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ICS65.150B52DB33浙江省地方标准DB33/T872—2012杂交鳢“杭鳢1号”种质要求Requirementsforgermplasmofhybridsnakehead“HangliNo.1”[Channamaculate(♀)×Channaargus(♂)F1]2012-12-21发布2013-01-21实施浙江省质量技术监督局发布DB33/T872—2012I前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由浙江省海洋与渔业局提出。本标准由浙江省水产标准化技术委员会归口。本标准起草单位：杭州市农业科学研究院。本标准主要起草人：谢楠、冯晓宇、郭水荣、刘凯、刘新轶、王宇希、姚桂桂。DB33/T872—20121杂交鳢杭鳢1号种质要求1范围本标准规定了杂交鳢“杭鳢1号”的术语与定义、主要外部形态特征、生长、遗传学特性、检测方法及检验规则与结果判定等内容。本标准适用于杂交鳢“杭鳢1号”的种质检测与鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T18654.1养殖鱼类种质检验第1部分：检验规则GB/T18654.3养殖鱼类种质检验第3部分：性状测定GB/T18654.4养殖鱼类种质检验第4部分：年龄和生长的测定GB/T18654.12养殖鱼类种质检验第12部分：染色体组型分析GB/T18654.13养殖鱼类种质检验第13部分：同工酶电泳分析3术语与定义下列术语和定义适用于本标准。3.1杂交鳢“杭鳢1号”HybridSnakehead“HangliNo.1”【Channamaculata（♀）×Channaargus（♂）F1】以珠江水系斑鳢为母本、钱塘江水系乌鳢为父本，通过杂交获得的杂交种F1。4主要外部形态特征4.1体形与体色鱼体呈纺锤形，头部尖而扁平，躯干前部浑圆后部侧扁，尾鳍呈圆形。口端位，下颌稍突出。背部青绿色，体侧灰黑色，腹部白色或灰白色。头侧具2条纵行黑色条纹，向后延伸在躯干部呈两列块状斑纹。头部上方具“”形斑纹，尾鳍基部具2至3条弧形斑纹。杂交鳢“杭鳢1号”外形见图1。杂交鳢“杭鳢1号”与亲本斑鳢、乌鳢体形与体色差异见附录A。DB33/T872—20122侧面观头部背面观图1杂交鳢“杭鳢1号”外形图4.2可数性状背鳍鳍式为D.0-42～48，臀鳍鳍式为A.0-27～32，侧线鳞数51～64，第一鳃弓外侧鳃耙数8～12。4.3可量性状杂交鳢“杭鳢1号”外部形态主要可量性状见表1。表1杂交鳢“杭鳢1号”外部形态主要可量性状全长/体长吻长/体长头长/体长眼径/体长眼间距/体长杂交鳢“杭鳢1号”(n=60)1.139±0.0550.036±0.0090.253±0.0090.027±0.0130.060±0.0155生长5.1生活习性杂交鳢“杭鳢1号”可摄食人工配合饲料、鲜活鱼虾及冰鲜鱼。水温14℃以下停止摄食，江浙地区自然条件下可安全越冬，最适生长水温25℃~30℃。5.2体重与体长关系杂交鳢“杭鳢1号”体重与体长和关系式为y=0.1965x2.295（体长30cm～35cm）。式中x代表体长（单位：cm）；y代表体重（单位：g）。6遗传学特性6.1细胞遗传学特性染色体数：2n=45染色体组型见图2。DB33/T872—20123图2杂交鳢“杭鳢1号”染色体组型6.2生化遗传学特性杂交鳢“杭鳢1号”肾脏组织乳酸脱氢酶同工酶电泳图谱及电泳扫描图见图3。图3杂交鳢“杭鳢1号”乳酸脱氢酶电泳图谱及扫描图6.3分子遗传学特性以微卫星引物CHA19对杂交鳢“杭鳢1号”及斑鳢、乌鳢DNA进行PCR扩增、电泳，电泳图见图4。如图所示，能同时扩增出160bp条带和168bp条带的可确定为杂交鳢“杭鳢1号”，只扩增出160bp条带的可确定为斑鳢，只扩增出168bp条带的可确定为乌鳢。说明:M:标准分子量；1-7:乌鳢；8-14:斑鳢；15-28:杂交鳢“杭鳢1号”。图4引物CHA19PCR电泳图谱7检测方法DB33/T872—201247.1主要外部形态特征检测按GB/T18654.3规定的方法进行。7.2细胞遗传学特性检测按GB/T18654.12方法进行。7.3生化遗传学特性检测按GB/T18654.13规定的方法进行。7.4分子遗传学特性检测7.4.1DNA提取取肌肉组织，尽量剪碎，用DNA提取试剂盒或常规酚方法提取基因组DNA，TE溶解后-20℃保存备用。7.4.2PCR扩增CHA19引物序列为F：CTTGAGAACTGGCGACGTTT，R：TACGAAGAAATCCCCGTCTG。10μLPCR扩增反应体积内含：1XPCRBuffer，1.5mmol／LMgCl2，200μmol／LdNTP，200μmol／L上下游引物，0.1UTaq酶，100ng模板DNA，灭菌去离子水补齐。PCR反应程序为：95℃预变性3min；94℃变性30s，53℃退火30s，72℃延伸1min，23个循环；最后72℃延伸10min。7.4.3电泳PCR产物经8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，用Puc18DNA/MspI作为标准分子量，快速银染法染色，拍照后观察分析。8检验规则与结果判定按GB/T18654.1的规定执行。DB33/T872—20125AA附录A（资料性附录）杂交鳢“杭鳢1号”与亲本斑鳢、乌鳢体形与体色差异A.1概述本资料性附录给出了杂交鳢“杭鳢1号”与亲本斑鳢、乌鳢的体形与体色差异。A.2杂交鳢“杭鳢1号”与亲本斑鳢、乌鳢体形与体色差异杂交鳢“杭鳢1号”与亲本斑鳢、乌鳢的外形相似，主要差异表现在头长比例与体表斑纹，见图A.1和表A.1。侧面观头部背面观图A.1杂交鳢“杭鳢1号”及斑鳢、乌鳢外形图杂交鳢“杭鳢1号”斑鳢乌鳢DB33/T872—20126表A.1杂交鳢“杭鳢1号”与斑鳢、乌鳢外形差异差异部位杂交鳢“杭鳢1号”斑鳢乌鳢头长比例较乌鳢小与杂交鳢“杭鳢1号”接近较杂交鳢“杭鳢1号”及斑鳢大头部上方斑纹具“”形斑纹具“”形斑纹具“”形斑纹体侧斑纹体侧具两列排列整齐的块状斑纹体侧具两列斑纹，上侧列斑纹呈连续状或少数几处断开，下侧斑纹呈块状整齐排列体侧斑纹排列不规则，呈块状斑纹尾鳍基部斑纹具2至3条弧形斑纹具2至3条弧形斑纹无弧形斑纹_________________________________