SWT 1-2013 植物提取物 银杏叶提取物

国际商务标准SW/T1—2013SW中国医药保健品进出口商会发布2013-9-10发布2013-10-1实施植物提取物银杏叶提取物GinkgoleavesextractSW/T1—20131前言本标准由中国医药保健品进出口商会提出。本标准由中华人民共和国商务部归口。本标准由中国医药保健品进出口商会国际商务标准化技术委员会负责解释。本标准起草单位：浙江康恩贝制药股份有限公司。本标准主要起草人：王如伟、方玲、姚建标、叶剑锋、姚德中、苏一多、章江生、雷凯琴、胡江宁、何厚洪、吴旭明、吴健、乔洪翔。SW/T1—20132国际商务标准植物提取物银杏叶提取物1范围本标准规定了银杏叶提取物的技术要求、检验方法、检验规则和产品标志、包装、运输、贮存要求。本标准适用于以银杏叶为原料经提取分离制成的银杏叶提取物。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB9685食品容器、包装材料用添加剂使用卫生标准中华人民共和国药典（2010版）一部银杏叶提取物（鉴别）中华人民共和国药典（2010版）一部银杏叶提取物（含量测定）：总黄酮醇苷中华人民共和国药典（2010版）一部附录IXB铅、镉、砷、汞、铜测定法中华人民共和国药典（2010版）一部附录IXE重金属检查法中华人民共和国药典（2010版）一部附录IXJ炽灼残渣检查法中华人民共和国药典（2010版）二部附录ⅪB粒度测定法第二法中华人民共和国药典（2010版）一部附录XIIIC微生物限度检查法中华人民共和国药典（2010版）一部附录IXH水分测定法第一法美国药典（USP36-NF31）银杏叶提取物（IDENTIFICATION）：B.HPLC3名称、结构式、分子式和相对分子质量银杏叶提取物由多个有效成分组成，其名称、结构式、分子式、相对分子质量见表1。表1银杏叶提取物组分名称、结构式特、分子式及相对分子质量组分名称结构式分子式相对分子质量白果内酯（Bilobalide）C15H18O326.308银杏内酯A(GinkgolideA)C20H24O408.409SW/T1—20133银杏内酯B(GinkgolideB)C20H24O424.4010银杏内酯C(GinkgolideC)C20H24O440.4011槲皮素（Quercetin）C15H10O302.237山奈酚（Kaempferol）C15H10O286.236异鼠李素（Isorhamnetin）C16H12O316.2674技术要求4.1工艺要求4.1.1植物原料为银杏科银杏属植物银杏（GinkgobilobaL.）的干燥叶，每年6－10月采摘，除去杂质，经快速干燥而成。4.1.2工艺过程用乙醇和水一定比例混合溶液提取，浓缩，稀释，沉淀，经大孔吸附树脂吸附、洗脱，洗脱液回收乙醇，干燥，粉碎，过80目筛，即得。4.2产品要求4.2.1感官要求：应符合表2规定。SW/T1—20134表2感官要求项目要求检查方法色泽浅棕黄色至棕褐色启开试样后，立即嗅其气和尝其味；另取试样适量置于白色瓷盘中观察其色泽、外观，并检查有无异物气味气微，味微苦外观均匀，无可见异物的粉末4.2.2理化指标：应符合表3规定。表3理化指标项目指标鉴别（1）、（2）应符合规定指标成分含量总黄酮醇苷含量，%≥24.0总萜类内酯含量，%≥6.0黄酮苷元峰面积比槲皮素峰面积/山奈酚峰面积≥0.7异鼠李素峰面积/槲皮素峰面积≥0.1芦丁含量，%≤4.0游离槲皮素含量，%≤0.5游离山奈酚含量，%≤0.5游离异鼠李素含量，%≤0.2总银杏酸含量（以白果新酸计），mg/kg≤5.0粒度（80目筛通过率），%≥95水分，%≤5.0炽灼残渣，%≤0.8重金属（以Pb计），mg/kg≤10铅（Pb），mg/kg≤1.0镉（Cd），mg/kg≤0.3砷（As），mg/kg≤1.0汞（Hg），mg/kg≤0.14.2.3微生物要求：应符合表4的规定表4微生物要求项目指标检验方法细菌总数，cfu/g≤1000中华人民共和国药典（2010版）一部附录XIIIC霉菌及酵母菌数，cfu/g≤100大肠埃希菌不得检出4.2.4其他污染物其他污染物限量要求，依据不同用途，应符合我国相关法规的规定。对于出口产品，应符合出口目的国相关法规的规定。5检验方法SW/T1—201355.1感官检验：启开试样后，立即嗅其气和尝其味；另取试样适量置于白色瓷盘中观察其色泽、外观，并检查有无异物。5.2理化检验5.2.1鉴别试验（1）、鉴别试验（2）按中华人民共和国药典（2010版）一部银杏叶提取物（鉴别）规定的方法进行测定。5.2.2指标成分含量5.2.2.1总黄酮醇苷含量按中华人民共和国药典（2010版）一部银杏叶提取物（含量测定）：总黄酮醇苷规定的方法进行测定。5.2.2.2总萜类内酯含量按附录A中A2规定的检验方法进行测定。5.2.3黄酮苷元峰面积比按美国药典（USP36-NF31）银杏叶提取物（IDENTIFICATION）：B.HPLC关于黄酮苷元峰面积比规定的方法进行测定。5.2.4芦丁含量按附录A中A3规定的方法进行测定。5.2.5游离槲皮素、游离山奈酚、游离异鼠李素含量按附录A中A4规定的方法进行测定。5.2.6总银杏酸限量按附录A5规定的检查方法进行测定。5.2.7粒度按中华人民共和国药典（2010版）二部附录ⅪB第二法进行测定。5.2.8水分按中华人民共和国药典（2010版）一部附录IXH水分测定法第一法进行测定。称样量2.000g，干燥温度105℃±0.5℃。SW/T1—201365.2.9炽灼残渣按中华人民共和国药典（2010版）一部附录IXJ炽灼残渣检查法进行测定，称样量1.000g，炽灼温度600℃±25℃。5.2.10重金属（以Pb计）按中华人民共和国药典（2010版）一部附录IXE重金属检查法进行测定。5.2.11铅按中华人民共和国药典（2010年版）一部附录IXB铅、镉、砷、汞、铜测定法进行测定。5.2.12镉按中华人民共和国药典（2010年版）一部附录IXB铅、镉、砷、汞、铜测定法进行测定。5.2.13砷按中华人民共和国药典（2010年版）一部附录IXB铅、镉、砷、汞、铜测定法进行测定。5.2.14汞按中华人民共和国药典（2010年版）一部附录IXB铅、镉、砷、汞、铜测定法进行测定。5.3微生物检验：按中华人民共和国药典（2010版）一部附录XIIIC微生物限度检查法进行测定。6包装、标签、运输、贮存6.1包装包装材料应符合GB9685食品容器、包装材料用添加剂使用卫生标准的要求。6.2标签6.2.1包装标志上应标注：银杏叶提取物、批号、规格、净重、毛重、产地、生产日期、保质期、贮存条件等内容。6.2.2外包装箱体上应标有：防潮、防晒、勿重压、朝上（朝下）等字样或标志。标志内容清晰可见，标志应粘贴牢固。6.3运输6.3.1运输工具应清洁、卫生，不得与有毒、有害、有腐蚀性或有异味的物品混装混运。SW/T1—201376.3.2搬运时应轻装轻卸，运输时防止挤压、曝晒、雨淋。6.4贮存6.4.1产品不得与有毒、有害、有腐蚀性或有异味的物品混合存放。6.4.2产品应贮存于阴凉、干燥的仓库中。6.5保质期在符合规定的贮运条件、包装完整、未经开启封口的情况下，保质期不超过24个月。SW/T1—20138附录A（规范性附录）检验方法A1一般规定本标准所用试剂和水，在没有注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T6682规定的三级水。实验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液。A2总萜类内酯含量的测定方法A2.1方法提要本品用甲醇溶解后，经酸性氧化铝柱纯化，采用高效液相色谱法（蒸发光散射检测器）测定，标准曲线法对数方程定量，分别计算白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C的百分含量，将各组分的百分含量累加计算总萜类内酯的百分含量。A2.2仪器和用具A2.2.1分析天平：感量0.01mg。A2.2.2高效液相色谱仪（附蒸发光散射检测器）。A2.2.3超声波清洗器。A2.3试剂和耗材A2.3.1甲醇，色谱纯。A2.3.2层析柱（装有100～200目酸性氧化铝3g，柱径0.8～1.0cm，使用前加10mL甲醇活化处理；或Merck硅藻土SPE固相萃取柱）。A2.3.30.45μm微孔滤膜（有机相）。A2.3.4标准对照品白果内酯对照品：CAS号33570-04-6，纯度≥90%；银杏内酯A对照品：CAS号15291-75-5，纯度≥90%；银杏内酯B对照品：CAS号15291-77-7，纯度≥90%；银杏内酯C对照品：CAS号15291-76-6，纯度≥90%（均购自中国食品药品检定研究院）。A2.4色谱条件及系统适用性A2.4.1色谱条件a)色谱柱：AgilentXDBC18Time(min)250×4.6mm5μm；b)流动相：流动相A：甲醇；流动相B：水。梯度洗脱程序见下表A1。表A1梯度洗脱程序A(%)B(%)SW/T1—201390→3525→4875→5235→3648→10052→036→451000c)检测器：蒸发光散射检测器d)柱温：25℃；e)流速：1.0mL/min。A2.4.2系统适用性理论塔板数以白果内酯峰计算应不低于2500。A2.5操作方法A2.5.1对照品溶液的制备称取白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C对照品适量（精确至0.01mg），加入甲醇溶解，制备得每1mL含白果内酯2.4mg、银杏内酯A1.6mg、银杏内酯B0.8mg、银杏内酯C0.8mg的混合对照品甲醇溶液。再分别稀释2倍、4倍、8倍、16倍，制备得到5份已知浓度的混合对照品溶液，浓度系列见表A2。标准使用溶液用0.45μm微孔滤膜过滤后待测。表A2各组分标准系列浓度组分标准系列浓度mg/mLS1S2S3S4S5白果内酯2.401.200.600.300.15银杏内酯A1.600.800.400.200.10银杏内酯B0.800.400.200.100.05银杏内酯C0.800.400.200.100.05A2.5.2供试品溶液的制备称取试样150mg（精确至0.1mg），加入甲醇5mL溶解，酸性氧化铝层析柱（A2.3.2）上样，用甲醇50mL洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇2mL溶解，移入A2.5.3测定方法5mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，用0.45μm微孔滤膜过滤，待测。依次吸取空白溶液、对照品溶液、供试品溶液10μL，注入高效液相色谱仪进行测定，分别以对照品浓度的对数值和峰面积的对数值绘制标准曲线或求得一元线性回归方程。A2.6结果计算供试品中各萜类内酯组分含量以质量分数Xi%100`Xi××=miVcii计，数值以%表示，按公式（A1）计算，分别计算白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C的百分含量。将各组分的百分含量累加计算总萜类内酯的百分含量，按公式（A2）计算。………………………………（A1）`∑=i1XX………………………………（A2）SW/T1—201310式中：X1——供试品中总萜类内酯的质量分数，%；Xi——某萜类内酯组分含量，%；ci——从标准曲线中求得的供试品溶液中某组分含量，单位为毫克每毫升（mg/mL）；Vi——供试品溶液总体积，单位为毫升（mL）；miA3.1方法提要——供试品质量，单位为毫克（mg）。A3芦丁含量的测定方法本品经甲醇溶解后，采用反相高效液相色谱法测定，以外标法测定芦丁含量。A3.2仪器和用具A3.2.1分析天平：感量0.01mg。A3.2.2高效液相色谱仪（附紫外检测器）。A3.23超声波清洗器。A3.3试剂和耗材A3.3.1甲醇，色谱纯。A3.3.2磷酸。A3.3.30.45μm微孔滤膜（有机相）。A3.3.4芦丁对照品：CAS号153-18-4，纯度≥90%（购自中国食品药品检定研究院）。A3.4色谱条件及