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实验动物环境设施控制2第二节环境设施管理一、普通环境二、屏障环境三、隔离环境一、普通环境动物饲养室与外界相通，无空气净化装置，饲养普通动物。•人员：进入饲养室前必须更换工作服、鞋，戴工作帽和口罩，工作前洗手。•所用物品（均指未经污染的）须经适当处理（饲料经烘干、安全贮存，垫料高温）方可应用，笼具水瓶集中洗刷消毒。二、屏障环境一般特点：•与外界隔绝。表现为无窗或密封门窗，有缓冲间。•空气经过滤后进入，设施内不同的区域之间存在着一定的空气压力差，室内保持正压。•出风口要有过滤装置或U型液体控制阀，出口风速不低于每秒4米，以防止空气逆流形成污染。•物品经高压灭菌、化学灭菌和紫外线照射后进入，即灭菌处理后进入。•人员经过一定的消毒程序后方能进入，如淋浴、洗手、喷雾、风淋等。工作时应带灭菌手套，尽量减少与动物的直接接触。•空气、人、物品、动物的走向采用单向流通。•动物经一定步骤的检疫、监测后证明合格方能进入。•饲养清洁级以上的实验动物。1.所用物品全部消毒灭菌•水灭菌瓶装（酸化灭菌PH2.8～3.0，高压灭菌，过滤除菌）；垫料布袋装均经高压消毒；鼠盒用牛皮纸包装，工作服、帽、手套、口罩等经高压灭菌。•饲料装两层袋，装后密封连同卡片、剪刀等，经CO60照射灭菌。2.人、物、动物流程•人员流程：准备室→更衣→淋浴→更无菌衣→风淋→清洁走廊→动物室→缓冲间→屏障外。•物品流程：洗刷包装室→灭菌室→洁净贮存室→洁净走廊→动物室→缓冲间→污物处理室→洗刷包装。•动物流程：①入屏障:屏障外→传递窗→洁净库→观察室→饲养室②出屏障:饲养室→洁净库→传递窗→屏障外人、实验动物、物品和空气的移动路向：（1）人的移动路向:更衣→淋浴→更衣→清洁走廊→饲养室或动物实验室→污物走廊→洗刷消毒室→更衣→外部区域。（2）物品的移动路向：物品→高压蒸汽消毒炉（包装好的消毒物品可经过传递窗，笼具经泡有消毒液的渡槽）→清洁准备室→清洁物品储存室→饲养室或动物实验室→污物经包装处理→污物走廊→外部区域。（3）实验动物的移动路向：外来实验动物→传递窗→检疫室（经验收、观察后）→清洁走廊→饲养室或动物实验室→实验动物（生产供应或实验处理后须移出屏障环境）→污物走廊（包装）→外部区域。（4）空气的流动路向：洁净空气→清洁走廊、清洁准备室、清洁物品储存室→饲养室或动物实验室→污物走廊→外部区域。三、隔离环境•隔离器：隔离器：整个由高强度软透明塑料薄膜制成，或是前部操作面由高强度透明塑料薄膜制成，长方形，一侧装有橡皮手套，饲养人员通过手套进行操作，不直接接触动物。•鼓风机：将洁净空气通向隔离器，维持隔离器内的换气次数，气流速度及正压。•灭菌渡舱：装在隔离器的一侧，呈桶状，两端具有塑料薄膜套盖，一端在隔离器内，有内盖，一端在外界，有外盖，两盖不能同时打开，专为传入传出物品及动物用。•连接袖：是隔离器与灭菌桶，或两隔离器间连接的通道，传递动物或物品用。•灭菌渡槽：是塑料薄膜筒，一端附于隔离器上，一端浸于隔离器外的药液灭菌槽，剖腹取胎传入。1．所用物品全部消毒灭菌：灭菌后的物品，存放不得超过48小时。•饮水灭菌、垫料布袋或纸袋装，经两次高压消毒，第一次60分钟，第二次30分钟。•饲料双层塑料袋Co60照射消毒，传入隔离器前先在清水中浸泡，检漏，然后撕去第一层塑料袋，放入传递舱内。•鼠盒、工作服、鞋、帽、用具均经高压灭菌。2．入室要求•更换拖鞋、工作服、帽。工作前用药皂洗手。第三节我国实验动物与动物实验设施标准一、设施建筑要求（一）选址实验动物繁育、生产及实验场所应避开自然疫源地。宜选在环境空气质量及自然环境条件较好的区域。宜远离铁路、码头、飞机场、交通要道以及散发大量粉尘和有害气体的工厂、贮仓、堆场等有严重空气污染、振动或噪声干扰的区域。若不能远离上述区域则应布置在当地夏季最小频率风向的下风侧。实验动物繁育、生产、实验设施应与生活区保持大于50m的距离。（二）建筑卫生要求动物繁育、生产、实验场所有围护结构材料均应无毒、无放射性。内墙表面应光滑平整，阴阳角均为圆弧形，易于清洗、消毒。墙面应采用不易脱落、耐腐蚀、无反光、耐冲击的材料。地面应防滑、耐磨、无渗漏。天花板应耐水、耐腐蚀。（三）建筑设施要求建筑物门、窗应有良好的密封性，走廊宽度不应小于1.5m，门宽度不应小于1m。动物繁育、生产及实验室通风空调系统保持正压操作，应合理组织气流布置送排风口的位置，避免死角，避免断流。各类环境控制设备应定期维修保养。二、设施区域设置要求（一）区域布局1．前区的设置包括办公室、维修室、库房、饲料室、一般走廊。2．饲育区的设置•繁育、生产区包括隔离检疫室、缓冲间、育种室、扩大群饲育室、生产群饲育室、待发室、清洁物品贮藏室、清洁走廊、污物走廊。•动物实验区包括缓冲间、实验饲育间、清洁物品贮藏室、清洁走廊、污物走廊。•辅助区包括仓库、洗刷间、废弃物品存放处理间（设备）、密闭式实验动物尸体冷藏存放间（设备）、机械设备室、沐浴间、工作人员休息室。（二）其它设施设置动物实验区的设施应与饲养繁育系统分开设置。带烈性传染病、致癌、使用毒气的动物实验，均应在负压隔离设施或有严格防护的设施内操作，确保在动态传递中与外环境的绝对隔离，排出气体和废物须经无害化处理。环境国家标准相关指标空气洁净度:屏障环境10000级,隔离环境100级氨浓度:≤14mg/m3(动态指标)噪声:dB≤60工作照度:150～300lx相对湿度:40～70％昼夜明暗交替时间:12/12或10/14h实验动物繁育、生产设施环境指标（静态）项目指标小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠犬、猴、猫、小型猪鸡普通环境屏障环境隔离环境普通环境屏障环境隔离环境屏障环境温度℃18~2920~2616~2820~2616~28日温差，℃≤-4-44相对湿度，%40~70换气次数，次/h8~1010~2020~508~1010~2020~5010~20气流速度，m/s0.1~0.2压强梯度，Pa-20~50100~150-20~50100~15020~50空气洁净度，级-10000100-1000010010000落下菌落数，个/皿≤303无检出303无检出3氨浓度，mg/m3≤14噪声，dB≤60照度，lx工作照度150~300动物照度15~20100~2005~10昼夜明暗交替时间h12/12；10/14动物实验设施（设备）环境指标（静态）项目指标小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠犬、猴、猫、小型猪鸡普通环境屏障环境隔离环境普通环境屏障环境隔离环境屏障环境温度℃19~2620~2516~2618~22日温差，℃≤43433相对湿度，%40~70换气次数，次/h8~1010~2020~508~1010~2020~5020~50气流速度，m/s0.1~0.2压强梯度，Pa-20~50100~150-20~50100~15020~50空气洁净度，级-10000100-10000100落下菌落数，个/皿≤303无检出303无检出氨浓度，mg/m3≤14噪声，db≤60照度，lx工作照度150~300动物照度15~20100~200昼夜明暗交替时间h12/12；10/14不同种类动物“热平衡”区的范围不同。在热平衡区，动物呈基础代谢率。如果环境温度降至低于热平衡区温度的下限，动物的代谢率将呈线性增长。如果环境温度高于热平衡区温度的上限，代谢率也将增长，这不是防御机制，而是由于环境温度导致体温升高，升高的体温提高了代谢率。温度LD50值在不同的房间温度条件下相差了35倍，LD50值在动物热稳定区内最高，表明动物在这时对该试验物质的耐受性最强。当然，应用其它物质也可能获得相反的结果，亦即动物在热稳定区的耐受性最小。•对生殖的影响•对表型的影响•对基因表达的影响•对机体抵抗力的影响•对生理机能和行为的影响环境温度与小鼠的脉搏数、呼吸数、发热量的关系环境温度(℃)小鼠数平均标准偏差相关系数心跳数1715752.1次/min21.2r=-0.821p0.012015729.2次/min26.12314907.5次/min21.92616659.3次/min29.62911828.6次/min28.5呼吸数1613285.7次/min24.9r=-0.859p0.011921238.4次/min33.22210207.3次/min28.52510178.6次/min27.42811150.7次/min17.6发热量1050.85kcal/h/只0.12r=-0.69p0.011560.76kcal/h/只0.132060.69kcal/h/只0.082570.61kcal/h/只0.083050.62kcal/h/只0.06各种资料规定的温度标准值（℃）种类ASHRAE¹ILAR²JAPANGV-SOLAS³OECDMRC小鼠23~2521~2721~2520~2419~2517~21大鼠23~2521~2721~2520~2419~2517~21仓鼠-21~2321~2320~2419~2517~21豚鼠22~2321~2321~2516~2019~2517~21家兔21~2416~2121~2516~2017~2317~21猫24~2518~2921~2720~24-17~21犬21~2418~2921~2716~20-17~21猴24~2625~2621~2520~24--1、美国保暖、冷却和空调工程师学会；2、实验动物资源研究所；3、欧洲实验动物学会；4、经济合作和发展组织；5、医学研究委员会湿度Relativeairhumidity湿度：相对湿度是指空气中含水量占同等温度下饱和含水量的百分比。而空气中每立方米水的含量称为绝对湿度。湿度对动物机体热调节有很大影响，当环境温度与体温接近时，动物体可通过蒸发作用来排出热量，而当环境湿度接近或达到饱和状态时（即高温、高湿的情况下），动物体的蒸发受到抑制，不利于动物的散热。各种资料推荐的实验动物湿度标准值（%）种类ASHRAE¹ILAR²JAPANGV-SOLAS³OECDMRC小鼠45~5040~7045~5550~6030~7040~70大鼠45~5040~7045~5550~6030~7040~70仓鼠-40~70-50~6030~7040~70豚鼠45~5040~7045~5050~6030~7040~70家兔45~5040~60-50~6030~7040~70猫45~5030~7045~5550~60-40~70犬45~5030~7045~5550~60-40~70猴7540~6045~5550~60-40~701、美国保暖、冷却和空调工程师学会；2、实验动物资源研究所；3、欧洲实验动物学会；4、经济合作和发展组织；5、医学研究委员会高湿：80%-85%，动物将停止生长；高湿容易引起代谢紊乱；利于微生物滋生；氨易溶于水，湿度高，室内氨浓度增加。空气相对湿度（Relativeairhumidity）低湿：至40%，小鼠、大鼠和仓鼠繁殖力下降；低于30%停止繁殖，出现疾病症状，在大鼠会出现一种特殊的疾病---环尾病；此时，动物的上呼吸道承受干燥和刺激，可能会出现一系列临床症状；垫料可比正常情况下产生更多的灰尘，堵塞鼻孔；增加静电产生，泌乳动物在幼仔允吸时会有电击感，这会导致她们将幼子咬死。光照•光照时间对生殖的影响：•光照强度的影响•光波长的影响•时间比例、交换次数光照强度理想的情况是房间所有动物在笼具水平拥有相等的光照强度。大鼠、小鼠和家兔是夜行性动物，强光对它们是有害的。当笼具上下排列时，动物所受的光照强度会有很大差别。在笼架底部的动物能够找到阴影区域，而处于笼架顶端的动物只能挤在食槽底下避免过多的光照。光照强度照度超过60lux就可造成白化动物视网膜损伤。强光可使雄性大鼠肾上腺的重量增加，给小鼠超过500lux的光照，会导致哺乳母鼠忽视其新生幼仔和它们的死亡。相反，一些草食动物，例如，山羊如果没有阳光的照射，将会发生VitaminD3的缺乏。黑暗时即使短暂的曝光也对动物产生显著的影响。噪声（Noise）•噪声的来