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ICS65.020.01B50DB33浙江省地方标准DB33/T905—2014滩涂埋栖型双壳贝类苗种人工繁育通用技术规范Generaltechnicalspecificationforbenthicbivalve’artificialbreedingandseedling2014-02-28发布2014-03-28实施浙江省质量技术监督局发布DB33/T905—2014I前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由浙江省海洋与渔业局提出。本标准由浙江省水产标准化技术委员会归口。本标准起草单位：浙江万里学院、浙江省海洋水产养殖研究所、宁波市海洋与渔业研究院。本标准主要起草人：林志华、边平江、董迎辉、沈伟良、陈彩芳、沈庞幼。DB33/T905—20141滩涂埋栖型双壳贝类苗种人工繁育通用技术规范1范围本标准规定了泥蚶（Tegillarcagranosa）、缢蛏（Sinonovaculaconstricta）、文蛤（Meretrixmeretrix）、青蛤（Cyclinasinensis）等滩涂埋栖型双壳贝类苗种生产场地的设施与环境、亲贝选择和处理、催产和孵化、幼虫培育、稚贝培育、饵料培养、大规格苗种培育、苗种收获、包装和运输、标准化生产模式图等技术要求。本标准适用于滩涂埋栖型双壳贝类室内工厂化繁育，室外池塘或设施化大规格苗种培育可参照执行。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB2762食品安全国家标准食品中污染物限量GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量GB18406.4农产品安全质量无公害水产品安全要求GB/T18407.4农产品质量安全无公害水产品产地环境要求NY5052无公害食品海水养殖用水水质NY5071无公害食品渔用药物使用准则NY5073无公害食品水产品中有毒有害物质限量SC/T2042文蛤亲贝和苗种SC/T3016水产品抽样方法SC/T3018水产品中氯霉素残留量的测定气相色谱法SC/T3022水产品中呋喃唑酮残留量的测定液相色谱法3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1催产人工方法诱导刺激亲贝产卵、排精。3.2D型幼虫DB33/T905—20142又称初期面盘幼虫，或直线铰合幼虫。由壳腺分泌形成的两片贝壳包裹了全身，侧面观如英文字母D。3.3壳顶幼虫D型幼虫经过一段时间的发育，铰合线开始向背部隆起，形成壳顶的幼虫。3.4眼点幼虫在壳顶幼虫后期，幼虫足的基部出现的一对黑褐色腺体的幼虫。3.5附着基眼点幼虫附着的基质。可用无污染的中高潮带涂面海泥，浸泡成泥浆后去除沙石杂质并消毒。3.6稚贝幼虫向幼贝过渡的一个发育阶段。主要特征是面盘完全退化，钙质的贝壳形成，用鳃呼吸，足部发达，营底栖生活。3.7壳长壳前端至壳后端的最大直线距离。3.8规格合格率达到规格的苗种数量占苗种总数的百分比。3.9伤残空壳率壳残缺、破碎、畸形和空壳苗种数占苗种总数的百分比。3.10杂质率苗种中的杂质（除贝苗外的其他物质）重量占苗种总重量的百分比。4环境与设施4.1环境DB33/T905—20143交通便利、电力设施完备，海水水源无污染。产地环境符合GB/T18407.4的规定，水质符合NY5052的规定。4.2设施育苗池、单细胞藻类培养池齐全，供水、电、气和热设施完备。5亲贝选择和处理5.1来源捕自自然海区或人工养成。5.2选择选择体壮、形态正常无畸形，壳表无损伤、无附着物、无寄生虫，性腺成熟而饱满的2龄～3龄贝为亲贝。文蛤亲贝选择应符合SC/T2042的要求。5.3处理洗净亲贝，用10毫克/升～20毫克/升高锰酸钾溶液浸泡5分钟～15分钟，期间需连续搅拌。然后用清洁海水洗净。6催产和孵化6.1催产亲贝阴干8小时～16小时后，流水或充气刺激1小时～3小时。6.2洗卵根据产卵池中精子和排泄物的含量，洗卵2次～3次。也可结合捞泡沫、加换水等方法去除多余精子及杂质。6.3孵化持续微充气孵化。受精卵孵化密度为20颗/毫升～40颗/毫升。产卵孵化池可与育苗池兼用。6.4D型幼虫收集发育为D型幼虫后20小时内，用300目～500目筛绢网排水收集与清洗，然后移入育苗池培育。7幼虫培育7.1培养池大小以30平方米～50平方米为宜，蓄水高度1米～1.5米。7.2培育密度DB33/T905—20144D型幼虫培育密度以10个/毫升～15个/毫升为宜；壳顶幼虫培育密度以5个/毫升～10个/毫升为宜。7.3充气持续微充气，保持水中溶解氧浓度在5毫克/升以上。7.4换水D型幼虫期、壳顶幼虫期、眼点幼虫期分别用300目、250目、200目筛绢滤苗换水，日均换水2次，换水量为30%～80%。7.5投饵D型幼虫期投喂金藻、角毛藻等新鲜单细胞藻类为主，投喂量为保持水体中藻细胞为1×104个/毫升～5×104个/毫升；壳顶幼虫期后可投喂扁藻，投喂量为5×103个/毫升～1×104个/毫升。每天投喂2次，早晚各一次，均在换水后1小时内进行。7.6倒池与洗苗幼虫培育期间，3天～5天倒池洗苗一次。采用网目最大孔径小于幼虫壳高的筛绢网袋，从幼虫培育池的排水口收集，然后移入消毒过的并注满新鲜过滤海水的培育池中。培育密度可根据本标准7.2执行。7.7附苗镜检发现1/3幼虫出现眼点时移入附苗池。池底稚贝密度达到2×106颗/平方米时，即移出未附着变态的幼虫到新附苗池。8稚贝培育8.1培养池大小宜为30平方米～50平方米，长方形水泥池，蓄水高度80厘米以上。8.2培育密度稚贝初始培育密度为2×106颗/平方米，随着个体的生长而逐渐降低，每隔5天～10天疏减培养密度50%。8.3投饵每天投饵2次～4次，换水后或移池后1小时内进行。投饵量以扁藻1×104个/毫升、金藻及角毛藻5×104个/毫升～1×105个/毫升为宜。8.4培育管理8.4.1充气按本标准7.3执行。8.4.2换水DB33/T905—20145培养池控制水位在50厘米～80厘米，日换水量为80%～100%。在排水口安装100目～150目的筛绢网袋，以防贝苗逃漏。8.5出苗及苗种运输8.5.1规格壳长≥500微米。8.5.2质量同批贝苗个体大小均匀，无同规格死壳。苗体干净，具固有气味，无异臭味。斧足粗壮有力，活力强。在干净的玻璃板上斧足伸缩频率高，爬行速度快，粘液痕迹明显。8.5.3计数采用称量法。先将贝苗混合均匀，用天平称取0.5克～1.5克计数，根据贝苗总重，推算出贝苗数量，连续取样3次，取其平均值。8.5.4包装采用筛绢袋盛苗，扎紧袋口，用砂滤海水淋湿贝苗，置于开口的塑料桶、泡沫箱等硬质容器中。装苗容器不应积水。8.5.5运输采用干法运输，途中保持贝苗湿润，严防暴晒、雨淋、风吹。运输时间不宜超过15小时，长时间运输宜用空调车或飞机。9饵料培养9.1藻种保存保存在试管或三角烧瓶中，在光照培养箱中保存。9.2一级培养在具备控温、调光装置条件的室内进行，采用容积为500毫升～3000毫升三角烧瓶。培养器皿应烘箱高温消毒后使用，培养液应煮沸消毒。营养盐要求分析纯。扩种所用海水亦应煮沸消毒，达到灭菌效果。9.3二级培养采用白色塑料桶或挂袋培养，容积为50升～100升。培养液应采用有效氯或漂白精消毒，并用硫代硫酸钠中和去除余氯。9.4生产性培养采用面积为20平方米～40平方米的培养池，蓄水高度为60厘米～100厘米。培养液用100毫克/升漂白粉消毒，经10小时～12小时，用等量硫代硫酸钠中和后使用。9.5藻类供应DB33/T905—20146供幼虫投喂使用的藻液。投喂的藻液应停止施肥培养3天以上，氨氮含量在1毫克/升以下。10中间培育10.1池塘培育10.1.1设施池塘面积为0.6公顷～2公顷，培苗滩面表层软泥厚度以5厘米～10厘米为宜。翻耕涂面、挖浅沟、整畦，每畦面积以60平方米～70平方米为宜，蓄水至畦面50厘米～60厘米。池塘养殖区应分别设置独立的进排水设施。池塘内培育苗种的滩面四周应设置高于蓄水位20厘米的聚乙烯网。10.1.2苗种10.1.2.1规格壳长≥500微米。10.1.2.2密度每畦（60平方米～70平方米）以3×106颗～5×106颗苗为宜。10.1.2.3疏养培养15天为宜，起苗、清洗、除害并分苗疏养。10.1.2.4查苗定期检查贝苗的成活率和生长情况。10.1.2.5记录做好水温、盐度、进排水、投入品等日常工作记录。10.1.3除害投放贝苗前，用20目～40目网袋刮除螺类、蟹类等敌害生物。然后用生石灰、漂白粉、茶籽饼、鱼藤精等药物清塘。主要药物使用方法见表1。使用其他药物应符合NY5071的规定。表1常用清塘药物的功能和使用方法药物名称浓度（毫克/升）使用方法主要靶目标种类药效消失时间生石灰375～500干洒或兑水全塘（池）泼洒鱼、虾、蟹、贝、细菌、藻类10天漂白粉30～50先加少量水调成糊状，再兑水泼洒鱼、虾、蟹、贝、细菌、藻类1天茶籽饼15～30敲碎，用水浸泡24小时后稀释泼洒鱼类2天～3天鱼藤精2～3用水混合后均匀泼洒鱼类2天～3天10.2无附着基培育10.2.1水泥池集约化培育DB33/T905—20147将苗均匀地泼撒于水泥池底培育，培育密度按本标准8.2执行。10.2.2上升流装置集约化培育利用气流带动垂直水流通过贝类苗层进行苗种培育；将上升流装置安放于木筏上，气管与U型管相连，U型管的一端与培育装置上端一侧的开口处相连，另一端置于培育装置中间，整个木筏连同培育装置一起置于养殖池塘的中央，具体操作可参照附录A。实现主动式上升流，气流量需达到8.5升/分钟。在以气压压强来控制时，气压压强应控制在0.016兆帕斯卡～0.024兆帕斯卡范围内。流水量控制在6升/分钟，幼虫培育密度为2.5克/立方厘米。10.2.3平面流装置集约化培育通过提水装置使养殖池塘的水进入蓄水装置，后者放水分流到每个平面水槽，使水流均匀流过置于平面水槽内的贝类苗种，然后由水槽另一端流出，最终流入养殖池塘中。具体操作可参照附录B。水流量为5升/分钟～12升/分钟，幼虫培育密度为0.3千克/平方米～0.625千克/平方米，贝苗成活率及生长率都较为理想。11苗种质量要求11.1规格壳长为10毫米～20毫米。11.2质量检验11.2.1感官检验肉眼应可见苗体规格均匀，清洁干净，无附着生物，无异味。11.2.2规格合格率、伤残空壳率、杂质率规格合格率≥90%；伤残空壳率≤5%；杂质率≤5%。11.2.3质量安全要求贝体污染物限量按GB2762的规定执行，贝体农药残留限量按GB2763的规定执行，贝体渔药残留限量按GB18406.4的规定执行，麻痹性贝类毒素、腹泻性贝类毒素按NY5073的规定执行。11.3试验方法11.3.1感官要求将样品放于洁净的白瓷盘中，在自然光明亮处，感官检测苗种壳色、气味、活力等。将适量样品置于自然海水中进行活力检测。11.3.2安全要求污染物检测按GB2762的规定执行，农药检测按GB2763的规定执行，渔药检测按GB18406.4的规定执行，麻痹性贝类毒素、腹泻性贝类毒素的检测按NY5073的规定执行。氯霉素的检测按SC/T3018的规定执行，呋喃唑酮的检测按SC/T3022规定执行。11.4判定规则DB33/T905—2014811.4.1组批规则以相同培育方式培育池或同一产地、同一时间捕捞为一检验批。11.4.2抽样方法抽样方法按SC/T3016执行。抽样数量按SC/T2042执行。11.4.3合格判定规格合格率、伤残空壳率、杂质率和感官检验，检验结果两项以上不合格，则判定本批苗种为不合格；一项不合格，允许复检，复检不合格则判定本批苗种为不合格。安全指标检验结果中有一项不合格则判定本批苗种不合格，不得复检。12标准化生产模式图滩涂埋栖型双壳贝类苗种人工繁育标准化生产模式图见附录C。DB33/T905—20149附录A（资料性附录）上升流装置集约化培育A.1上升流装置结构示意图上升流装置结构示意图见图A.1、图A.2和图A.3。A