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书书书犐犆犛７９．０２０犆犆犛犅７１中华人民共和国林业行业标准犔犢／犜３２７８—２０２１竹木材料及其制品表面防霉变效果评价环境试验箱法犈狏犪犾狌犪狋犻狀犵狋犺犲狉犲狊犻狊狋犪狀犮犲狅犳犫犪犿犫狅狅／狑狅狅犱狆狉狅犱狌犮狋狊狌狉犳犪犮犲狊狋狅犿狅犾犱犵狉狅狑狋犺—犈狀狏犻狉狅狀犿犲狀狋犪犾犮犺犪犿犫犲狉狋犲狊狋犻狀犵犿犲狋犺狅犱２０２１０６３０发布２０２２０１０１实施国家林业和草原局发布书书书中华人民共和国林业行业标准竹木材料及其制品表面防霉变效果评价环境试验箱法ＬＹ／Ｔ３２７８—２０２１中国标准出版社出版发行北京市朝阳区和平里西街甲２号（１０００２９）北京市西城区三里河北街１６号（１０００４５）网址ｗｗｗ．ｓｐｃ．ｎｅｔ．ｃｎ总编室：（０１０）６８５３３５３３ 发行中心：（０１０）５１７８０２３８读者服务部：（０１０）６８５２３９４６中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷各地新华书店经销开本８８０×１２３０１／１６ 印张０．７５ 字数２２千字２０２２年３月第一版 ２０２２年３月第一次印刷书号：１５５０６６·２３６４０２ 定价２０．００元如有印装差错 由本社发行中心调换版权专有 侵权必究举报电话：（０１０）６８５１０１０７书书书前 言 本文件按照ＧＢ／Ｔ１．１—２０２０《标准化工作导则 第１部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由全国竹藤标准化技术委员会（ＳＡＣ／ＴＣ２６３）提出并归口。本文件起草单位：广东省林业科学研究院、国际竹藤中心、仁化县奥达胶合板有限公司、广东省质量监督林产品检验站、国家林业和草原局林产品质量检验检测中心（广州）、浙江农林大学。本文件主要起草人：何雪香、马红霞、覃道春、孙芳利、张燕君、陈利芳、谢桂军、刘杏娥、曹永建、王剑菁、陆方、李兴伟、潘金闪。Ⅰ犔犢／犜３２７８—２０２１竹木材料及其制品表面防霉变效果评价环境试验箱法１ 范围本文件规定了环境试验箱法测定竹木材料及其制品表面防霉变效果及评价方法。本文件适用于室内用竹木材料及其制品防霉变性能检验评价，也可用于竹木材用防霉剂的防霉效果评价。２ 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。ＧＢ／Ｔ６６８２ 分析实验室用水规格和试验方法ＧＢ／Ｔ１４０１９—２００９ 木材防腐术语ＧＢ／Ｔ１８２６１—２０１３ 防霉剂对木材霉菌及变色菌防治效力的试验方法３ 术语和定义ＧＢ／Ｔ１４０１９—２００９界定的术语和定义适用于本文件。４ 仪器和设备４．１ 霉菌培养实验室主要仪器设备４．１．１ 蒸汽高压灭菌锅，最高设计温度１３８℃，最高设计压力０．２５ＭＰａ。４．１．２ 超净工作台，洁净等级不低于１００级。４．１．３ 霉菌培养箱，温度范围０℃～６５℃，相对湿度范围６０％～９０％。４．１．４ 天平，精确到０．０１ｇ。４．１．５ 培养皿，直径９０ｍｍ。４．１．６ 直口三角瓶，５００ｍＬ。４．１．７ 烧杯，５００ｍＬ。４．１．８ 酒精灯、镊子等。４．２ 霉菌接种孢子悬浮液制备主要仪器设备４．２．１ 实验室用组织捣碎机，１Ｌ。４．２．２ 手持式喷雾器，５００ｍＬ。４．２．３ 脱脂棉纱布，型号（２８×２８）ｔｅｘ，（１１８×１１０）根。１犔犢／犜３２７８—２０２１４．３ 环境试验箱环境试验箱由箱盖、箱体、试件架、土壤托盘、加热及气流微循环装置等组成，详见附录Ａ。５ 试验材料５．１ 辅助材料与试剂５．１．１ 分散剂吐温８０或犜狉犻狋狅狀犡１００用于制备接种用霉菌孢子悬浮液。５．１．２ 环氧树脂用于密封防霉试件切口等未处理部分。５．１．３ 水符合ＧＢ／Ｔ６６８２中三级水要求。５．２ 试样要求及试件制备５．２．１ 试样要求试样应无缺陷，无霉变、腐朽或虫蛀。木材对照样选用马尾松（犘犻狀狌狊犿犪狊狊狅狀犻犪狀犪Ｌａｍｂ．）边材等易霉变的松树类木材；竹材对照样选用３年～５年生精刨毛竹条［犘犺狔犾犾狅狊狋犪犮犺狔狊犲犱狌犾犻狊（Ｃａｒｒｉèｒｅ）Ｊ．Ｈｏｕｚｅａｕ］。５．２．２ 试件制备木材试件尺寸为１００ｍｍ（顺纹）×７５ｍｍ×１２ｍｍ，竹材试件尺寸为１００ｍｍ（顺纹）×７５ｍｍ×厚度，其他材料制品尺寸为１００ｍｍ×７５ｍｍ×厚度。每一试验条件至少６个重复试件。从防霉处理试样上锯制试件，应用环氧树脂对切口进行密封，晾干后进行测试。６ 试件防霉处理步骤６．１ 试件称重，根据防霉剂使用要求对试件进行处理。６．２ 试件处理完毕后，用吸水纸吸去表面多余药剂，立即称重，根据ＧＢ／Ｔ１８２６１—２０１３中４．４．２计算试件吸药量。６．３ 处理试件置于洁净、通风良好处自然晾干。如使用的防霉剂有特殊要求，则应根据防霉剂使用要求进行干燥。６．４ 对于新开发的防霉剂产品，至少设置３个吸药量梯度。６．５ 若同组处理测试试件吸药量相对于平均吸药量偏差超过１５％，则应剔除。７ 霉菌接种菌种准备７．１ 供试霉菌种类７．１．１ 变色菌———可可球二孢（犅狅狋狉狔狅犱犻狆犾狅犱犻犪狋犺犲狅犫狉狅犿犪犲Ｐａｔ．）；２犔犢／犜３２７８—２０２１———串珠镰刀菌（犉狌狊犪狉犻狌犿犿狅狀犻犾犻犳狅犿犲Ｓｈｅｌｄｏｎ）；———链格孢霉［犃犾狋犲狉狀犪狉犻犪犪犾狋犲狉狀犪狋犲（Ｆｒｉｅｓ）Ｋｅｉｓｓｌ］，异名细交链格孢（犃．犱犲狀狌犻狊Ｎｅｅｓ）。７．１．２ 霉菌———黑曲霉（犃狊狆犲狉犵犻犾犾狌狊狀犻犵犲狉Ｖ．Ｔｉｅｇｈ）；———桔青霉（犘犲狀犻犮犻犾犾犻狌犿犮犻狋狉犻狀狌犿Ｔｈｏｍ）；———绿色木霉（犜狉犻犮犺狅犱犲狉犿犪狏犻狉犻犱犲Ｐｅｒｓ．ｅｘＦｒ．）；———黄曲霉（犃狊狆犲狉犵犻犾犾狌狊犳犾犪狏狌狊ＬＫ．）；———出芽短梗霉［犃狌狉犲狅犫犪狊犻犱犻狌犿狆狌犾犾狌犾犪狀狊（ｄｅＢａｒｙ）Ａｒｎ．］；———球毛壳菌（犆犺犪犲狋犲犿犻狌犿犵犾狅犫狅狊狌犿狊Ｋｕｎｚｅｅｘ．Ｆｒ．）。７．１．３ 菌种规定７．１．３．１ 允许选择同属不同种的变色菌和霉菌菌株作为供试菌种。７．１．３．２ 测试时，应使用包括至少１种变色菌和至少３种霉菌的混合菌体接种；如测试对象为防霉剂的防霉效果，应采用以上９个菌种的混合菌体接种。其中，竹材及其制品必须包括黄曲霉、链格孢霉和串珠镰刀菌；人造板必须包括黄曲霉。除上述规定菌种外，也可采用客户指定的特定霉菌菌种。７．２ 培养基制备７．２．１ 马铃薯葡萄糖琼脂培养基（犘犇犃）配制取去皮马铃薯２００．０ｇ，切成小块，加水１０００ｍＬ，煮沸３０ｍｉｎ后滤去马铃薯块，加入葡萄糖２０．０ｇ、蛋白胨０．５ｇ、硫酸镁０．３ｇ、磷酸氢二钾０．５ｇ、琼脂２５．０ｇ，加热溶化，将滤液用水补足至１０００ｍＬ。７．２．２ 麦芽糖琼脂培养基配制将１０００ｍＬ水在水浴锅中加热至５０℃～６０℃，陆续加入麦芽提取粉１５．０ｇ、琼脂粉２５．０ｇ，一边加入一边搅拌。加热直至琼脂完全溶解。７．２．３ 培养基消毒将培养基置于蒸汽灭菌锅中灭菌，压力０．１ＭＰａ，温度１２１℃，灭菌４０ｍｉｎ。７．２．４ 培养基分装灭菌后的培养基倒入已灭菌的培养皿中，制成培养基平板备用。７．３ 供试菌种培养在无菌条件下，将供试菌种接种在平板培养基上，然后置于霉菌培养箱中保持温度（２８±１）℃、相对湿度７５％～８５％，培养１４ｄ～２０ｄ备用。每种供试菌种不少于６个培养皿。７．４ 霉菌孢子悬浮液的制备在培养皿中加入１０ｍＬ水，滴入２滴吐温８０或ＴｒｉｔｏｎＸ１００，用玻璃棒或软毛笔将新鲜霉菌孢子刮下，将孢子液倒入烧杯中；用１０ｍＬ水冲洗培养皿中菌体表面，将冲洗液与孢子液混合，倒入组织捣碎机捣碎、搅拌，单层纱布过滤；用水定容至１０００ｍＬ，制成孢子悬浮液。孢子悬浮液需在接种当天制备，以保持菌种的新鲜。３犔犢／犜３２７８—２０２１８ 环境试验箱暴露测试８．１ 环境条件及环境试验箱温度环境试验箱测试温度（２５±１）℃，相对湿度９５％以上；环境试验箱置于（２０±１）℃环境中。环境温度比环境试验箱测试温度低５℃左右。８．２ 试验步骤８．２．１ 试验箱开启箱体内加入水，浸没加热棒和水泵，高度约８０ｍｍ；将装有土壤的托盘放入箱体，距水面２５ｍｍ以上；试件架上悬挂一个热电偶温度计，监测箱体内温度；运行加热棒和水泵，使环境试验箱内温度达到测试要求温度。其中土壤为园林盆栽土壤，含至少２５％的泥炭土和１０％的蛭石，ｐＨ５．５～７．６。土壤在１２０℃条件下烘至绝干，将水用手持式喷雾器喷洒在土壤上，使其持水量保持为１００％。８．２．２ 环境试验箱中土壤接种箱体内温度达到测试温度２４ｈ后对土壤进行接种。将新鲜霉菌孢子悬浮液用手持式喷雾器均匀喷洒在土壤上，以不流水为宜。开启微循环风扇。８．２．３ 试件表面接种及放置土壤接种２周后，将新鲜霉菌孢子悬浮液用喷雾器均匀喷洒在试件表面，以试件表面不滴水为宜。试件接种完毕后，立即随机悬挂在试验箱里的试件架上。试件底部距离土壤表层７５ｍｍ，相邻试件间隔至少２０ｍｍ，最外围试件与箱体内壁间隔至少５０ｍｍ。８．２．４ 霉菌活性检验按７．２制备３个霉菌培养基平板，不加盖子，随机放置在试件架不同位置。放置１ｈ后，把平板移出试验箱，盖好盖子，放在温度（２８±１）℃、相对湿度７５％～８５％的霉菌培养箱中。３ｄ后检查培养基平板上霉菌生长情况。如果霉菌覆盖整个平板，并且菌落比较茂密，说明霉菌活性较强；否则，应按８．２．２和８．２．３给土壤和试件重新接种新鲜霉菌孢子。９ 测试结果评价９．１ 试件霉菌生长评价试件测试周期为８周。测试期间分别在第２周、第４周、第６周和第８周定期检查试件表面霉菌生长情况。从试验箱取出试件后，通过肉眼判断每块试件表面上霉菌的生长范围（感染面积）和强度（疏密程度），并根据表１划分试件霉菌生长等级，记录霉菌生长特征。４犔犢／犜３２７８—２０２１表１ 试样表面霉菌生长分级表分级值霉菌生长描述霉菌生长情况０未长肉眼观察未见霉菌生长１痕迹生长试件表面霉菌生长稀疏，感染面积犛＜１０％２轻微生长试样表面霉菌生长稀疏，３０％＞感染面积犛≥１０％３中度生长试样表面霉菌生长稀疏，７０％＞感染面积犛≥３０％４严重生长试样表面霉菌生长稀疏，１００％＞感染面积犛≥７０％５极严重生长试样表面霉菌感染面积达到１００％；或霉菌感染面积未达到１００％，但霉菌生长茂密９．２ 测试结果的有效性未处理对照试件在测试第４周后，应达到霉菌生长等级３以上。１０ 试验报告见附录Ｂ。５犔犢／犜３２７８—２０２１附 录 犃（资料性）环境试验箱结构示意图及构成部件说明犃．１ 环境试验箱结构示意图环境试验箱结构示意图见图Ａ．１。 标引序号说明：１———箱盖；２———试件架；３———试件；４———土壤托盘；５———微型循环风扇；６———箱体；７———水；８———循环水泵；９———加热装置；１０———控温元件。图犃．１ 环境试验箱结构示意图６犔犢／犜３２７８—２０２１犃．２ 环境试验箱构成部件说明犃．２．１ 箱盖和箱体二者材质均为有机玻璃等惰性材料。箱盖为斜屋顶状，倾斜角度约３５°。箱体用于安装试验架、土壤托盘、加热及气流微循环装置等部件。箱体尺寸为７００ｍｍ（长）×５００ｍｍ（宽）×４４０ｍｍ（高），或７８０ｍｍ（长）×５７５ｍｍ（宽）×４８０ｍｍ（高）。采用适当紧固、密封措施使箱盖与箱体直接紧密相连，形成密闭的内部测试环境。犃．２．２ 试件架试件架直径为５０ｍｍ，材质为有机玻璃等惰性材料，试验架之间间隔约５０ｍｍ。犃．２．３ 试件将打孔试件用不锈钢丝钩悬挂在试件架的有机玻璃棒上。犃．２．４ 土壤托盘由不锈钢托架和塑料筐组成。不锈钢托架长度和宽度小于箱体５０ｍｍ以上，高度约为１００ｍｍ，顶部为网状；塑料筐放在托架上，长度尺寸比托架尺寸至少小１００ｍｍ，底部垫一层３０目塑料纱网放置土壤基质，厚度约５０ｍｍ。犃．２．５ 微型循环风扇微型循环风扇为ＩＰ５５或ＩＰ６８防水等级；直流电压５Ｖ～１２Ｖ；风量约０．８ｍ３／ｓ，风速约８０００ｒ／ｍｉｎ。犃．２．６ 水符合ＧＢ／Ｔ６６８２中三级水要求。犃．２．７ 加热装置包括水族箱用加热棒和控温