中，用0.1mol/L磷酸二氢钾缓冲溶液定容至刻度，待衍生化。衍生化条件同“对照品溶液的衍生化”。A.2.1.2.4经水解的供试品溶液的配制准确称取岩藻多糖样品100mg于水解管中，加入4mol/L三氟乙酸溶液10mL，混匀后充入氮气封盖，在110℃烘箱中水解2h后室温冷却，加入4mol/L氢氧化钠溶液10mL中和，调节pH值至中性。将水解溶液转移到25mL容量瓶中，用0.1mol/L磷酸二氢钾缓冲溶液定容至刻度，待衍生化。衍生化条件同“对照品溶液的衍生化”。A.2.1.2.5色谱系统与系统适应性十八烷基键合硅胶填充柱（250mm4.6mm，5µm）或同类型柱；以乙腈﹣50mmol/L磷酸二氢钾缓冲溶液（15:85，v/v）为流动相A，以乙腈﹣50mmol/L磷酸二氢钾缓冲溶液（40:60，v/v）为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；流速为1.0mL/min，柱温为40℃，检测波长为250nm。理论板数按L-岩藻糖峰计算应不低于5000。时间（min）流动相A（%）流动相B（%）0100099010154555251000A.2.1.2.6测定分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10µL，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图。A.2.2凝胶色谱鉴别A.2.2.1仪器和材料A.2.2.1.1紫外可见光分光光度计。A.2.2.1.2电子天平，感量为0.01mg。A.2.2.1.3苯酚。A.2.2.1.4硫酸。A.2.2.2鉴别方法T/CCCMHPIE1.42—20188A.2.2.2.1供试品溶液的配制准确称取岩藻多糖样品100mg置50mL烧杯中，加入10mL蒸馏水溶解，转入100mL容量瓶中，蒸馏水定容至刻度。过0.45μm水系膜，即得供试品溶液。A.2.2.2.2凝胶色谱条件凝胶色谱柱（Sepharose2B，粒径60-200μm），柱温25℃，流速2.0mL/min，固定相为琼脂糖凝胶，流动相为1.0%NaCl；长径比90:1（cm/cm）；上样量为0.2mL；苯酚—硫酸显色；480nm可见光检测。A.2.2.2.3供试品平均分子量测定根据凝胶层析分析理论中，分离目标样品与相对分子质量之间呈对数线性关系的原理，见公式（E.1）。m=a–blgM……………..………………………..………（E.1）式中：m——出峰体积（ml）；a——常数158.21；b——常数23.892；M——相对分子质量。以相对分子质量的对数值为横坐标，以出峰时洗脱液体积纵坐标，绘制凝胶柱标准曲线。以洗脱液体积为横坐标，以吸光度纵坐标，绘制岩藻多糖供试品凝胶色谱图。A.3L-岩藻糖A.3.1方法提要岩藻多糖样品在酸性条件下水解，经1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）进行衍生化后，高效液相色谱分析，外标法定量。A.3.2仪器和材料A.3.2.1高效液相色谱仪：配紫外检测器。A.3.2.2分析天平：感量0.01g、0.0001g。A.3.2.3涡旋混合器。A.3.2.4鼓风干燥箱。T/CCCMHPIE1.42—20189A.3.2.5恒温水浴锅。A.3.2.6氮吹仪。A.3.2.7超声清洗器。A.3.2.8水解管：耐压螺盖玻璃管或硬质玻璃管，体积20mL~30mL，用去离子水冲洗干净并烘干。A.3.2.9具塞玻璃离心管：5mL。A.3.2.10容量瓶：10mL、25mL、100mL。A.3.2.11对照品：L-岩藻糖、半乳糖。A.3.2.121-苯基-3-