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卫生学实习指导（6个实验）武汉大学公共卫生学院目录实习一、室内空气清洁度及小气候测定与评价…………………………………………………1一、实习意义与目的………………………………………………………………………………1二、室内空气清洁度的测定与评价…………………………………………………………………1三、室内小气候的测定与评价………………………………………………………………………6实习报告一、室内空气清洁度及小气候测定与评价………………………………………………11实习二、漂白粉中有效氯的含量、水中余氯及漂白粉加入量测定…………………………14一、漂白粉有效氯含量的测定……………………………………………………………………14二、水中余氯的测定---甲土立丁比色法…………………………………………………………15三、水中漂白粉加入量测定……………………………………………………………………16实习报告二、漂白粉中有效氯的含量、水中余氯及漂白粉加入量测定………………………………17实习三、营养调查………………………………………………………………………………18一、实习意义与目的……………………………………………………………………………18二、营养调查方法………………………………………………………………………………18三、血红蛋白测定（氰化法）……………………………………………………………………26实习报告三、营养调查……………………………………………………………………………30实习四、牛乳掺假快速检测及食物中毒课题讨论……………………………………………33一、牛乳掺假快速检测……………………………………………………………………………33二、食物中毒课题分析……………………………………………………………………………35实习报告四、牛乳掺假快速检测及食物中毒课题讨论……………………………………………42实习五、空气中苯的测定、苯致急性中毒实验及苯中毒分析………………………………45一、实习意义与目的……………………………………………………………………………45二、空气中苯的测定及急性中毒实验……………………………………………………………45三、GILAIR-3型个体采样泵采集苯蒸汽…………………………………………………………47四、苯中毒课题分析……………………………………………………………………………48实习报告五、空气中苯的测定、苯致急性中毒实验及苯中毒分析…………………………………50实习六、生产环境空气中粉尘的测定与评价…………………………………………………54一、实习意义与目的……………………………………………………………………………54二、粉尘浓度的测定（滤膜重量法）………………………………………………………………54三、粉尘分散度的测定……………………………………………………………………………55四、粉尘作业课题评价……………………………………………………………………………57实习报告六、生产环境空气中粉尘的测定与评价…………………………………………………601实习一室内空气清洁度及小气候测定与评价一、实习意义与目的人们一生中大部分时间在室内度过，据估计当前每人一天有18小时左右在室内活动；随着高层建筑的发展，人们在室内活动时间将会增加，尤其老、弱、病、残、幼者。清洁的室内空气环境不但可以给人舒适的感觉，而且可促进睡眠，增强记忆，减少疾病。因此，进行室内空气清洁度即小气候的测定评价，具有重要的卫生学意义。作为室内空气清洁度评价常用的指标是空气中的CO2、细菌、灰尘、离子含量以及其他有害物质的含量。室内有围护结构（墙、屋顶、地板、门窗等）的作用，形成了与室外不同的室内气候，称为室内小气候。室内小气候是由气温、气湿、气流和热辐射（周围物体表面温度）四种气象因素组成，这四种因素综合作用于人体。室内小气候对室内空气清洁度亦有一定的影响。通过本次实习，了解良好的室内空气对健康的重要意义，基本掌握对室内空气的CO2、CO及细菌含量的测定方法，室内小气候测定仪器使用方法，并对室内空气清洁度及小气候对机体综合影响作出初步评价。二、室内空气清洁度的测定与评价（一）空气中二氧化碳含量的测定室内空气中的CO2主要来源于人体的呼气（约含4%）和燃料的燃烧过程，其浓度一般不会超过0.3%，但在特殊密闭室中，如酿造厂的地窖中可高达5-10%。1、原理所用仪器为便携式红外线分析器（GXH-301B型），系由光学和电器两大系统组成，采用固定分光型时间双光束，并以锑化铟作为红外线的接手光敏检测元件。由于CO2气体对一定波长的红外线具有特征吸收，因此，设红外线光源发出的红外线强度为I0，它通过长度为L的气室后，能量被CO2气体吸收则变成I1，在此条件下符合贝尔定律，能量I1满足下式I1=I0eKCL式中I1—被CO2吸收后的红外线能量I0—入射光红外线强度K—特定气体的吸收特性常数C—CO2气体浓度2L—气室长度（即气层厚度）从上式可见，气体种类，气室长度一定时，I1仅与其浓度呈线性关系，故测出I1的大小，就等于测出气体的浓度变化。现以模式图1-1概括仪器工作原理如下：图1-1仪器工作原理图当红外光源通电后产生连续波长的红外线辐射，经调制筒处理为断续辐射双光束红外线，一束为4.26μm波长的分析光束，另一束为3.9μm波长的参比光束，前者在气室内被CO2气体分子吸收，后者无任何变化，两光束经光敏检测器监测后转变成分析电信号和参比电信号，经过放大器，分离器和减法器等电路，将CO2浓度变化以电信号从数字显示器输出结果。监测范围：Ⅰ档0-0.5%CO2，Ⅱ档0-1.5%CO2。2、器材便携式红外线分析器（GXH-301B型）1台；CO2标准气瓶（含量0.4-0.5%，本实验室所用标准气瓶含量为0.468%）1瓶；气体流量计1个；过滤器（含碱石灰和二氯化钙）1个；取样器1000ml玻璃注射器、采样袋各一个；胶皮管。3、采样方法为了适应本仪器的测定，可用直接采样法进行现场空气中CO2的采样。以100ml玻璃注射器将待测的空气注入采样袋，反复2-3次换洗袋内原有剩余气体，再将空气样本注满采样袋，闭紧袋口，立即送至仪器室进行检测。4、测定步骤（1）校准；①插上电源插头，打开仪器开关，泵开关处于关断状态；②预热30分钟（红灯约5分钟后开始亮，示预热电路正常）；③校零点：如图1-2之a、b，将过滤器两端用胶皮管连接出、入口，打开泵开关（绿灯亮），再将波段开关置“Ⅰ档”，待显示稳定后，调节“零点”旋钮，使数显器为“0”位（如用N2气体校零点，可不经过滤器而直接通入仪器入口），断泵开关（绿灯灭）；④校终点：将CO2标准气钢瓶用胶皮管通过转子流量计与仪器入口连接，出口处放空（图2-C）。当CO2检测范围在0-0.5%时，置波段开关于“Ⅰ档”。打开钢瓶总阀，通过转3子流量计上的旋钮缓慢进行流量调节，使流量为0.5L/min，待数字显示稳定后，调节终点“Ⅰ档”旋钮，使显示值与标准气浓度值一致。当CO2监测范围在0-1.5%时，置波段开关于“Ⅱ档”，其他操作步骤与置波段开关“Ⅰ处”相同，但调节重点应使用“Ⅱ”旋钮，并使显示值与标准气浓度值一致。终点校正完毕后，关标准气瓶总阀，再将过滤器两端连接在仪器出口、入口上，打开泵开关，待显示器读数回复到“0”位，即可测量样品。图1-2仪器工作步骤示意图（2）样品测定如图1-2-d将取样器用胶皮管与入口接通，波段开关置“Ⅰ”或“Ⅱ”处，打开泵开关，即可将待测气体抽吸入气室，从仪器数字显示器上直接读取待测气体中CO2百分含量。（3）注意事项①“零点”应经常校准。连续使用时，“终点”可3天至1周校准一次，如发现拨动不大，可更长时间再校准。②调“零点”时，过滤器一定要串通出、入口上，否则，其中装的碱石灰很快失效。在不用过滤器时，同样应将过滤器两端短接。③标准气用过后，一定要将钢瓶总阀门关紧以防漏气。④过滤器以及取样器手柄两头都装有定性滤纸防尘，滤纸受潮变色后要更换。过滤器中的碱石灰（粉红色颗粒）长期使用后可受潮变色失效，如发现用过滤器循环调“0”困难，说明碱石灰已失效，需更换。⑤仪器不用时，需将出、入口用胶皮管接封，防止气室污染。本仪器适宜于干燥（相对湿度80%），无腐蚀性气体的环境存放。4（二）空气中一氧化碳测定（检气管法）空气中有毒物质的常规检验方法，一般需要在现场采集大量的空气样品，将待测有毒物质吸收在吸收液中或者阻留在吸附剂上，再带回实验室分析。在实际工作中还需采用一些能在现场测出瞬时浓度的快速方法。一氧化碳快速测定管是一种常用于现场的快速检验方法，它具有简便、快速，便于携带和灵敏等优点。检气管是一种填有显色指示粉的细玻璃管，管内的指示粉是用吸附了显色化学试剂的载体制成的，同一种被检气体由于生产厂家使用的显色指示粉的不用，有关原理、结果判定互有差异。因此，在使用前应仔细阅读检测管盒上的说明书再进行操作。本实习指导介绍北京朝阳区生产的一氧化碳快速检气管的使用方法。1、原理一氧化碳将碘酸钾还原，产生游离碘，碘与三氧化硫作用，生成棕色络合物，根据指示胶棕色环所到刻度，确定一氧化碳浓度（ppm）（1ppm=1000mg/m3）。5CO+2KIO3K2O+5CO2+I2I2+SO3棕色络合物2、器材100ml注射器1支；一氧化碳简易测定管1支；一氧化碳过滤管1支；乳胶管2支。3、测定方法①在测定地点先用现场空气将100ml注射器抽洗2-3次，再抽取被检空气100ml待测。②用锉刀将检气管的两端锯断，用乳胶管将注射器与检气管“0”刻度连接，当有干扰气体共存，如饱和及不饱和碳氢化合物，硫化氢、氨及氮氧化物时，应在注射器与检气管间加一过滤管。③将待测气体以100ml/100秒的均匀速度注入检气管中，待注气完毕，便可以从棕色环所到刻度读出所采气体样中一氧化碳含量（ppm）。④测定时的适宜温度是15-35℃，当环境中温度低于15℃时，在注气时可将检测管握在手中使用。（三）细菌总数检验方法1、撞击法（1）原理采用撞击式空气微生物采样器采样，通过抽气动力作用，使空气通过狭隙或小孔而产生高速气流，使悬浮在空气中的带菌粒子撞击到营养琼脂平板上，经过37℃、48h培养后，计算出每立方米空气中所含的细菌菌落数的采样测定方法。（2）仪器和设备高压蒸汽灭菌器；干热灭菌器；恒温培养箱；冰箱；平皿（直径9cm）。制备培养基所用的一般设备：量筒，三角烧瓶，PH计或精密PH试纸等；撞击式空气微生物采样器。（3）操作步骤5①选择有代表性的位置设置采样点。将采样器消毒，按仪器使用说明进行采样。②样品采样完后，将带菌营养琼脂平板置于36±1℃恒温箱中，培养48h，计数菌落数，并根据采样器的流量和采样时间，换算成每立方米空气中的菌落数，以CFU/m3报告结果。2、自然沉降法（1）原理指直径9cm的营养琼脂平板在采样点暴露5分钟，经36±1℃、48h培养后计算出生长的细菌菌落数的采样测定方法。（2）仪器和设备营养琼脂培养基平皿2个。（3）操作步骤①设置采样点时，应根据现场的大小，选择有代表性的位置作为空气细菌检测的采样点。通常设置5个采样点，即室内墙角对角线交点为1采样点，该交点与四墙角连线的中点为另外4个采样点。采样高度为1.2-1.5m。采样点应远离墙壁1m以上，并避开空调、门窗等空气流通处。②将营养琼脂平板置于采样点处，打开皿盖，暴露5分钟，盖上皿盖，翻转平板，置于36±1℃恒温箱中，培养48h。③计算每块平板上生长的菌落数，求出全部采样点的平均菌落数，以培养皿中的菌落数（cfu）/皿报告结果。规定撞击法≤4000cfu/m3；沉降法≤45cfu/皿。（医院候诊室卫生标准值（GB9671-1996））。（四）室内空气清洁度评价1、室内空气应无毒、无害、无异常嗅味2、室内空气质量标准见表1-1表1-1室内空气质量标准（GB/T18883-20022003-03-01实施）序号参数类别参数单位标准值备注1物理性温度℃22-28夏季空调16-24冬季采暖2相对湿度%40-80夏季空调30-60冬