霉菌形态的观察

实验八霉菌形态的观察一、实验目的：二、实验原理：三、实验材料：四、实验内容：一、实验目的：•学习并掌握观察霉菌形态的基本方法；•了解四类常见霉菌的基本形态特征。二、实验原理：•霉菌的营养体是分枝的丝状体。其个体比细菌和放线菌大得多，分为基内菌丝和气生菌丝。气生菌丝生长到一定阶段又可分化出繁殖菌丝。不同霉菌的繁殖菌丝可以形成不同的孢子。霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。•霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约为3-10μm）,常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。霉菌菌丝较粗大，细胞易收缩变形，且孢子容易飞散，所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液，用此染液做霉菌制片的特点是细胞不变形，具有杀菌、防腐作用，不易干燥，能保持较长时间，能防止孢子四处飞散，棉兰具有一定的染色作用，染液的蓝色能增大反差。（如果用水封片，常因渗透作用而膨胀，水也易使菌丝、孢子和气泡混为一团，影响观察。）•霉菌菌落特征：•因霉菌的菌丝较粗且长，故形成的菌落较疏松，常成绒毛状、絮状、蜘蛛网状或毡毯状，一般比细菌和放线菌菌落大几倍到几十倍。•在固体培养基上菌落最初往往是浅色或白色，当菌落上长出各种颜色的孢子后，由于孢子具有不同形状、构造和颜色，使菌落表面呈现肉眼可见的不同结构和色泽，如黄、绿、青、黑、橙等。•有些霉菌的菌丝还能分泌一些水溶性色素扩散到培养基内，使培养基正面和反面呈现不同的颜色。•同一霉菌在不同成分的培养基上可形成不同特征的菌落，但各种霉菌在固定的培养基上形成的菌落，其形状、大小、颜色等特征是稳定的，因此菌落特征是鉴定霉菌的重要依据之一。三、实验器材•1.菌种：在马铃薯琼脂斜面上培养3—4天的青霉(Penicilliumsp.)、曲霉(Aspergillussp.)、根霉（Rhizopussp.）、毛霉（Mucorsp.）；•2.染色液和试剂：乳酸石炭酸棉蓝染色液；•3.器材及用具：剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、解剖针、显微镜。四、实验方法及步骤：水浸制片法：•在载玻片上滴加一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液或蒸馏水。•用解剖针从生长有霉菌的斜面挑取少量带有孢子的霉菌菌丝，用50%的乙醇浸润，再用蒸馏水将浸过的菌丝洗一下，然后放入载玻片上的液滴中，仔细地用解剖针将菌丝分散开来。（也可省略酒精和水浸润，洗涤）•注意取菌时，毛霉和根霉用解剖针挑取少量菌丝即可，青霉和黑曲霉和培养基结合紧密，不易挑取，可连培养基一起挑取，再在染液中分离菌丝。青霉和曲霉的培养时间不宜过长，一般为2-2.5天，以免菌丝与培养基不好剥离。•盖上盖玻片（勿使产生气泡，且不要再移动盖玻片）。（黑曲霉不易观察到足细胞）•镜检：先用低倍镜，必要时转换高倍镜镜检并记录观察结果。附：四种霉菌图片毛霉根霉青霉附：四种霉菌的主要特征名称（属）曲霉