第三篇细菌学各论第一章球菌(2)第一节葡萄球菌属第二节链球菌属第二章革兰氏阴要性杆菌(6+0.5)第一节肠杆菌科第二节巴氏杆菌科第三节布氏杆菌属第四节伯氏菌属(自学)第五节波氏菌属(自学)第三章G+杆菌(2+0.5)第一节芽胞杆菌属第二节丹毒杆菌属第三节分枝杆菌属第三节李氏杆菌属(自学)第四节梭菌属第一章球菌第一节葡萄球菌一、形态染色G+球菌、葡萄串状;无鞭毛、无芽孢、有些有荚膜。需氧或兼性厌氧。普通培养基上生长良好,菌落圆形、光滑、湿润、边缘整齐、中等大。产生脂溶性色素。葡萄球菌染色图,G+葡萄球菌电镜扫描图葡萄球菌电镜扫描图二、分类微球菌科葡萄球菌属。色素:金色、白色、柠檬色葡萄球菌。理化:金色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌。三、金色葡萄球菌(一)致病性化脓性葡萄球菌病、禽兔葡萄球菌病、牛羊乳房炎、人畜食物中毒。家兔易感。(二)形态染色G+、固体培养基上形成葡萄串状;脓汁、乳汁、液体培养基中常呈双球或链状,常误为链球菌;比其他葡萄球菌小。鸭葡萄球菌性化脓鸭葡萄球菌侵入门户(三)培养特征需氧或兼性厌氧,普通培养基生长良好。22OC有氧环境产金黄色色素能力强。20~30%二氧化碳中产生色素多。厌氧培养不产生色素。血平板上菌落较大,明显溶血。却甫曼培养基(7.5%氯化钠),40%胆汁中能生长。(四)主要生化:甘露醇+、凝血浆酶+、硝酸盐+。(五)抗原性细胞壁水解后,有一种蛋白质抗原称蛋白A,简称SPA。SPA能与抗体FC段结合,而不影响FAB段与抗原结合,免疫学上有重要作用。(六)抵抗力较强,无芽孢杆菌中最强者。(七)微生物学诊断1、取材:脓、乳、分泌物等2、镜检:G+、葡萄状球菌。3、分离培养:血平板:溶血。却甫曼培养基(7.5%氯化钠、1%甘露醇):可抑制不耐盐杂菌生长,且因金葡菌分解甘露醇产酸,PH下降,指示剂作用下菌落呈黄色。4、生化鉴定:甘露醇+,凝血浆酶+、硝酸盐+。5、动物实验:24-48h致死家兔。6、肠毒素测定:分离菌株30%CO2培养,灌服家兔,表现胃肠炎。(八)免疫:患病动物康复无明显免疫力。第二节链球菌链球菌科链球菌属细菌。一、形态染色G+、链状排列的球菌,链越长毒性越大。无芽孢,多数无鞭毛(除D群某些菌株),少数菌株能形成荚膜。链球菌图链球菌实图链球菌电镜扫描图二、培养特征兼性厌氧。培养要求较高,加入血或血清才能生长良好,形成针尖大闪光菌落。液体培养基中先轻度浑浊,后底部浑浊,上部清亮。血平板上可形成α、β、γ三型溶血,分为甲、乙、丙型链球菌。乙型链球菌致病力最强,甲型较弱,丙型一般不致病。1、α溶血:又称绿色溶血环,平板上菌落周围呈现狭窄绿色溶血环。因这种链球菌毒性较弱,产生溶血素少,只溶解部分红细胞,低倍镜下可见溶血环中还存在未被溶解的红细胞。绿色物质是红细胞分解后的高铁血红素的氧化产物。2、β溶血:菌落周围比较大而透明的溶血环。因这种链球菌毒性强,产生溶血素多,对红细胞分解彻底。3、γ溶血:不溶血称γ溶血。β溶血三、病原性链球菌(一)马链球菌马亚种(马腺疫链球菌)主要引起幼驹马腺疫。脓汁中链长达数十,甚至数百个。无芽孢,能产荚膜,溶血,分类属C群。脓汁中抵抗力较强,但对热敏感。猫最易感,小鼠次之。患病幼驹康复可获得坚强免疫力。(二)乳房炎链球菌引起牛羊乳房炎,包括无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌。均不形成荚膜。无乳链球菌链最长,毒性最大。牛羊链球菌性乳房炎中,90%由无乳链球菌引起,可产生β或α溶血。三种乳房炎链球菌的区别:三种乳房炎链球菌区别CAMP实验:血平板上先划一条金葡线、再垂直划线乳汁、分离菌,原来溶血不明显或不溶血的无乳链球菌,在金葡产物作用下,呈明显β溶血,以此区别停乳链球菌及其他链球菌。康复牛羊不产生明显的免疫力。溶血性40%胆汁山梨醇CAMP血清群无乳链球菌β+-+B停乳链球菌--+/--C乳房链球菌----未定(三)马链球菌兽疫亚种(兽疫链球菌)引起各种畜禽败血症,如猪、马、牛、禽败血性链球菌病。均能形成明显的荚膜,组织中常呈有荚膜的双球菌或短链,营养丰富的培养基上形成长链。β溶血,属于C群。家兔和小白鼠易感。康复后可获得一定免疫力。鸡血液中兽疫链球菌(四)猪链球菌有35个血清型。猪链球菌1型为S群,2型为R群。2型可致人类脑膜炎、败血症、心内膜炎,有致死性,是人畜共患病。引起猪急性败血症。在组织中呈单个、双球或短链存在。常见到荚膜。液体培养基中形成链状。对热抵抗力较弱。家兔、小白鼠敏感。用铝胶甲醛苗,明矾结晶紫苗,保护率达80%以上。第二章革兰氏阴性杆菌第一节肠道杆菌科一、肠道杆菌科共同特征(1)寄生于人畜肠道。(2)科内28个属,重要的有埃希氏菌属、沙门氏菌属、志贺氏菌属、耶新氏菌属。(3)G-中等大杆菌,无芽孢。(4)需氧或兼性厌氧,普通培养基上生长良好。能在0.5%胆盐培养基上生长。二、埃希氏菌属5个种,重要的是大肠埃希氏菌,简称大肠杆菌。(一)形态染色:G-中等大杆菌,无芽孢,周鞭毛,有些菌株在组织中形成荚膜,可发生H-O变异。(二)培养特征:普通培养基上形成中等大小、半透明菌落。在麦康凯、远腾氏、SS等鉴别培养基上形成较大的粉红色菌落,科内其他属的细菌(除肠杆菌属,克雷伯氏属外)菌落呈淡黄色。(三)生化特征肠杆菌科生化鉴别表葡萄糖乳糖蔗糖MRVPIC尿素硫化氢半固体埃希氏菌属⊕⊕⊕+-+--肠杆菌属⊕⊕⊕-+-++克雷伯氏属⊕⊕⊕-+-+-沙门氏菌属⊕--+--+-+变形杆菌属⊕-+志贺氏菌属+--耶新氏菌属+-+大肠杆菌,G-大肠杆菌(四)抗原构造及血清型1、O抗原:菌体抗原,实质是菌体毒素,耐热性。注射于兔体可产生抗O血清。已发现173种。一种大肠杆菌只有一种O抗原。2、K抗原:表面抗原,存在于菌体的荚膜、被膜或表面。已发现80种K抗原,根据K抗原的热敏感性不同分为L、A、B型,每个菌体有0~3种K抗原。含K抗原的菌株,不能被抗O血清所凝集,称为O不凝集性。3、H抗原:鞭毛抗原。为蛋白质,已发现56种。一种大肠杆菌只有一种H抗原。大肠杆菌抗原式,如O111;K58(B):H12(五)抵抗力:中等强度。(六)致病性有些血清型致病,有些不致病。不同血清型可引起同一畜禽的一种病;不同畜禽可由同一血清型致病。仔猪黄白痢、仔猪水肿病。大肠杆菌性下痢(家禽、犊牛、羔羊、幼兔、婴儿)。鸭大肠杆菌生殖器官疾病。禽大肠杆菌卵黄性腹膜炎。鸡大肠杆菌卵黄性腹膜炎(六)变异通过转化、转导、结合传递进行变异。1、S-R变异:光滑型菌落—粗糙型菌落。2、H-O变异:有鞭毛—无鞭毛。3、耐药性变异:(七)微生物学诊断1、取材:肠内容物、血等。2、鉴别培养:麦康凯、远藤氏等鉴别培养基划线,形成粉红色菌落。3、染色镜检:G-中等大、无芽孢杆菌。4、生化鉴定5、血清型鉴定:用抗O、抗OK血清作凝集实验确定血清型。(八)免疫防治母源抗体对幼畜禽有一定保护力。病畜禽康复可获得一定程度免疫力。一种血清型大肠杆菌只产生对此血清型的保护抗体。因血清型较多,从本场本地区分离大肠杆菌制成疫苗,可获得较好免疫保护。三、沙门氏菌属(一)形态染色:G-中等大杆菌。除鸡白痢、鸡伤寒沙门氏菌外,均有周鞭毛。绝大多数有菌毛,能吸附于细胞表面和凝集红细胞。形态难与大肠杆菌区别。(二)培养特性:除鸡白痢、鸡伤寒、甲型副伤寒、羊流产沙门氏菌对营养要求较高外,其余在普通培养基上生长良好。鉴别培养基(麦康凯、远藤氏、SS)上形成淡黄色菌落。(三)生化特性;见大肠杆菌。(四)抵抗力:中等强度。沙门氏杆菌马流产沙门氏菌(五)抗原构造及抗原式1、O抗原:菌体抗原。已发现58种,用阿拉伯数字表示。一种沙门氏菌可有几种O抗原,将具有某一共同O抗原的菌株归为一组,如含O2的为A组,共分为50个组,对畜禽致病的绝大多数在A-F组。2、H抗原:鞭毛抗原,63种。第一相为部份菌株特有,称特异相,用小写英文字母表示;第二相为许多沙门氏菌共有,称非特异相,用阿拉伯数字表示,少数用英文数字表示。3、Vi抗原:某些菌株O抗原之外包裹的表面抗原。根据沙门氏菌的抗原构造,每种沙门氏菌都可以测定其抗原式,又称血清型。如测得某菌抗原式为:1,4,12:i:1,2,表示该菌含O抗原1,4,12,H抗原第一相为i,第二相为1,2,该菌为鼠伤寒沙门氏菌。(六)致病性均有致病性,人畜共患。引起人畜肠炎、下痢、人食物中毒。1、马流产沙门氏菌:马流产。2、牛流产沙门氏菌:牛流产。3、羊流产沙门氏菌:羊流产。4、猪伤寒沙门氏菌:仔猪副伤寒。5、猪霍乱沙门氏菌:猪败血症、肠炎。6、鸡白痢沙门氏菌:鸡白痢。垂直传播。7、鸡伤寒沙门氏菌:鸡伤寒。8、鸭沙门氏菌:鸭沙门氏菌病。9、鼠伤寒沙门氏菌:各种畜禽肠炎、败血症、人食物中毒。鸡白痢沙门氏菌:心脏变性变形、心肌肉芽肿结节鸡白痢:卵耀变色、变形左:正常,右:鸡白痢鸡白痢:肝坏死点(七)微生物学诊断1、取材:粪便、消化道内容物、血、脓、流产胎儿等。2、分离培养:用增菌培养基(如亮绿-胆盐-四硫磺酸盐肉汤)增菌培养,同时用鉴别培养基如麦康凯、远藤氏等鉴别培养。3、鉴定:接种三糖铁(斜面划线并穿刺),下层变黄,上层不变色,可初步诊断为沙门氏菌。进一步作生化鉴定。4、血清型鉴定:用A-E群多价抗O血清确定是否为沙门氏菌,后用分组抗O血清鉴定组别,再用单因子抗O血清、抗H血清测定其抗原组成。(八)免疫畜禽康复可获得一定免疫力。仔猪副伤寒弱毒苗可作预防。四、耶尔森菌属G-球杆菌或卵圆形杆菌,两极浓染(比巴氏杆菌大、多形)。除鼠疫耶尔森菌无鞭毛外,其余有1~6根鞭毛。在22OC培养能运动。需氧或兼性厌氧,对培养要求较高,麦康凯上能生长。生化见大肠杆菌。属内分11个种:重要的有:1、鼠疫耶尔森菌:鼠疫并传染人。2、假结核耶尔森菌:兔、豚鼠伪结核。3、小肠结肠炎耶尔森菌:家畜一般不致病。人食物中毒。五、克雷伯氏菌属寄生动物呼吸道、鸡肠道的条件致病菌。代表菌种为肺炎克雷伯氏菌。特点:组织中形成荚膜似肺炎双球菌,无鞭毛,可引起人畜肺炎、乳房炎、化脓、败血症。六、变形杆菌属特点:G-杆菌、无芽孢、无荚膜、周鞭毛。运动活泼、多形性(球状到长丝状)。一般不致病,引起人畜食物中毒。第二节巴氏杆菌科巴氏杆菌属曼氏杆菌属里氏杆菌属放线杆菌属嗜血杆菌属一、巴氏杆菌属多杀性巴氏杆菌(一)形态染色:G-球杆菌或短杆菌,两端钝圆。组织片用瑞氏或美兰染色,呈明显两极着色特征。强毒株能形成荚膜、无鞭毛。(二)培养特征:需氧或兼性厌氧。普通培养基生长不良,须加入血或血清。形成针尖大菌落、不溶血。麦康凯上不生长。(三)生化特征:发酵糖能力弱,葡萄糖+,乳糖-,MR-,VP-,I+。鸡血涂片:巴氏杆菌两极染色血液中多杀巴氏杆菌禽霍乱鸡血涂片:巴氏两极染色(四)血清型根据K抗原(荚膜抗原)分为A、B、C、D、E、F六个群。根据O抗原(菌体抗原)分为16个型。二者组合成该菌血清型。各型之间有的有交叉免疫原性,有的无。最好用当地菌株制苗。我国巴氏杆菌血清型来源主要血清型次要血清型禽多杀巴氏5:A8:A猪多杀巴氏5:A;6:B8:A;2:D羊多杀巴氏6:B兔多杀巴氏7:A5:A(五)抵抗力:不强,在腐败组织只能存活1~2月。(六)致病性猪肺疫禽霍乱、牛、羊、马、兔的出血性败血症。鸽最易感,小白鼠、家兔有较强易感性。鸡霍乱:小肠前段弥漫出血鸭霍乱:心冠脂肪及心外膜出血点(七)微生物学诊断1、取材:肝、脾、血。2、镜检:组织触片、瑞氏染色两极着色。3、分离培养:血平板。针尖大露滴样菌落。4、动物实验:肌注小白鼠、兔或鸽,很快死亡,镜检再见两极特征。(八)免疫:猪瘟、猪肺疫、猪丹毒三联弱毒苗;兔瘟、兔巴氏二联灭活苗;鸭巴氏杆菌蜂胶灭苗;鸡巴氏杆菌蜂胶苗。二、曼氏杆菌属原名:溶血性巴氏杆菌。引起牛、绵羊肺炎、新生羔羊败血症。形态与多杀性巴氏杆菌相似,主要区别点是:血琼脂上溶血、麦康凯琼脂上能生长,形成红色菌落。乳糖+,靛基质-。三、里氏杆菌属鸭疫里氏杆菌(原名:鸭疫巴氏杆菌)是代表种。(一)形态染色:G-、杆状或椭圆形,多数单在,可形成荚膜,无鞭毛无芽胞。瑞氏染色可见两极着色。