DB21T 3060-2018 饲料中香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、γ—壬内酯、肉桂

ICS65.120B46DB21辽宁省地方标准DB21/T3060—2018饲料中香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、γ—壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑的含量测定气相色谱法Detectionofvanillin,ethylvanillin,cinnamaldehyde,peachaldehyde,isoamylacetate,gamma-nonanolactone,methylcinnamate，ethylmaltolandanetholeinfeedstuffsbygaschromatography2018-10-30发布2018-11-30实施辽宁省市场监督管理局发布DB21/T3060—2018I前言本标准按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2015给出的规则起草。本标准由辽宁省畜牧兽医局提出并归口。本标准起草单位：辽宁省兽药饲料畜产品质量安全检测中心。本标准主要起草人：郭国贤、张明、张秀芹、王丽娜、刘雪红、张雪娇、苗翠、兰雨濛、侯广正。DB21/T3060—20181饲料中香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、γ—壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑的含量测定气相色谱法1范围本标准规定了配合饲料、复合预混合饲料、浓缩饲料、精料补充料中香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、γ—壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑的气相色谱测定方法。本标准适用于配合饲料、复合预混合饲料、浓缩饲料、精料补充料中香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、γ—壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑的含量测定。本方法的检出限为20mg/kg，定量限为50mg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。GB/T14699.1（ISO6497IDT）饲料采样GB/T20195动物饲料试样的制备3原理试样中香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、γ—壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑用无水乙醇超声提取，提取液过滤膜后以氮气作为载气，使用气相色谱氢火焰检测器测定，外标定量法。4试剂或材料除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂。4.1化学试剂：无水乙醇。4.2标准品：香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、γ—壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑纯度均≥98.5%。4.3混合标准贮备溶液：分别称取香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、γ—壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑标准品100mg（精确至0.1mg），置于同一棕色10mL容量瓶中，用无水乙醇（4.1）溶解并定容，配成浓度为10mg/mL的标准贮备溶液。2～8℃密封保存，有效期为3个月。4.4混合标准中间溶液：准确移取香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、γ—壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑混合标准贮备溶液（4.3）1mL置于10mL棕色容量瓶中，用无水乙醇（4.1）定容至刻度。该溶液的浓度为1mg/mL。2℃～8℃密封保存，有效期为1个月。DB21/T3060—201824.5混合标准工作溶液：准确移取香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、γ—壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑混合标准中间溶液(4.4)适量，用无水乙醇（4.1）稀释成浓度分别为5、10、20、50、100、200、500g/mL的标准工作溶液。现用现配。5仪器设备5.1分析天平：感量为0.1mg；5.2气相色谱仪：配氢火焰检测器(FID)和程序升温的柱温箱；5.3微孔滤膜：0.45μm，有机相。6试样制备制样过程中应防止样品受到污染或含量发生变化。按GB/T14699.1的规定，取饲料样品500g，按GB/T20195规定制备试样，粉碎过0.45mm孔径筛，充分混匀，装入磨口瓶中备用。7分析步骤7.1提取称取试样约1g（精确至0.1mg），置于10mL棕色容量瓶中，加5mL无水乙醇（4.1），超声20min，降至室温后，用无水乙醇（4.1）定容至刻度。混匀后静置。取上清溶液，溶液过0.45µm的微孔滤膜，供上机测定。同时做试剂空白试验。7.2测定7.2.1气相色谱参考条件色谱柱：DB-5毛细管柱，长60m，内径0.25mm，膜厚0.25µm，或性能类似的色谱柱；载气：高纯氮气，2.0mL/min；分流比：10:1；进样口温度：270℃；检测器：氢火焰检测器；检测器温度：290℃；柱温箱温度：起始温度90℃，保持2min，以15℃/min升至200℃，保持8min；进样量：1.00L。7.2.2测定在仪器最佳工作条件下，取混合标准工作溶液（4.5，从低浓度到高浓度）和试样溶液分别上机测定，以混合标准工作液中香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、γ—壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑峰面积为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准工作曲线，对样品进行定量。试样溶液中香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、γ—壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑的响应值应在标准工作曲线测定的线性范围内。超出线性范围的则用无水乙醇（4.1）适当稀释后再DB21/T3060—20183进样分析。在上述色谱条件下，香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、γ—壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑标准溶液色谱图见附录A。8试验数据处理试样中香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、γ—壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑的含量以质量分数Xi计，单位为毫克每千克(mg/kg)，按式(1)计算：niCVXm=………………………（1）式中：C——由标准曲线计算所得的试样中香兰素、乙基香兰素、肉桂醛、桃醛、乙酸异戊酯、γ—壬内酯、肉桂酸甲酯、乙基麦芽酚、大茴香脑的浓度，单位为微克每毫升（g/mL）；m——试样的质量，单位为克（g）；n——稀释倍数；V——样品定容体积，单位为毫升（mL）。平行测定结果用算术平均值表示，结果保留3位有效数字。9精密度在同一实验室，由同一操作人员完成的两个平行测定结果，相对偏差不大于20%。DB21/T3060—20184AA附录A（资料性附录）9种香味剂标准溶液的色谱图图A.1给出了9香味剂标准溶液的色谱图1—乙酸异戊酯2—乙基麦芽酚3—肉桂醛4—大茴香脑5—γ—壬内酯6—肉桂酸甲酯7—香兰素8—乙基香兰素9—桃醛图A.19香味剂标准溶液的色谱图（浓度为50g/mL）空白饲料色谱图图A.2给出了9种香味剂空白的色谱图DB21/T3060—20185图A.2空白饲料色谱图图A.3给出了添加混合标样的样品色谱图1—乙酸异戊酯2—乙基麦芽酚3—肉桂醛4—大茴香脑5—γ—壬内酯6—肉桂酸甲酯7—香兰素8—乙基香兰素9—桃醛图A.3添加混合标样（20µg/mL）的样品色谱图_________________________________