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ICS65.150CCSB5137山东省地方标准DB37/T4340—2021鳗草种子收集与保存技术规范Technicalspecificationsforseedcollectionandstorageineelgrass(ZosteramarinaL.)2021-03-11发布2021-04-11实施山东省市场监督管理局发布DB37/T4340—2021I前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由山东省海洋局提出并组织实施。本文件由山东省海洋标准化技术委员会归口。本文件起草单位：威海虹润海洋科技有限公司、中国科学院海洋研究所、荣成峻鹏生物科技有限公司。本文件主要起草人：周毅、张晓梅、徐少春、许帅、杨红生、王培亮、王军杰、谷虹。DB37/T4340—20211鳗草种子收集与保存技术规范1范围本文件规定了鳗草种子收集和保存的原则、技术方法等要求。本文件适用于鳗草种子收集与保存工作。2规范性引用文件本文件没有规范性引用文件。3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1海草seagrass可完全生活在海水中的高等被子植物，隶属于泽泻目（Alismatales）。注：我国分布的海草包括四科，分别是鳗草科（Zosteraceae），丝粉草科（Cymodoceaceae），水鳖科（Hydrocharitaceae）和川蔓草科（Ruppiaceae）。3.2鳗草ZosteramarinaL.生活在北温带海洋中的一年生或多年生沉水被子植物。注：系我国北方常见海草的一种，隶属于鳗草科，鳗草属（Zostera）。3.3生殖枝floweringshoot/reproductiveshoot海草进入花期/繁殖期后，发育形成花和种子等生殖器官的茎枝。3.4营养枝vegetativeshoot不进行有性繁殖过程的茎枝。3.5佛焰苞spathe鳗草的生殖器官总称，其肉穗花序由总苞片包裹，状如佛焰，称为佛焰苞。4收集和保存原则优先选择面积不小于0.25ha的鳗草草床。4.1优先选择生殖枝比例不低于20%的鳗草草床。4.2提前做好本底调查，确定目标草床的种子成熟期和休眠期，以明确种子最佳采集时间和保存方法。4.3种子采集时应合理调整采集量。4.4外形完整、质硬、色泽棕至黑色的种子一般具有活力，宜进行保存。4.5DB37/T4340—202125收集生殖枝种子收集5.15.1.1采集时间5.1.1.1鳗草生殖枝的采集应在种子开始成熟但尚未脱落时进行，即大部分种子已颗粒饱满而其颜色尚未加深时。5.1.1.2鳗草生殖枝的采集时间一般是7月上旬。5.1.2采集5.1.2.1步行采集潮间带面积较小或生殖枝比例较低的鳗草草床宜采用步行采集法。每月大潮期间，潮高低于50cm时，携带网具等徒步进入鳗草床，徒手采集生殖枝。5.1.2.2行船采集潮间带面积较大且生殖枝比例较高的鳗草草床宜采用行船采集法。当潮位满足可从水面清晰识别生殖枝和营养枝时，可行船进入鳗草草床，降低船速、人工快速采集视野内的生殖枝，并挑选剔除夹带的营养枝。5.1.2.3潜水采集潮下带分布的鳗草草床宜采用潜水采集法。潜水员可携带网具下潜至鳗草冠层上方，徒手采集生殖枝。5.1.3运输采集的生殖枝宜进行冷藏运输。运输时间较短时（＜6hr）亦可采用常温避光运输，注意保持生殖枝湿润状态。5.1.4暂养5.1.4.1现场暂养选择封闭的海湾或潟湖进行生殖枝现场暂养。将生殖枝装入细网袋（孔径≤0.7mm），用较大孔径渔网进行外层加固，将整个网袋固定于船只、木桩、筏架等设施，并浸没于海水中。5.1.4.2室内暂养选择室内较大容积的养殖池、缸或者桶进行生殖枝暂养。将生殖枝直接散置于水体内或用网袋分装悬挂于水体中，1m3水体生殖枝不超过2kg。保持自然光照、通氧、水温不高于26℃，每日换水并充分搅动生殖枝。5.1.4.3佛焰苞冷藏暂养较为珍贵稀缺的种子资源，可将含有种子的佛焰苞进行冷藏暂养。采摘生殖枝上含有种子的佛焰苞，及时装袋避免过度脱水，并置于密闭、避光、低温（1℃～4℃）条件保存。DB37/T4340—202135.1.5种子收集当暂养的生殖枝或者佛焰苞的种子完全成熟脱落后，用海水反复漂洗，剔除腐烂的海草叶片等组织碎屑，完成种子收集。漂洗所用海水的温度应与暂养环境的温度相同。沉积物种子收集5.25.2.1沉积物采集当错过生殖枝收集时，可在鳗草花期结束、种子成熟脱落进入底泥后，在低潮时挖取草床表层10cm以浅的沉积物，以收集其中包含的种子。5.2.2沉积物运输采集的沉积物宜进行冷藏运输。5.2.3种子收集在海水中用不小于1.5mm的大孔径网筛和不大于0.7mm的小孔径网筛分别去除较大和较小的颗粒杂质，人工挑选完整结实的种子。沉积物筛洗过程需要大量海水，可在现场或有条件的实验室内进行。种子收集记录5.3种子收集过程中，应记录时间、地点、采集方法、采集量以及后续处理细节等，填写种子采收记录表（见表A.1、表A.2）。6保存运输过程中的保存6.1鳗草种子运输过程中，应置于自然海水或人工海水中密闭冷藏保存，每天换水，时间不超过7d。室内保存6.26.2.1中短期（小于6个月）保存6.2.1.1常温保存将鳗草种子放入孔径不大于0.7mm的网袋中，置于自然海水循环水系统中，维持常温水温（20℃），每三天充分抖动一次网袋中的种子。6.2.1.2冷藏保存将鳗草种子置于盛有自然海水的容器中冷藏（4℃）保存。6.2.2长期（6个月—3年）保存将鳗草种子置于盐度为40～50的人工海水中，温度维持0℃～1℃，避光保存。每月换水一次，人工海水和容器应在同等温度下预冷4h以上。保存过程中应定期观察，防止水体出现结冰现象。抗菌剂的使用6.3在鳗草种子短期和长期保存过程中，可加入浓度2ppm～5ppm纳米银或硫酸铜等抗菌剂。DB37/T4340—20214盐水选种法的使用6.4将收集的种子置于比重1.20的人工盐水中，饱满的种子会沉于底部，可快速筛选高质量鳗草种子。保存记录6.5种子保存过程中，应记录保存编号、采收编号、保存地点、保存方法、起止时间、种子量、管理人等，并填写种子保存记录表（见表A.3）。DB37/T4340—20215AA附录A（资料性）鳗草种子收集记录报表格式表A.1～表A.3给出了鳗草生殖枝种子采集、底泥种子采集及种子保存记录表。表A.1鳗草生殖枝种子采收记录表采收编号生殖枝采集（记录人______）生殖枝暂养（记录人______）种子收集（记录人______）地点方法日期重量（kg）地点条件起止日期收集日期种子量(kg)表A.2鳗草底泥种子采收记录表采收编号底泥采集（记录人______）底泥处理与种子收集（记录人______）地点日期体积（m3）地点日期种子量(kg)表A.3鳗草种子保存记录表保存编号采收编号保存地点保存方法起止时间种子量(kg)管理人