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PCR培训班考试试题一、选择题（共20题，每题2分）1、PCR技术扩增DNA,需要的条件是(A)①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体A、①②③④B、②③④⑤C、①③④⑤D、①②③⑥2、镁离子在DNA或RNA体外扩增反应的浓度一般为（D）A、0.3-1mmol/LB、0.5-1mmol/LC、0.3-2mmol/LD、0.5-2mmol/L3、多重PCR需要的引物对为（D）A、一对引物B、半对引物C、两对引物D、多对引物4、PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应，其特异性决定因素为（B）A、模板B、引物C、dNTPD、镁离子5、在PCR反应中，下列哪项可以引起非靶序列的扩增的扩增(C)A、TaqDNA聚合酶加量过多B、引物加量过多C、A、B都可D、缓冲液中镁离子含量过高6、PCR技术的发明人是（A）A、MullisB、史蒂文.沙夫C、兰德尔.才木7、PCR产物短期存放可在（A）保存。A、4℃B、常温C、-80℃D、高温8、PCR产物长期储存最好置于（D）。A、4℃B、常温C、16℃D、-20℃9、PCR的基本反应过程包括（A）1/4A、变性、退火、延伸B、变性、延伸C、变性、退火10、在实际工作中，基因扩增实验室污染类型包括(D)A、扩增产物的污染B、天然基因组DNA的污染C、试剂污染和标本间交叉污染D、A、B、C都可能11、PCR技术于哪一年发明（A）A、1983B、1971C、1987D、199312、TaqDNA聚合酶酶促反应最快最适温度为（C）A、37℃B、50-55℃C、70-75℃D、80-85℃13、以下哪种物质在PCR反应中不需要（D）A、TaqDNA聚合酶B、dNTPsC、镁离子D、RNA酶14、PCR检测中，经过n个循环的扩增，拷贝数将增加（C）A、nB、2nC、2nD、n215、PCR基因扩增仪最关键的部分是（A）A、温度控制系统B、荧光检测系统C、软件系统D、热盖16、以下哪项不是临床PCR实验室设计的一般原则（A）A、各区合并B、注意风向C、因地制宜D、方便工作17、PCR实验室一般包括(D)A、试剂准备区B、标本制备区C、扩增区和产物分析区D、A、B、C都含18、PCR技术不仅为遗传病的诊断带来了便利，而且改进了检测细菌和病毒的方法。若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒，你认为可以用PCR扩增血液中的（D）。A、白细胞DNAB、病毒蛋白质C、血浆抗体D、病毒核酸2/419、如果反应体系中加入模板DNA分子100个，则经过30个循环后，DNA分子的数量将达到（D）个。A、100×30B、100×30×2C、100×302D、100×23020、PCR扩增产物的分析方法主要有（D）A、凝胶电泳分析法B、点杂交法C、荧光探针定量PCR法D、A、B、C都是二、判断题（共20题，每题2分）1、PCR引物设计的目的是在扩增特异性和扩增效率间间取得平衡。（√）2、在PCR反应中，dATP在DNA扩增中可以提供能量，同时作为DNA合成的原料。（√）3、DNA扩增过程未加解旋酶，可以通过先适当加温的方法破坏氢键，使模板DNA解旋。（√）4、PCR反应中，复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成。（√）5、PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高。（√）6、PCR技术可用于基因诊断，判断亲缘关系等。（√）7、PCR技术需在体内进行。（×）8、PCR反应体系中的缓冲液相当于细胞中的体液。（√）9、核酸的复制是由5＇——→3＇方向进行的。（√）10、配对的碱基总是A与T和G与C。（√）11、HBsAg转阴性后一段时间才出现可检测的HBsAb，此段间隔期称之为“窗口期”。（√）3/412、市面上多数试剂用淬灭基团Q基团和报告基团R基团来标记荧光定量PCR的探针。（√）13、PCR反应体系中Mg2+的作用是促进TaqDNA聚合酶活性。（√）14、若标本中含有蛋白变性剂（如甲醛），PH、离子强度、Mg2+等有较大改变都会影响Taq酶活性。（√）15、每个子代DNA分子中均保留一条亲代DNA链和一条新合成的DNA链，这种复制方式称之为半保留复制。（√）16、发生溶血的标本对PCR结果没影响。（×）17、“平台效应”是描述PCR后期循环产物对数累积趋于饱和。（√）18、逆转录聚合酶链式反应（reversetranscription-PCR，RT-PCR）就是在应用PCR方法检测RNA病毒时，以RNA为模板，在逆转录酶的作用下形成cDNA链，然后以cDNA为模板进行正常的PCR循环扩增。（√）19、在定量PCR中，72℃这一步对荧光探针的结合有影响，故去除，实际上55℃仍可充分延伸，完成扩增复制。（√）20、PCR可应用于遗传病、肿瘤及病原体检测三大方面（√）三、简答(共两题，每题10分)1、PCR技术答：PCR技术是用一对寡聚核苷酸作为引物（要点1：2分），通过高温变性、低温退火、中温延伸（要点2：5分）这一周期的多次循环，使特异的DNA片段数量指数倍数增加（要点3：3分）。2、简述定量PCR检测操作的全过程。答：标本的采集，保存（2分）——→样品前处理（2分）——→待样品充分裂解后点样上机反应（2分）——→反应结束后观察结果（2分）——→发报告（2分）4/4