物品及环境的消毒灭菌监测方法庄红娣四川大学华西医院主要内容1.空气消毒效果监测2.手卫生效果的监测3.物品和环境表面消毒效果监测4.医院环境卫生学监测报告单5.灭菌物品的监测上海手术室医院感染暴发流行事例•2001年上海某医院儿科心脏术后18例肺炎克雷伯杆菌血液感染•上海某医院心脏手术后鲍曼不动杆菌血液感染暴发•Donotconductrandom,undirected,microbiologicsamplingofair,waterorenvironmentalsurfacesinhealthcarefacilities(270,343).”(SectionIA)•在医疗机构中不推荐随机,无目的的进行空气、水、环境表面的采样。Where?Why?How?在哪里采样?为什么采样?怎么采样?Where?在那里采样•Air空气•Water水质•Surface环境表面•OR手术室•ICU重症监护病房Why?为什么采样•Outbreakinvestigation暴发调查•Construction、renovation、repair•建筑、重建、维修•Routinemonitoring常规监测HOW?怎么采样?空气消毒效果监测•非洁净区域空气消毒效果监测•采样时间:在消毒处理后,操作前进行采样。•采样方法:根据其采样原理分平板暴露和微生物采样器法。平板暴露法:布点方法室内面积≤30m2,设置内、中、外对角线3个点,内、外布点部位距墙壁1m处,距地0.8—1.5米•室内面积30m2,设4角及中央5点,4角布点部位距离墙壁1m处。•采样方法:将普通营养琼脂平板或血平板(直径9cm)放在室内各采样点处,采样高度距地面1.5m,内外及四角距墙1m,采样时将平板盖打开,扣放于平板旁,暴露5或15分钟,盖好立即送检。•检测方法:将采样后平皿置36℃±温箱培养48,计数并鉴定。结果计算平板暴露法按每皿的菌落数报告:cfu/(皿·暴露时间)例:某Ⅱ类环境病房治疗室≤30m2,需放置三个平皿,其菌落计数分别为5、3、2环境微生物菌落总数卫生标准环境类别空气平均菌落数cfu/皿cfu/m3物体表面平均菌落数cfu/cm2洁净手术部及其他洁净场所1类环境符合GB50333要求≤4.0(30min)≤150≤5.0Ⅱ类环境Ⅲ类环境Ⅳ类环境≤4.0(15min)—≤4.0(5min)—≤4.0(5min)—≤5.0≤10.0≤10.0•。•各类环境空气、物体表面菌落总数卫生标准•a:cfu/皿为平板暴露法,cfu/m3为空气采样器法•结果判断《临床输血技术规范》第二十三条贮血冰箱内严禁存放其他物品;每周消毒一次;冰箱内空气培养每月一次,无霉菌生长或培养皿(90mm)细菌生长菌落<8CFU10分钟或<200CFU/立方米为合格。洁净区域空气消毒效果监测8.2.2.1洁净手术部(室)及其他洁净场所,根据洁净房间总数,合理安排每次监测的房间数量,保证每个洁净房间能每年至少监测一次,其监测方法及结果的判定应符合GB50333的要求。GB50333-2013GB50333-2002洁净度5级洁净度100级环境空气中≥0.5μm的微粒数大于350粒/m3(0.35粒/L)到≤3500粒/m3(3.5粒/L);≥5μm的微粒数为0粒/L洁净度6级环境空气中大于等于0.5μm的微粒数大于3500粒/m3(3.5粒/L)到≤35200粒/m3(35.2粒/L);大于等于5μm的微粒数≤293粒/m3(0.3粒/L)。洁净度1000级≥0.5μm的尘粒数>3500粒/m3(3.5粒/L)到≤35000粒/m3(35粒/L);≥5μm的尘粒数≤300粒/m3(0.3粒/L)。洁净度7级环境空气中≥0.5μm的微粒数大于35200粒/m3(35.2粒/L)到≤352000粒/m3(352粒/L);大于等于5μm的微粒数>293粒/m3(0.3粒/L)到≤2930粒/m3(3粒/L)。洁净度10000级≥0.5μm的尘粒数>35000粒/m3(35粒/L)到≤350000粒/m3(350粒/L);≥5μm的尘粒数>300粒/m3(0.3粒/L)到≤3000粒/m3(3粒/L)。洁净度8级境空气中≥00.5μm的微粒数>352000粒/m3(352粒/L)到≤3520000粒/m3(3520粒/L);≥5μm的微粒数大于2930粒/m3(3粒/L)到≤29300粒/m3(29粒/L)。洁净度100000级≥0.5μm的尘粒数>350000粒/m3(350粒/L)到≤3500000粒/m3(3500粒/L);≥5μm的尘粒数>3000粒/m3(3粒/L)到≤30000粒/m3(30粒/L)。洁净度8.5级环境空气中≥0.5μm的微粒数大于3520000粒/m3(3520粒/L)到≤11120000粒/m3(11200粒/L);≥5μm的微粒数大于29300粒/m3(29粒/L)到≤92500粒/m3(92粒/L)。洁净度300000级≥0.5μm的尘粒数>3500000粒/m3(3500粒/L)到≤10500000粒/m3(10500粒/L);≥5μm的尘粒数>30000粒/m3(30粒/L)到≤90000粒/m3(90粒/L)。布点方法GB50333-2002洁净度局部百级周围千级设置13个点GB50333-2013等级区域空气洁净级别沉降法监测点数含尘浓度测点数布点数(取大值)合计(不含对照)Ⅰ手术区5级1351321周边区6级488(每边2点)布点方法GB50333-2002洁净度局部千级周围万级设置9个点GB50333-2013等级区域空气洁净级别沉降法监测点数含尘浓度测点数布点数(取大值)合计(不含对照)Ⅱ手术区6级434(四角布点)10周边区7级366(长边2点,短边1点)布点方法GB50333-2002洁净度局部万级周围十万级设置7个点GB50333-2013等级区域空气洁净级别沉降法监测点数含尘浓度测点数布点数(取大值)合计(不含对照)Ⅲ手术区7级333(单对角线布点)9周边区8级266(长边2点,短边1点)布点方法GB50333-2002洁净度三十万级设置5个点GB50333-2013等级区域空气洁净级别沉降法监测点数喊尘浓度测点数布点数(取大值)合计(不含对照)Ⅳ8.5级2(均匀布点,避开送风口正下方)手卫生效果的监测采样时间:在接触病人、从事医疗活动前进行采样。采样面积及方法:被检人五指并拢,将浸有无菌生理盐水(或含有相应中和剂)采样液的棉拭子一支在双手指曲面从指根到指端来回涂擦各(一只手涂擦面30cm2),并随之转动采样棉拭子,剪去手接触部分,将棉拭子放入装有10ml采样液的试管内送检。细菌菌落数总数计算方法:例:某2类环境病房医务人员卫生手消毒平皿计数88个卫生手清毒,监测的细菌菌落总数应≤10cfu/㎝2外科手消毒,监测的细菌菌落总数应≤5cfu/㎝2评价(合格)标准物品和环境表面消毒效果监测•采样时间:在消毒处理后或怀疑与医院感染暴发有关时进行采样。•采样面积:被采面积<100cm2取全部表面;采样面积≥100cm2,取100cm2采样方法:(棉拭子法、压印法两种)棉拭子法:用5×5cm的标准灭菌规格版,放在被检物体表面,用浸有含有相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子,在规格板内横竖往返均匀涂抹5次,并随之转动棉拭子,可连续采样1~4个规格板面积。具体图示方法1:具体图示方法2:计算方法:小件物体表面的计算结果,用cfu/件表示。评价(合格)标准Ⅰ&Ⅱ类区域:物体表面细菌总数≤5cfu/cm2;Ⅲ类区域:物体表面细菌总数≤10cfu/cm2;Ⅳ类区域:物体表面细菌总数≤10cfu/cm2;1.不得检出致病性微生物为消毒合格。2.采取的标本要有足够的样本数量且具有代表性。如层流洁净手术室,选择具有代表性采样地点,每个房间每种(如手术台、桌、灯等)表面不少于2点。内镜消毒灭菌效果的监测采样时间:在消毒灭菌后,使用前进行。采样方法:监测采样部位为内镜的内腔面。用无菌注射器抽取50ml含相应中和剂,从待检内镜活检口注入后再将冲洗水全部收集,及时送检,2小时内检测。血液透析液的监测采样时间:每月1次。若采样结果超标时,须、重复检查,怀疑或确定病人在治疗中有热原反映和菌血症时,应随时检测。采样方法:透析用水(即自来水经粗滤、砂过滤器、活、性碳过滤器、水软化器(树脂置换)、反渗透装置、储水罐、出水加压泵等步骤处理后出口的液体)在反渗水进入血液透析机的位置采样;入口端和出口端均需采样。透析液:(即透析用水与A、B两种液体混合、后进入人体透析之前的液体)应在进入透析器前采样。注:疑有透析液污染或严重感染病例时,应增加采样点,如原水口、软化水出口、透析液配液口、反渗水出口、贮水罐出口等。灭菌效果监测目的:灭菌效果的监测能有效保证灭菌质量及医疗安全!灭菌效果监测灭效果的监测方法分类:1.物理监测2.化学监测3.B-D试验4.生物监测物理监测法物理监测法又称为工艺监测。检测灭菌器上的量器(压力表、温度表、计时表)、图表、指示针、报警器等。此法作为常规监测方法,均应进行。化学监测法化学监测指示整个消毒过程的完成,取出灭菌包即可显示结果,但不反应微生物真实情况。包括:包外指示胶带和包内指示卡。进行测试。灭菌前包外指示胶带:灭菌后压力蒸汽灭菌器包内指示卡:灭菌前灭菌后爬行式包内指示卡:灭菌前灭菌后环氧乙烷灭菌包外指示胶带:灭菌前灭菌后包内指示卡:灭菌前灭菌后过氧化氢等离子体灭菌包外指示胶带:灭菌前灭菌后包内指示卡:灭菌前灭菌后生物指示剂监测利用耐热的非致病性细菌芽胞作指示菌,以测定热力灭菌的效果。进行,对新灭菌器使用前或拟采用新包装容器、摆放方式、排气方式及特殊灭菌工艺都必须进行生物监测,合格后才能采用。灭菌植入型器械、特殊感时每锅进行。•小型快速灭菌器•环氧乙烷灭菌器•快速内镜灭菌器•等离子体灭菌器•均应进行(工艺、生物、化学)监测B-D试验监测真空水平,检查灭菌器是否漏气。适用于预真空灭菌锅,开始灭菌运行前进行,合格后方可使用。放置位置:灭菌炉排气口的上方温度:134℃时间:3.5-4min空锅做,锅应预热或有直接B-D测试程序的灭菌器不需要预热。