药品卫生检验方法总则

药品卫生检验方法总则１．抽样１．１供试品一般按批号抽样１．２抽样时，凡发现有异常或可疑的样品，应抽选有疑问的样品，但因机械损伤明显破裂的包装不得作为样品。１．３凡已能从药品、瓶口（外盖内侧及瓶口周围）外观看出长螨、发霉、虫蛀以及变质的药品，可直接判为不合格品，无需再抽样检验。１．４抽样量一般应为检验用量（２个以上最小包装单位）的３倍量。１．５一般采用随机抽样方法抽样。２．供试品保存２．１供试品在检验之前，应保存在阴凉干燥处（勿冷藏或冷冻），以防供试品中的污染菌因保藏条件所引起致死、损伤或繁殖。２．２供试品在检验之前，应保持原包装状态，严禁开启。包装已开启的样品不得为供试品。３．检验３．１供试品检验项目按中华人民共和国卫生部颁布的《药品卫生标准》确定。３．２检验的全过程必须符合无菌技术要求。３．３除另有规定外，供试品制备成供试液后，应在均匀状态取样。３．４供试品制成供试液后，应在１小时内注皿操作完毕。４．检验量４．１所有剂型的检验均需取自２个以上包装单位。４．２口服固体制剂中成药丸剂、片剂、冲剂、散剂、胶剂、茶剂、曲剂、胶囊剂等检验量均为１０ｇ。蜜丸除应取自２个以上包装外，还应取自４丸以上。化学药品、生化药品的粉剂、胶囊剂、片剂、冲剂、滴丸剂等检验量为１０ｇ。４．３口服液体制剂：糖浆剂、乳剂、合剂、溶液剂、混悬剂、酒剂等检验量为１０ｍｌ。４．４半固体制剂：膏剂等检验量为１０ｇ。４．５外用液体制剂：滴眼剂、滴鼻剂及其他液体制剂检验量为１０ｍｌ。４．６外用栓剂、软膏剂、眼膏剂等检验量为５ｇ。４．７膜剂，除另有规定外，中药膜剂检验量取３０～５０平方厘米，化学药及生化药膜剂取１０平方厘米，以上均需取自２个以上包装并４片以上。４．８特殊贵重的或极微量包装的药品，其检验量可酌减。除另有规定外，口服固体制剂不得低于３ｇ；液体制剂采用原液者不得少于６ｍｌ、采用供试液者不得少于３ｍｌ；外用药品不得少于５ｇ。４．９检查活螨的取样量，见活螨检验法。５．供试液的制备５．１一般供试品的供试液制备方法。５．１．１固体供试品称取１０ｇ，置研钵中，以１００ｍｌ稀释剂（生理盐水或磷酸盐缓冲液（０．１ｍｏｌ／Ｌ）分次加入研磨细匀，并转移至２５０ｍｌ锥形瓶中，使成１∶１０供试液。或将供试品和稀释剂同置匀浆仪中，以转速３０００～５０００转／分，开机１—２分钟。对吸水膨胀或粘度大的供试品，可制成１∶２０供试液。５．１．２液体供试品量取１０ｍｌ，加入含９０ｍｌ稀释剂的２５０ｍｌ锥形瓶中，混匀成１∶１０供试液。合剂（含王浆、蜂蜜者）、滴眼剂等可以原液为供试液。５．１．３半固体供试品称取１０ｇ，加入含１００ｍｌ稀释剂的２５０ｍｌ锥形瓶中，混匀成１∶１０供试液。５．２特殊供试品的供试液制备方法５．２．１非水溶性基质供试品供试液的制备方法（１）软膏剂、乳膏剂吐温西黄蓍胶（或羧甲基纤维素钠）法称取供试品５ｇ，置研钵或烧杯中，加吐温—８０①８ｍｌ，充分研匀。加入西黄蓍胶或羧甲基纤维素钠②２．５ｇ，充分研匀以９２ｍｌ４５℃的稀释剂，边加边研磨，使成均匀乳剂，并移至２５０ｍｌ锥形瓶中，即为１∶２０供试液。注①吐温—８０预先以１２１℃高压灭菌２０分钟。②西黄蓍胶、羧甲基纤维素钠预先以１４０℃干热灭菌３０分钟。——原注液体石蜡吐温法称取供试品５ｇ，分别量取液体石蜡（液体石蜡，预先以１６０℃干热灭菌２小时）２０ｍｌ，吐温—８０２０ｍｌ，稀释剂６０ｍｌ。先将供试品置研钵中，边研磨边加液体石蜡，然后再边研磨边滴加吐温—８０，研磨均匀后，再边加稀释剂边研磨，初始每次约１ｍｌ，待起团块时，加入量可增至约３ｍｌ，稍停１分钟，再轻轻研磨至乳化，将稀释剂加完为止。即得１∶２０供试液。（２）栓剂称取供试品５ｇ，置２５０ｍｌ锥形瓶（内含玻璃珠若干粒）中，加适量稀释剂，置４５℃水浴浸泡１０分钟使融，加吐温—８０２～４ｍｌ，振摇使之乳化，再加稀释剂（稀释剂和吐温总量为５０ｍｌ）制成１∶１０供试液。（３）油剂量取供试品１０ｍｌ，加入１％吐温—８０稀释剂９０ｍｌ，混匀，制成１∶１０供试液。５．２．２胶囊剂、胶丸及胶剂供试液制备方法（１）胶囊剂、胶丸剂称取供试品１０ｇ置锥形瓶中，加入稀释剂１００ｍｌ，于４５℃水浴中振摇至溶，即为１∶１０供试液。（２）胶剂取胶剂若干，捣碎，称取１０ｇ，再用研钵研细，转入２５０ｍｌ锥形瓶中，加入稀释剂１００ｍｌ，置于４５℃水浴中，振摇使溶，即为１∶１０供试液。５．２．３肠溶胶囊（片）剂供试液制备方法称取供试品１０ｇ，置锥形瓶中并放入４５℃水浴，加入ＰＨ６．８磷酸盐缓冲液（附录二２）１００ｍｌ，保温、振摇，使肠衣溶解，混匀，即得１∶１０供试液。５．２．４气雾剂供试液制备方法。将供试品置冰室内２小时后，取出，用灭菌钢锥小心钻孔，使抛射剂缓慢释放，然后再用灭菌注射器加入适量稀释剂，混匀后吸取相当于１０ｇ或１０ｍｌ的供试品，再稀释成１∶１０供试液。５．２．５膜剂供试液制备方法中药膜剂除另有规定外，取３０—５０平方厘米，将药膜剪成碎片，置锥形瓶中，加稀释剂适量，使每１０ｍｌ含１平方厘米浓度，浸泡１０～１５分钟，摇匀，即得。化学药膜剂除另有规定外，取１０平方厘米，置锥形瓶中，加稀释剂１００ｍｌ，浸泡、振荡使溶，即得。必要时，可置４５℃水浴中助溶。５．３含抑菌成分供试品的供试液制备方法。凡含有防腐剂或抑菌成分且影响检验（阳性对照控制菌不生长）的供试品，可根据供试品的性质，控制菌的特性及检验条件等按下列方法之一（或两种以上方法联合应用）及其他适宜方法处理后，作控制菌检验。５．３．１离心沉淀法可溶性供试液取供试液１０ｍｌ，置入刻度离心管中，以３０００转／分以上离心沉淀３０分钟，用毛细吸管吸取上清液弃掉，留下管底约２ｍｌ残余液，将其全部洗入增菌培养基中，作控制菌检验。混悬供试液取供试液１０ｍｌ，置刻度离心管中，先以５００转／分离心沉淀５分钟，取其上层液移入另一离心管中，再经３０００转／分以上离心沉淀３０分钟，弃去上清液，保留约２ｍｌ残余液，全部洗入增菌培养基中，作控制菌检验。本法适用于一些抑菌作用不强的中、西药品，如蜜丸、水丸、片剂、散剂、冲剂、胶囊剂及液体制剂。应用本法须严防操作污染，并注意上层液或上清液和管底残渣的分离，避免沉渣混入其中。５．３．２薄膜过滤法取规定量的供试液，按１ｍｌ加生理盐水约１０ｍｌ的比例，混匀，置入薄膜过滤器内，减压过滤至干，再以生理盐水或其他适宜溶剂冲洗滤膜３次，每次５０ｍｌ。取出滤膜，剪成２—４片，使每片相当于供试品１ｇ或１ｍｌ。放入增菌培养基中，作控制菌检验。本法适用于水溶性抑菌成分的中、西药品和滴眼剂等的制剂“灭活”处理。安放滤膜时，注意滤膜与滤器应密合，防止滤膜破损、漏液。本法所用微孔滤膜孔径应为０．４５±０．０２μｍ。５．３．３钝化剂中和法磺胺类药物中和法取规定量供试液，加入含１％对氨基苯甲酸０．５ｍｌ的１００ｍｌ增菌液中，作增菌培养即得。本法适用于含磺胺较少的制剂、如三磺软膏、消炎眼药水、斑马眼药水等。应用本法可因供试品不同，对氨基苯甲酸的用量，可适当调整。含重金属药物中和法取规定量供试液，加入硫乙醇酸钠—胱氨酸增菌液（附录三３６）１００ｍｌ中，作增菌培养即得。本法适用于含重金属盐类药物的检验，如磺胺嘧啶银软膏等。含洗必泰等制剂中和法取规定量供试液，加入含适量吐温—８０等表面活性剂的增菌液中，作增菌培养即得。本法适用于洗必泰含片、洗必泰栓、霉滴栓及其他含抑菌成分的供试品。应用本法须注意，由于供试品不同，用量应预试，表面活性剂的用量应预试，用量不可过大，否则本身亦产生抑菌作用。５．３．４沉降法（１）取规定量供试液，自然沉降５分钟，吸取上层液于增菌液中，作增菌培养即得。（２）取规定量供试液，自然沉降５分钟，吸取上层液于含１％对氨基苯甲酸１ｍｌ的增菌液中，作增菌培养即得。本法适用于水溶性小的抗菌制剂检验，如磺胺类药。（１）法适用于单一成分固体制剂，如磺胺嘧啶片检验；（２）法适用于复方磺胺制剂，如复方磺胺嘧啶片、复方新诺明片等检验。应用本法时，供试品应充分研细，并与稀释剂充分摇匀，使污染菌分散于液相中；沉降时间不宜超过５分钟，以防菌细胞下沉；取上层液时，避免吸入药渣。５．３．５稀释法取供试液１０ｍｌ，加入较大量增菌液中（使该供试品稀释至阳性对照菌能生长的浓度），作增菌培养即得。本法适用于抑菌作用不强的中药、化学药品检验。６．对照试验６．１阴性对照试验测试检验全过程无菌技术的可靠性。６．１．１菌数测定阴性对照试验：用吸管从供用的稀释剂中各吸取１ｍｌ于４个无菌平皿中，分别按细菌数、霉菌数测定方法注皿培养、检查，不得长菌。６．１．２控制菌检验阴性对照试验：用吸管从供用的稀释剂中吸取１ｍｌ于增菌液中，按控制菌检验方法检查，不得长菌。６．２阳性对照试验检查供试品是否对控制菌生长产生干扰作用及检查培养条件是否适宜。６．２．１阳性对照试验方法同供试品检验，于供试液中加入一定量的相应对照菌，作平行试验。６．２．２规定阳性对照菌株：大肠杆菌（ＣＭＣＣ（Ｂ）４４１０２）、沙门氏菌（ＣＭＣＣ（Ｂ）５００９４、绿脓杆菌（ＣＭＣＣ（Ｂ）１０１０４）、金黄色葡萄球菌（ＣＭＣＣ（Ｂ）２６００３）及破伤风杆菌（ＣＭＣＣ（Ｂ）６４０６７）。６．２．３对照菌的加入量为５０～１００个，可事前预试确定。需气菌常用计数方法，取３７℃培养１８～２０小时的新鲜肉汤培养物，１０倍递增稀释至０．０００００６，取其０．１ｍｌ于普通肉汤琼脂平板表面涂抹或取０．００００００７稀释液１ｍｌ以注皿法进行菌数测定。６．２．４当供试品未检出供试菌时，而阳性对照试验也未能检出，不能做出供试品未检出控制菌的结论。６．２．５阳性对照试验操作必须与供试品检验操作严格分开，避免交叉污染。７．检验报告单位７．１细菌数、霉菌数和酵母菌数的测定一般以１ｇ或１ｍｌ为单位的菌落数表示。中药膜剂以１０平方厘米、化学药及生化药膜剂以１平方厘米为单位的菌落数表示。眼科用药的霉菌和酵母菌数以１ｇ或１ｍｌ为单位的菌落数或“未检出”表示。７．２控制菌检验报告一般以１ｇ或１ｍｌ、中药膜剂以１０平方厘米、化学及生化药膜剂以１平方厘米为单位报告“检出”或“未检出”。８．复试８．１菌数测定不合格者应复试。控制菌检验以１次检出为准，不再复试，但应保留检出菌株１个月备查。８．２复试项目以不合格项目为准，作单项复试。８．３复试需另取同批号样品，测定２次。８．４复试报告以３次测定结果的算术平均值报告。８．５眼科用药的霉菌和酵母菌数复试报告，须以二次复试结果均不得长菌，方可判定合格。９．特别抽样不符合部颁药品卫生标准规定的药品，经卫生行政部门审批准予在不影响外观与质量的前提下，充许采取适宜措施进行处理，处理后的药品抽样按本款进行。９．１抽样方法大包装抽样，按出厂的大包装，１０件以下抽１件，１０件以上每增加２０件加抽１件，最后不足１０件者不加抽，超过１０件加抽１件。小包装抽样，按规定手续，从大包装中随机抽取小包装２个以上单位为供试品。９．２检验项目：按部颁《药品卫生标准》规定检验，不得单项检验。９．３检验报告９．３．１测定菌数报告：以各次测定结果全部平均值报告。９．３．２控制菌按全部复试检验结果报告①，如全部复试均未检出控制菌时，报告为：“按规定抽样检验结果未检出××菌”；①如全部抽样中任一样品检出控制菌时，报告为：“按规定抽样检验，检出××菌，不符合药品卫生标准规定”。注①报告中写出具体的控制菌名称。细菌数测定细菌数是指规定单位的非规定灭菌药品制剂中污染活细菌的数量。是判定药品受到细菌污染程度的标志。其内含是多义的。细菌数愈多，表明药品受到致病微生物污染的可能性以及药品制剂的变质可能性也愈大，安全性也就越差。同时细菌数测定也是对生产单位的药品原辅料、器具设备、工艺流程、生产环境和操作者的卫生状况进行卫生学评价的综合依据之一。细菌数测定采用平板菌落计数法，是一种活菌计数法。测定结果只反映出在规定条件下生长的细菌数，不可能包括在本法条件下不生长的细菌，因而测定数只可能低于实际的污染数。此外，测定中１个细菌可能繁殖成１个菌落，而一群也可能只形成１个菌落，以及污染的不均匀性等等原因