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ICS65.150CCSB5137山东省地方标准DB37/T4342—2021川蔓草种子收集与保存技术规范TechnicalspecificationsforseedcollectionandstorageinRuppiasinensis2021-03-11发布2021-04-11实施山东省市场监督管理局发布DB37/T4342—2021I前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由山东省海洋局提出并组织实施。本文件由山东省海洋标准化技术委员会归口。本文件起草单位：威海虹润海洋科技有限公司、中国科学院海洋研究所、荣成峻鹏生物科技有限公司。本文件主要起草人：周毅、张晓梅、顾瑞婷、徐少春、杨红生、王培亮、王军杰。DB37/T4342—20211川蔓草种子收集与保存技术规范1范围本文件规定了川蔓草种子收集、保存的原则和技术方法等要求。本文件适用于川蔓草种子收集与保存工作。2规范性引用文件本文件没有规范性引用文件。3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1海草seagrass可完全生活在海水中的高等被子植物，隶属于泽泻目（Alismatales）。注：我国分布的海草包括四科，分别是鳗草科（Zosteraceae），丝粉草科（Cymodoceaceae），水鳖科（Hydrocharitaceae）和川蔓草科（Ruppiaceae）。3.2川蔓草Ruppiasinensis生活在海湾以及咸水、半咸水生境的一年生或多年生被子植物，属于川蔓草科，川蔓草属（Ruppia）。3.3生殖枝floweringshoot/reproductiveshoot海草进入花期/繁殖期后，发育形成花和种子等生殖器官的茎枝。3.4营养枝vegetativeshoot不进行有性繁殖过程的茎枝。4种子收集和保存原则优先选择面积较大的川蔓草床作为种子来源。4.1应提前做好本底调查，确定目标草床的种子成熟期和休眠期，以明确种子采集最佳时间和保存方4.2法。种子采集时应合理调整采集量。4.3外观黑色且质地坚硬的种子一般均具有活力，宜进行保存。4.45收集生殖枝种子收集5.1DB37/T4342—202125.1.1采集时间5.1.1.1生殖枝的采集应在种子开始成熟、但尚未脱落时进行，即大部分种子已颗粒饱满而外壳坚硬。5.1.1.2不同地理种群的种子成熟时间存在差异：a)黄河口地区：7月～9月；b)威海地区：9月～10月。5.1.2采集5.1.2.1徒步采集种子大量成熟季节，当川蔓草床水深低于1m时，可徒步进入草床，直接用孔径不大于0.5mm的细筛轻轻横扫川蔓草冠层，使带有川蔓草种子的果柄或花序轴落入筛子。5.1.2.2行船采集当川蔓草床面积较大且水深大于1m时，可行船进入川蔓草床，控制船速，用工具捞取冠层的生殖枝部分。采集时应控制采集量、避免过度干扰草床。5.1.3运输采集的生殖枝宜进行冷藏运输。运输时间较短时（＜6hr）亦可采用常温避光运输，注意保持生殖枝湿润状态。5.1.4暂养将川蔓草生殖枝置于自然海水池中暂养，1m3水体暂养生殖枝湿重应不超过2kg。自然光照，保持通氧，水温不宜超过25℃。每日换水并充分搅动生殖枝，以避免堆积缺氧，造成种子腐烂。5.1.5种子收集川蔓草生殖枝完全衰败后，将水体内腐败的组织碎屑捞出并反复筛洗，收集碎屑内的种子。沉积物种子收集5.25.2.1沉积物采集当错过生殖枝收集时，可在川蔓草花期结束、种子成熟脱落进入底泥且未萌发时，挖取草床表层10cm以浅的沉积物，以收集其中包含的川蔓草种子。5.2.2沉积物运输采集的沉积物宜进行冷藏运输。5.2.3种子收集在海水中用不小于1.5mm的大孔径网筛和不大于0.5mm的小孔径网筛分别去除较大和较小的颗粒杂质，人工挑选完整且坚硬的种子。沉积物筛洗过程需要大量海水，可在现场或有条件的实验室内进行。收集记录5.3种子收集过程中，应记录时间、地点、采集方法、采集量以及后续处理细节，并填写种子采收记录表（见附录A中表A.1、表A.2）。DB37/T4342—202136保存运输过程中的保存6.16.1.1水环境运输种子置于海水中，海水温度不超过4℃，种子密度应小于20万粒/L，每天对水体进行观察，出现浑浊时应及时换水。换水频率宜为两天一次，且所换水体需进行提前预冷到同等温度。6.1.2干燥环境运输种子置于空气中，空气相对湿度不高于40%，且温度不超过20℃。该方法宜用于3d内的短时运输，当进行大于7d的较长时间运输时，可能会造成部分种子活力降低。种子的室内保存6.26.2.1干燥保存保存过程中川蔓草种子表面保持相对干燥，且维持环境相对湿度不高于40%，无直接光照，温度不高于4℃。保存期限不宜超过6个月。6.2.2湿法保存将川蔓草种子置于盐度为20～40的人工海水或灭菌的自然海水中，温度控制在0℃～1℃，避光保存。每月换水一次以上，人工海水和容器应在同等温度下预冷4h以上。保存过程中应定期观察，防止水体出现结冰现象。抗菌剂的使用6.3在种子短期和长期保存过程中，可加入浓度不小于2ppm的纳米银或硫酸铜等抗菌剂。保存记录6.4种子保存过程中，应记录保存编号、采收编号、保存地点、保存方法、起止时间、种子量、管理人等，并填写种子保存记录表（见附录A中表A.3）。DB37/T4342—20214AA附录A（资料性）川蔓草种子收集记录报表格式表A.1～表A.3给出了川蔓草生殖枝种子采集、底泥种子采集及种子保存记录表。表A.1川蔓草生殖枝种子采收记录表采收编号生殖枝采集（记录人______）生殖枝暂养（记录人______）种子收集（记录人______）地点方法日期重量（kg）地点条件起止日期收集日期种子量(kg)表A.2川蔓草底泥种子采收记录表采收编号底泥采集（记录人______）底泥处理与种子收集（记录人______）地点日期体积（m3）地点日期种子量(kg)表A.3川蔓草种子保存记录表保存编号采收编号保存地点保存方法起止时间种子量(kg)管理人