【精品课件】黄草乌化学成分与环境相关性研究

黄草乌化学成分与环境相关性研究答辩人：汪丽娅导师：王永炎教授北京师范大学资源学院资源药物与中药资源研究所二零零五年五月硕士论文答辩CORRELATIONANALYSISFORCHEMICALCOMPONENTSOFACONITUMVILMORINIANUMKOM.WITHENVIRONMENTALFACTORS报告提纲一、选题背景与研究目标二、黄草乌原药材与土壤无机元素相关性分析三、黄草乌生物碱指纹图谱研究四、黄草乌化学成分与气候、土壤生态因子的关系研究五、讨论硕士论文答辩选题背景与研究目标生态环境日益恶化和药用资源的过度开发，许多野生中药材资源已经不能满足需求。人工种植中药材由于来源复杂、生长环境差异大，采收加工不规范等原因导致药材质量极不稳定。为此，国家从2002年开始进行中药材生产的规范化管理（简称GAP）。选题背景硕士论文答辩中药材有效成分多数为植物的次生代谢产物。植物的次生代谢产物是植物在长期进化中与环境相互作用的结果，其产生和变化比初生代谢产物与环境有着更强的相关性和对应性。药材化学成分与环境相关性的研究不仅为药材GAP种植提供基础的数据和背景资料,更重要的是为人工标准化种植提供理论指导。选题背景黄草乌是云南民间常用药材，同时也是一些中成药的主要原料。对黄草乌野外生态资源与生态环境方面的调查发现：目前黄草乌野生资源退化严重，品种混乱，黄草乌GAP种植缺乏基础背景资料和理论指导，人工种植的黄草乌质量不稳定。选题背景选题背景与研究目标研究目标分析黄草乌化学成分累积的特点研究黄草乌化学成分累积与环境因子间的相关关系探讨影响黄草乌化学成分累积的主导环境因子硕士论文答辩为黄草乌人工标准化种植提供理论依据研究技术路线黄草乌野外取样指纹图谱分析无机元素分析土壤样品黄草乌资源、生态环境调查与样品采集采样点气候数据ICPHPLCRA黄草乌无机元素的富集特征不同产地与季节黄草乌指纹图谱特征GRA影响黄草乌生物碱累积的主导环境因子排序评价与矫正硕士论文答辩黄草乌原药材无机元素相关性分析结果结果1黄草乌原药材中无机元素间的相关性结果显示：铁和钴，铁和锡，钴和锡，镍和铬显著相关（P0.01）表明黄草乌对铁和钴，铁和锡，钴和锡，镍和铬的吸收有很好的协同作用。黄草乌原药材及其土壤无机元素相关性研究硕士论文答辩第一部分结果2黄草乌原药材与土壤的无机元素相关性分析黄草乌药材原药材与土壤间无机元素相关性分析的结果显示，二者并无明显相关性。说明黄草乌主要通过选择性吸收调控药材中无机元素的含量，这与黄草乌遗传特性有关.黄草乌原药材及其土壤无机元素相关性研究硕士论文答辩结果3黄草乌原药材无机元素富集系数黄草乌原药材无机元素富集系数的分析结果显示：黄草乌对钙、铅、磷和砷的吸收富集作用明显。黄草乌原药材及其土壤无机元素相关性研究硕士论文答辩滇乌碱（Ⅰ）（yunaconitine）黄草乌碱甲（Ⅱ）（vilmorrianineA）黄草乌碱丙(Ⅲ)（vilmorrianineC）黄草乌对砷的富集作用也比较明显,而砷是形成黄草乌中的化学成分滇乌碱（Ⅰ）（yunaconitine）、黄草乌碱甲（Ⅱ）（vilmorrianineA）、黄草乌碱丙(Ⅲ)（vilmorrianineC）结构中的必要元素。砷直接参与了上述生物碱的形成。不能孤立的依据某种无机元素的含量高低评价药材中该元素的含量，而应分析元素间的相互作用，更多的考察无机元素的存在形态及其作用而不仅仅局限于其含量的多少，单纯以现行的环境标准作为药材质量评价指标具有一定的局限性。黄草乌原药材及其土壤无机元素相关性研究硕士论文答辩黄草乌生物碱指纹图谱研究黄草乌生物碱高效液相指纹图谱研究方法的建立不同产地、不同季节黄草乌生物碱指纹图谱特征研究硕士论文答辩第二部分黄草乌生物碱高效液相指纹图谱研究方法的建立药材提取方法:方法一：碱性乙醚（pH10-11）超声30min过滤，旋干甲醇溶解定容至10ml方法二：碱性甲醇（pH10-11）超声30min过滤，旋干甲醇溶解定容至10ml方法三：甲醇超声30min过滤，旋干甲醇溶解定容至10ml方法四：乙醚超声30min过滤，旋干，水溶解过分离小柱，去除水溶性部分，再用甲醇冲洗分离小柱，溶出脂溶性部分，回收，用甲醇定容至10ml。方法五：甲醇超声30min过滤，旋干，水溶解过分离小柱，去除水溶性部分，再用甲醇冲洗分离小柱，溶出脂溶性部分，回收，用甲醇定容至10ml。色谱条件一：色谱柱一：χTerraRP18柱(3.9ⅹ150mm,5μ)流动相：甲醇：0.1%三乙胺流速：1.0ml/min，柱温：30℃，检测波长：267nm色谱条件二：色谱柱二：μBondapakNH2125Å(3.9ⅹ300mm,10μ)流动相：乙腈：磷酸三乙胺溶液(0.025mol/L磷酸：0.1%三乙胺(3:1))流速：1.0ml/min，柱温：30℃，检测波长：267nm色谱条件三：色谱柱三：ZORBAXSB-C18柱(4.6ⅹ250mm,5μ)流动相：乙腈：磷酸三乙胺溶液(0.025mol/L磷酸：0.1%三乙胺(3:1))流速：1.0ml/min，柱温：30℃，检测波长：267nm硕士论文答辩AU-0.0050.0000.0050.0100.0150.0200.0250.0300.035Minutes0.005.0010.0015.0020.0025.0030.0035.0040.0045.005.87717.07319.41922.17523.00724.04724.70626.59140.080方法一AU0.000.050.100.150.20Minutes0.002.004.006.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.0022.0024.0026.0028.0030.0032.0034.0036.0038.0040.0042.0044.0015.74618.26821.09423.02525.486方法二AU0.0000.0100.0200.0300.040Minutes0.005.0010.0015.0020.0025.0030.0035.0040.0045.0050.0055.0060.0065.0070.0075.0080.00方法三AU0.0000.0100.0200.0300.0400.0500.060Minutes0.005.0010.0015.0020.0025.0030.0035.0040.0045.0050.0055.0060.0065.0070.0075.00方法四AU0.0000.0100.0200.0300.0400.0500.0600.0700.0800.090Minutes2.004.006.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.005.7709.166方法五AU0.0000.0020.0040.0060.0080.0100.0120.0140.0160.0180.0200.022Minutes0.005.0010.0015.0020.0025.0030.0035.0040.0045.0050.0055.0060.0065.0070.004.6139.73618.73723.54128.97829.48131.18132.31833.24734.72235.91457.634方法六AU0.0000.0100.0200.0300.0400.0500.060Minutes0.005.0010.0015.0020.0025.0030.0035.0040.0045.0050.0055.0060.0065.0070.0015.19419.29122.05235.26171.019方法七AU0.0000.0020.0040.0060.0080.0100.0120.014Minutes0.005.0010.0015.0020.0025.0030.0035.0040.0045.0050.0055.0060.0065.0070.0075.0080.00方法八黄草乌生物碱高效液相指纹图谱研究方法的建立方法九AU0.000.020.040.060.080.100.12Minutes0.005.0010.0015.0020.0025.0030.0035.0040.0045.0050.0055.0060.0065.0070.0075.0080.00AU0.000.020.040.060.080.100.12Minutes0.005.0010.0015.0020.0025.0030.0035.0040.0045.0050.0055.0060.0065.0070.007.4468.8859.81212.06612.69516.81322.35122.89224.12225.26026.41828.71831.09931.76133.53738.12938.76445.44947.51648.12849.58051.56054.89262.017方法十黄草乌生物碱高效液相指纹图谱研究方法的建立AU0.000.020.040.060.080.100.12Minutes0.005.0010.0015.0020.0025.0030.0035.0040.0045.0050.0055.0060.0065.0070.007.4468.8859.81212.06612.69516.81322.35122.89224.12225.26026.41828.71831.09931.76133.53738.12938.76445.44947.51648.12849.58051.56054.89262.017药材提取：乙醚超声30min过滤，旋干，水溶解过分离小柱oasisTMHLBCatridge，除水溶性部分，再用甲醇冲洗分离小柱，溶出脂溶性部分，旋干，甲醇溶解定容至10ml色谱条件：色谱柱：ZORBAXSB-C18柱(4.6ⅹ250mm,5μ)流动相：乙腈：磷酸三乙胺溶液(0.025mol•L-1磷酸：0.1%三乙胺(3:1))流动相梯度条件进样量：10μl柱温：30℃流速：1.0ml/min检测波长：267nm硕士论文答辩方法十黄草乌生物碱高效液相指纹图谱研究方法的建立AU0.000.050.10AU0.000.050.10AU0.000.050.10AU0.000.050.10AU0.000.050.10Minutes0.005.0010.0015.0020.0025.0030.0035.0040.0045.0050.0055.0060.0065.0070.00同一地区不同季节黄草乌生物碱指纹图谱的比较AU0.000.050.100.150.200.250.300.350.40Minutes0.005.0010.0015.0020.0025.0030.0035.0040.0045.0050.0055.0060.0065.0070.00XP2-WD(7HJ)XXP2-WD(8HJ)2-WD(8HJ)XP2-WD(9HJ)XP2-WD(10HJ)XP2-WD(11HJ)附图1.17-11月武定地区黄草乌生物碱指纹图谱不同产地、不同季节黄草乌生物碱指纹图谱特征研究硕士论文答辩AU0.000.05AU0.000.05AU0.000.05AU0.000.05AU0.000.05Minutes0.005.0010.0015.0020.0025.0030.0035.0040.0045.0050.0055.0060.0065.00AU0.000.020.040.060.080.100.120.140.160.18Minutes0.005.0010.0015.0020.0025.0030.0035.0040.0045.0050.0055.0060.0065.00XP2-FZS(7HJ)XP2-FZS(8HJ)XP2-FZS(9HJ)XP2-FZS(10HJ)XP2-FZS(11HJ)附图1.27-11月个旧风筝山地区黄草乌生物碱指纹图谱硕士论文