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任星霖银杏外种皮研究现状银杏外种皮是其种实最外的皮层，即种子硬壳最外面的部分，成熟时呈黄色或黄棕色，柔软多汁，并有特殊的臭味。早在上个世纪八十年代，我国就有人对银杏外种皮进行了研究，近十几年的研究主要集中在以下三方面：对银杏外种皮中化学成分及其含量的研究对银杏外种皮提取物药理活性的研究对银杏外种皮中有效成分的提取分离及纯化的研究银杏萜内酯银杏萜内酯是属于萜类化合物，萜类化合物是一类广泛存在于自然界的天然产物，凡分子式符合（C5H8）n通式的衍生物统称为萜类化合物，实际上它是聚戊二烯类化合物，按照碳原子数目又可以分为单萜（碳原子数目：10），倍半萜（碳原子数目：15）二萜（碳原子数目：20），二倍半萜（碳原子数目：25），三萜（碳原子数目：30），四萜（碳原子数目：40）多萜（碳原子数目：7.5×103～3×105）。银杏萜内酯之前只在银杏叶和根皮中分离到，共有六种（GA,GB,GC,GM,GJ和BB，前五种的化学结构很相似：都属于二萜，均具有独特的十二碳骨架，嵌有一个叔丁基和六个五元环，其中有一个四氢呋喃环和三个内酯环。白果内酯属于倍半萜，有一个碳戊环和三个内酯环。银杏萜内酯有很强的药物活性，其作用主要表现在专属性的抗血小板活化因子（PFD）活性，其中GB的活性最高，已引起国际药学界的广泛关注，有望成为治疗休克、烧伤、过敏性哮喘、中风、移植排斥、血液透析等病症的一类新药。而BB则具有神经保护和抗水肿作用,有望成为治疗神经系统疾病、脑炎、脑水肿等病症的新药。银杏内酯（ginkgolide）和白果内酯(bilobalide)分子结构示意图银杏外种皮中萜内酯现已分离鉴定的银杏外种皮中的萜内酯只有三种，即银杏内酯A（GA），银杏内酯B（GB）和银杏内酯C（GC）。吴红菱在测外种皮中内酯含量时用使用了白果内酯作为标准品，且得出了与白果内酯保留值非常相近的色谱峰，他直接把他作为白果内酯（BB）来计算内酯的总含量。余碧钰等在研究银杏外种皮提取物时也直接用白果内酯作为标准品，并得出了与吴红菱相同的结果，这说明银杏外种皮中有可能含有白果内酯，但还需进一步的研究加以鉴定。银杏外种皮中萜内酯的提取•银杏内酯在银杏叶和外种皮中含量都很低，有的学者开始对银杏内酯的人工合成进行了研究，1988年Corey等成功的合成了银杏内酯A，1993年rimmins等研究了白果内酯的全合成途径并获得了成功。•但由于银杏萜内酯的分子立体结构复杂，人工合成途径的技术难度很大，因此，仍以天然的植物材料（银杏叶、外种皮，根皮或种仁）作为提取萜内酯化合物的主要来源。•有关银杏叶中的内酯的提取和分离法已有很多，且有的方法所得的产物中的萜内酯含量已达到7%，超过了国际上所规定的6%的标准，可见，有关银杏叶中萜内酯的提取纯化法已很成熟。•银杏外种皮较银杏叶比起来所含成分复杂，至今还未有银杏外种皮萜内酯完整的提取和纯化方法。•提取•对银杏外种皮中萜内酯的提取方法主要采用的是有机溶剂提取法。1、提取溶剂的考察：在提取溶剂的选择时首先考虑的是相似相溶原理，即极性物质易溶于极性有机溶剂中，非极性物质易溶于非极性溶剂中。银杏萜内酯从结构上来看都是属于高度含氧原子的萜类，再加上其独特的分子结构，使其表现出较强的分子极性。银杏内酯GA、GB、GC，GM和GJ的结构相似，差别在于羟基的个数和位置不同，由此产生了分子极性的差异，对于这五种银杏内酯和白果内酯的极性认识不一，一种认为白果内酯较银杏内酯少一个五元环，且有两个羟基，极性较大，内酯GB的极性则较小。而有人则认为银杏内酯J和C的极性最强；A，B较强；而白果内酯因属于倍半萜类，分子结构中只有一个戊烷环和三个内酯环，含有两个羟基团，与银杏内酯相比，白果内酯的分子极性较弱。TerisA.则认为GB是强极性的，而GA是弱极性的，所以，对于萜内酯的极性还需进一步的考察研究。用100%的水做提取剂时GC和BB的提取效果不佳，而在里面加入一定量的乙醇时提取效果很好。吴红菱17的提取方法为干燥、粉碎的银杏外种皮至醇-水（丙酮-水）溶剂中提取，在她的报道中并未有提取条件的限制，即有机溶剂与水的比例，提取温度，提取时间，提取次数等。楼凤昌的提取方法：银杏外种皮干燥、粉碎,称重,约4kg,以85%工业乙醇回流提取三次,每次3h，减压回收溶剂。得银杏外在种皮粗提物。2、提取温度和时间张立国等考察了银杏在不同溶剂和温度下的溶解性，结果表明：萜内酯在70℃下，溶剂强度在8.50处溶解度最大。至于提取次数可按溶剂用量和外种皮用量来调节，一般使用的提取料液比在1:4—1:12（g∕ml）之间，第一次的溶剂用量较后大，提取一般在三次为宜。但再如果增加提取次数是否提取效果会显著增加还需要进一步研究。3、提取方法的考察•现使用的有关银杏外种皮中有效成分的有机溶剂提取方法主要有热提法，索氏提取法，超声波提取法。•最近有有一种新的植物成分的提取法：超临界二氧化碳萃取法(supercriticalfluidextractionSFC），此法是近20年来迅速发展起来的一门高新分离技术,在银杏叶提取物中有人作过一些研究，但因其设备昂贵且对操作人员技要求高，所以在银杏提取物中并没有大量推广使用。所以综合考虑，有关银杏外种皮的萜内酯较好溶剂提取方法为：干燥粉碎的银杏外种皮，25%-60%乙醇-水溶液提取，提取温度60℃，提取次数3-4次，料液比为：第一次为1:12，第二次可为1:8或1:6，然后合并提取液，减压回收有机溶剂，得银杏外种皮粗提液。银杏外种皮乙醇-水溶液60℃提取3-4次提取液合并过滤滤液减压回收银杏外种皮粗提液纯化•因为银杏外种皮中所含的成分很复杂，在用有机溶剂做提取液时，其他的很多极性和弱极性的物质也被一起溶解在提取液中被提取出来，如黄酮类化合物，烷基酚类、烷基酸类、醇类等等，所以必须对所得的粗提液进行纯化，纯化的步骤一般分步：萃取和柱纯化。•萃取是初步纯化。粗提过程中使用的是较低浓度的乙醇溶液，所以外种皮中一些脂溶性物质也会溶解在提取溶剂中，其主要就是一些脂类物质，所以要先将脂类物质除去。石油醚是不错的选择。•对于银杏叶中的萜内酯的精制和纯化方法，郁青•等人做过全面的研究，发现乙酸乙酯是银杏•萜内酯的最好的萃取剂之一。1、萃取柱纯化现使用的主要是酸性氧化铝柱，大孔吸附树脂和聚酰胺柱。•目前只有李新岗25等用氧化铝柱处理了银杏叶的乙醇提取液，然后用无水乙醇洗脱，洗脱液浓缩即得产品，方法可将银杏总内酯的含量提高到95%以上，得率为4.2%，但是其白果内酯含量很低。•何君采用了酸性氧化铝纯化银杏萜内酯，其中的白果内酯损失很小，因为酸性氧化铝对黄酮和杂质的吸附好，对内酯吸附差，并且对白果内酯无损伤，吸附后的流出液即所需要的萜内酯。柱纯化大孔吸附柱是按其极性和填料的孔径大小对所纯化的物质进行选择性的吸附的方法，用于银杏萜内酯的纯化中主要有两种形式，一种是只吸附黄酮等杂质，而不吸附萜内酯的树脂，如DM-130型树脂和聚酰胺柱都是黄酮良好的吸附剂，聚酰胺柱与黄酮形成氢键吸附，在银杏叶和外种皮提取物中用来除去黄酮类物质是很好的选择。这种柱纯化的洗脱液经过浓缩即得产品。另一种是吸附萜内酯而对其他杂质成分吸附较弱的树脂。韩金玉等作了有关大孔吸附树脂对银杏内酯和白果内酯吸附性能的研究，结论是树脂AB-8对银杏萜内酯具有较大的吸附量，且解吸率大大高于其他树脂，具有良好的吸附性能。大孔吸附柱银杏外种皮所含的化学成分与银杏叶中有很大的不同，有关银杏外种皮提取物的萜内酯纯化还无人做过研究，是否叶的纯化方法适用于外种皮还需进一步的研究。而银杏叶的这种溶剂萃取-柱纯化法虽然得出的内酯含量很高但经过较多的纯化步骤萜内酯的损耗也很大，所以还应该简化步骤，寻求更为有效的柱填料，并根据填料选择毒小，洗脱能力强的洗脱液，取得银杏萜内酯的高得率。银杏外种皮中萜内酯的含量考察•在对银杏叶提取物或是其提取物制剂中的萜内酯的含量的测定方法多采用高效液相色谱法（HPLC）。但由于银杏萜内酯的紫外吸收差，且往往有其他物质的干扰，目前尚未见有前处理方便，通用，快速的含量测定法。•现已知的银杏外种皮中的萜内酯有三种（GA，GB，GC），吴红菱17在进行银杏外种皮中萜内酯的含量的测定的时候只用了GA、GB和BB作标品，测得的结论是银杏外种皮中含萜内酯1.3%；余碧玉等测量了银杏外种皮提取物中GA，GB，GC和BB的含量31，结论是含银杏萜内酯11.79%。而银杏外种皮中是否含有BB我们现在还不能肯定，是否还含有其他两种内酯或是我们没有发现的内酯成分，所以二者的测量结果是不肯定的。谢谢大家！3.6结构鉴定